番茄子时外植体芽的分化过程与乙稀释放的关系

本文对番茄子对外植体培养过程中乙烯的释放和芽的分化进行了研究。结果表明,番茄子对外植体培养１ｈ后开始释放乙烯,第３小时乙烯释放达到最高峰,随后迅速下降,乙烯释放水平与番茄子对外植体分化能力呈负相关。外植体芽的分化过程中,乙烯释放水平很低,但在芽形成以前略有增加,乙烯拮抗剂及其生物合成抑制剂促进子对外植体芽的分化过程。伤害可能是导致番茄子叶外植体乙烯释放的主要原因。     

番茄离体培养过程中器官发生的细胞组织学观察

对番茄下胚轴、子叶、茎段、叶片、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察。研究结果表明番茄不同类型外植体在同样的培养条件下,愈伤组织生长表现出明显差异,其中下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动最早,生长最快,其分裂方式基本为无丝分裂,未见有丝分裂,因此我们认为以不定芽方式获得转基因植株时,植株的所有性状变化,是否纯属目的基因所为,应该反复考察,不能忽视不定芽产生过程中的种种变化;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规则的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到的正常芽的比例高于子叶的;番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

番茄离体培养过程中器官发生的细胞组织观察

对番茄下胚轴、子叶、茎段、叶片、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察。研究结果表明：番茄不同类型外植体在同样的培养条件下,愈伤组织生长表现出明显差异,其中下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动最早,生长最快,其分裂方式基本为无丝分裂,未见有丝分裂,因此我们认为以不定芽方式获得转基因植株时,植株的所有性状变化,是否纯属目的基因所为,应该反复考察,不能忽视不定芽产生过程中的种种变化;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规则的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到的正常芽的比例高于子叶的;蕃茴离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

番茄子叶外植体转化系统的优化

目的 :对番茄子叶外植体的转化进行优化 ,为进行转基因番茄的研究奠定基础。方法 :通过正交设计实验 ,以子叶外植体的存活天数为观察指标 ,分别对农杆菌稀释浓度、浸染时间和转化方式等条件进行优化。结果 :在子叶预培养 2d、活化农杆菌稀释倍数约 30倍、侵染时间为 1 0min、共培养时间为 2d的情况下 ,子叶存活时间最长 ,抗性芽产生频率达 2 5 %。结论 :获得了高效的番茄子叶外植体转化系统 ,为进行基因的转化奠定了基础     

乙烯前体ACC对番茄叶外植体分化的影响（简报）

在含有5μmol/L IAA,ZT或BA的MS培养基中,添加1.0μmol/L ACC能显著促进番茄叶外植体分化出芽;而在含有5μmol/L IAA的MS培养基中,添加10μmol/L ACC可直接诱导番茄叶外植体分化出大量的根。番茄叶外植体的乙烯释放速率随培养基中ACC浓度提高而增高,培养第2天时为最高,但与IAA的浓度关系不大。     

番茄果实特异性启动子的克隆与遗传转化研究

为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达,克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因( Polygalacturonase,PG)的启动子.以中蔬四号番茄为材料,建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系;以GUS为报告基因,构建PG:GUS植物表达载体,转化番茄.结果表明,在1.0 mg/L ZT的MS分化培养中,番茄子叶的发芽率最高,芽的诱导率高达91％,且发生畸态芽和褐化的外植体最少;通过抗生素浓度对农杆菌的抑制效果试验发现,当头孢霉素的浓度为200 mg/L时,抑制农杆菌的效果最好;成功克隆了番茄PG启动子,将PG启动子驱动的GUS基因转入番茄,对转基因后代果实的GUS染色表明,PG启动子驱动的外源基因在果实中特异表达.     

改善培养条件以利于番茄的遗传转化

通过改善培养条件可以促进番茄的遗传转化。本实验从六个番茄杂交组合亲本中筛选出两个分化频率较高的品种,费洛雷德与402;它们子叶比下胚轴分化频率高些,共培养后子叶也比下胚轴易于培养与分化,因此宜选用子叶作为外植体;激素宜用 NAA 与 BA,且较合适的浓度分别为0.2mg/L,2mg/L;最好是从子叶基部处切下子叶,染菌时也只把基部的     

影响油菜子叶外植体不定芽高频率再生的因素

采用７个甘蓝型和２个白菜型油菜品种研究了影响子叶外植体芽再生的一些因素和不同基因型的子叶外植体的离子体培养反应和芽再生能力。结果表明,苗龄４ｄ的幼苗叶子含２,４－Ｄ０．５－１．２ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基培养２或６ｄ后再转到分化培养基上培养,芽再生率３４％－４６％。     

橡胶树未成苗体细胞胚的茎芽分化及利用

以橡胶树未成苗体细胞胚为试材,选取未成苗双子叶胚、连体胚、多子叶胚、单子叶胚和子叶愈伤化胚作为外植体,研究不同体细胞胚类型的外植体分化茎芽的情况,并利用其进行幼态微型芽条的培育研究。结果表明:在植株诱导培养基中培养80d后,未成苗双子叶胚、连体胚、多子叶胚、单子叶胚、子叶愈伤化胚均能分化出芽,双子叶胚分化率最高(达90%),单子叶胚最低(20%),多子叶胚和连体胚最多可分化出芽3个,双子叶胚2个。幼态微型芽条增殖的最优培养基为MS+6-BA2mg·L-1或MS+6-BA2mg·L-1+KT1mg·L-1,而添加NAA对芽的伸长有抑制作用;适宜幼态微型芽条伸长培养的基本培养基为MS。     

辣椒再生体系不定芽发生因素的优化研究

以辣椒(Capsicum annuum L)品种"哈椒一号"为试材,选用无菌苗子叶、下胚轴和带柄子叶为外植体,采用正交设计探讨不同外植体、激素组合和AgNO_2浓度等因素对不定芽分化的影响,筛选出了三种外植体不定芽诱导的最适培养基。试验结果表明:在不定芽的分化中,6-BA与IAA相配合使叶片不定芽分化频率明显提高,BA/IAA的比例对不定芽分化有明显影响。并且6-BA 6 mg/L+IAA 2 mg/L的组合能够达到最高的诱导率。AgNO_3不但显著提高了不定芽诱导的频率,并且还缩短了不定芽的发生时间。另外,三种外植体的不定芽诱导率,带柄子叶最高,其次是子叶,下胚轴最差。最适不定芽培养基:MS+6-BA 6 mg/L+IAA 2 mg/L+AgNO_2 4 mg/L,pH 5.8,最高不定芽分化率达88.2%。     

红花不定芽的诱导研究

目的:对新疆主栽红花品种新红花4号进行组织培养,研究了外植体、植物激素、光照强度及苗龄等因素对红花不定芽诱导的影响。结果:不同的外植体分化能力及对激素要求差异较大。胚根不定芽诱导率高于子叶,胚轴未见不定芽分化,胚根在MS 6-BA 2.0mg·L-1的培养基中不定芽诱导率最高,子叶在MS 6-BA 1.5mg·L-1 NAA 0.5mg·L-1激素组合中不定芽诱导率较好。7日龄胚根诱导不定芽优于3日龄和10日龄不定芽诱导效果,弱光条件对不定芽的诱导略优于强光。结论:优化了新红花4号不定芽培养条件,为其良种快速繁殖、遗传转化等奠定了基础。     

提高西瓜离体培养植株再生效率的研究

本文以"京欣1号"母本和"伊选"西瓜4天苗龄子叶为外植体,研究离体培养植株高频率再生体系.结果表明"伊选"子叶远轴端外植体的再生频率仅为10%,子叶近轴端外植体在5mg/LBA+0.1mg/L IAA的激素组合下植株再生频率为100%,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,为10.3个;"京欣1号"母本子叶近轴端外植体在2mg/L BA+0.5mg/L IAA激素组合下植株再生频率为100%,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,达6.9个.本试验条件下,子叶近轴端外植体接种4天即分化出不定芽,至再生苗的移栽仅需40天,在MS+0.1mg/L NAA的生根培养基上的生根率为97.3%,移栽成活率达98.5%.     

瓠瓜的离体培养和植株的高效再生

９￣１０ｄ苗龄的瓠瓜无菌苗的带叶基（子叶片与子叶柄之间的部分）子叶在８种分化培养基上培养１５ｄ左右,结果在含３．５ｍｇ／Ｌ ＺＴ的培养基上能以较高的频率直接分化出芽;分化培养前对带叶基子叶及仅含子叶叶基的两种外植体纵向切割都能明显提高出芽率,不含子叶叶基的外植体不能分化出芽,决定出芽的外植体的部位是子叶叶基;纵向切割子叶叶基前预培养９ｄ以上出芽率大幅度提高。     

茶树组织培养的研究

用组织培养技术对杂交种子或优良单株进行繁殖,可大大提高茶树的繁殖系数,一般可缩短育种年限1-2倍。同时,对保存利用茶树野生资源提供了有效的技术手段。1.子叶柄、下胚轴培养 在自然条件下,茶子约有30-40天的后熟期。实验发现,对茶子进行低温贮藏处理,100%的子叶柄和下胚轴外植体,直接诱导出芽,且大部分外植体诱导出胚状体。而未经处理的,外植体处于接种时的状态。具有少量子叶、斜切子叶柄的外植体,直接在子叶柄切口上部形成不定芽,外植体分化率达100%,随着培养的进行,形成大量丛     

菘蓝子叶和下胚轴的离体培养

植物名称:菘蓝(Isatis indigotica)。材料类别:子叶和下胚轴切段。培养条件:诱导分化与生长培养基为MS KT2mg/L(单位下同) NAA0.2;诱导生根培养基为B_5 NAA1 IAA1。培养温度25±2℃,每天光照10h,光照度为20001x。生长与分化情况:外植体培养7d后,切口处开始形成少量白色愈伤组织,10d后子叶切块开始分化出绿色的小芽;15d后下胚轴上也开始分化不定芽。20d后统计芽的诱导率为:子叶69.6％,下胚     

提高西瓜离体培养植株再生效率的研究

本文以“京欣1号”母本和“伊选”西瓜4天苗龄子叶为外植体,研究离体培养植株高频率再生体系。结果表明：“伊选”子叶远轴端外植体的再生频率仅为10％,子叶近轴端外植体在5mg／LBA 0．1mg／L IAA的激素组合下植株再生频率为100％,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,为10.3个;“京欣1号”母本子叶近轴端外植体在2mg／LBA 0．5mg／L IAA激素组合下植株再生频率为100％,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,达6．9个。本试验条件下,子叶近轴端外植体接种4天即分化出不定芽,至再生苗的移栽仅需40天,在MS 0．1mg／L NAA的生根培养基上的生根率为97．3％,移栽成活率达98．5％。     

提高榨菜离体培养植株再生频率

采用榨菜“浙桐1号”品种为材料,以MS为基本培养基,通过对不同植物生长调节剂的组合和不同外植体等主要因素的筛选,大幅度提高了榨菜离体培养植株再生频率。结果表明,2mg／L6．BA 0．2mg／L2,4-D的组合较为适宜,其不定芽再生频率可达50％,且外植体以下胚轴为好：而CPPU和2,4-D的适宜组合为1．5mg／L 0．2mg／L,其不定芽再生频率高达66．67％,最适外植体为带柄子叶。同时,研究结果显示,添加0．25～1mg／L的GA,对榨菜已分化的不定芽的伸长有抑制作用;子叶柄和下胚轴外植体的分化具有极性现象。     

甜瓜子叶离体培养直接再生不定芽的形态学和解剖学观察

对甜瓜品种“西莫洛托”子叶离体培养直接再生不定芽过程进行了形态学和解剖学观察,结果表明：以子叶远轴面接触培养基培养能直接再生不定芽,以子叶近轴面接触培养基培养只能得到无序组织块;不定芽再生过程中,培养4d时,子叶变绿,但还不见有细胞分裂,约6d时,在子叶外植体的形态学下端切口处的近轴面到有局部的表皮细胞和亚表皮细胞分裂活跃,初步形成了拟分生组织,7－9d时,这些拟分生组织形成了肉眼可见的小突起,10－14d时,这些突起变得狭长,发育成幼叶或叶状体,它们在外植体上成族存在,但此时还没有典型的“芽”结构出现,15－20d时,成族突起形成幼叶丛,一些幼叶和叶状体的近轴面的基部出现叶腋分生组织,这些将外植体转入伸长培养基,3－5d后,幼叶充分展开,成丛叶状,多个叶腋分生组织同时发育成芽,再过2－7d,相继有不定芽从丛叶外植体上伸长,将伸长的不定芽切下,可促使外 植体上的其它不定芽伸长。     

乙烯与植物离体培养外植体的器官发生

本综述了乙烯与离体培养外植体器官发生之间的关系,以及乙烯生物合成的调节对外植体不定芽,不定根,花芽分化,原生质体培养及花药培养等过程的影响。     

海岛棉愈伤组织诱导和分化研究

以海岛棉无菌苗的胚根、下胚轴和子叶作外植体,对这３种器官在离体培养中愈伤组织诱导、分化以及影响因素进行了研究。结果表明：下胚轴作外植体效果最好,愈伤组织生长块、质地好,有芽的分化,进而可再生出植株。胚根效果很差,愈伤组织产生很少而且很易褐化死亡。子叶效果不好,愈伤组织少、生长慢无分化。外源激素中２．４－Ｄ与ＫＴ配合使用效果好,愈伤组织可以分化。无菌苗生长状态及培养基中非激素成分对愈伤组织诱导和分化