潜活形式的转化生长因子β的结构与功能

TGFβ是一类多功能的细胞增殖调控因子,具有广泛的临床应用前景,天然情况下分泌及重组表达出来的TGFβ都以无活性的潜活复合物的形式存在,TGFβ潜活复合物的活化是控制TGFβ生物功能的重要方式,文章旨在对天然、重组形式的TGFβ潜活复合物的分子结构及其生理条件下可能的活化机理作一综述.     

Smads蛋白及其介导的TGF-β胞内信号传导

转化生长因子 β (ＴＧＦ β)具有广泛的生物学效应 ,其信号传导通路一直是研究热点 .最近发现 ,Ｓｍａｄｓ蛋白是ＴＧＦ β受体 (ＴβＲ)复合物的下游蛋白 ,可将信号从胞膜直接转至胞核 .Ｓｍａｄｓ蛋白家族分为三类 :受体调节性Ｓｍａｄｓ (ｔｈｅｒｅｃｅｐｔｏｒ ｒｅｇｕｌａｔｅｄＳｍａｄｓ ,Ｒ Ｓｍａｄｓ) ,主要有Ｓｍａｄ1、 2、 3、 5 ,有不同于其他二类Ｓｍａｄｓ的特异性丝氨酸基序 ,可被活化的ＴβＲⅠ识别 ,是ＴβＲ复合物的下游 ;公用Ｓｍａｄｓ (ｔｈｅｃｏｍｍｏｎＳｍａｄｓ,Ｃｏ Ｓｍａｄｓ) ,目前在哺乳动物发现的有Ｓ…     

人转化生长因子β1在大肠杆菌中的分泌表达

为了研究双体形式生长因子的原核基因工程,尝试了人转化生长因子β１（ｈＴＧＦβ１）基因的分泌表达．通过缺失突变,构建了能表达具有天然一级结构的ｈＴＧＦβ１单体蛋白的周质分泌表达质粒．采用双顺反子表达系统,使ＴＧＦβ１在周质中获得了高效可溶性表达．研究了改善转运通路对重组蛋白分泌表达的影响,发现共表达σ３２基因和ｄｓｂＡ基因,可促进周质中ＴＧＦβ１双体分子的形成;而共表达ｓｅｃＥ／Ｙ基因对ＴＧＦβ１的分泌表达则没有明显影响．通过共表达ｋｉｌ基因,使ＴＧＦβ１在胞外培养基中获分泌表达,并在胞外折叠、组装形成具有生物活性的双体分子     

TGF—β的结构,受体及信号转导

转化生长因子β（ＴＧＦ－β）是一种多功能细胞因子。人、鼠等哺乳动物的ＴＧＦ－β已克隆出β１、β２、β３３种亚单位。活性ＴＧＦ－β是分子量的２５ｋＤ的同源二聚体,每个单体由１１２个氨基酸组成。ＴＧＦ－β受体有ＴβＲⅠ￣Ⅴ、Ｅｎｄｏｇｌｉｎ等。其中ＴβＲⅠ、ＴβＲⅡ属丝氨酸／苏氨酸激酶家族,在ＴＧＦ－β信号转导中起主导作用。ＴＧＦ－β与ＴβＲⅡ结合后,再结合ＴβＲⅠ,然后ＴβＲⅡ磷酸化ＴβＲⅠ,后作     

转化生长因子－β对细胞外基质基因表达调节作用的研究进展

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一类具有激素样活性的多肽生长因子,许多正常和转化细胞均可合成并分泌ＴＧＦ－β,ＴＧＦ－β既可刺激细胞的增殖,又可刺激细胞的分化,对细胞进行双向调节。细胞外基质（ＥＣＭ）对细胞的增殖和分化也具有控制作用,ＥＣＭ主要成份的ｍＲＮＡ表达可被ＴＧＦ－β诱导和调节,而且两者具有一定的相关性。提示ＴＧＦ－β可能是通过ＥＣＭ实现其对细胞的双向调节。     

IFN-γ/STAT通路抑制TGF-β/SMAD信号转导

ＴＧＦ－β和ＩＦＮ－γ对各种细胞功能有相反的作用,但是此拮抗作用的基础不清楚。ＴＧＦ－β信号转导是通过受体丝氨酸激酶磷酸化并激活转录因子Ｓｍａｄ２和Ｓｍａｄ３实现的,而ＩＦＮ－γ受体及其结合的蛋白质酪氨酸激酶Ｊａｋ１能介导Ｓｔａｔ１的磷酸化和活化。最...     

转化生长因子β的受体

转化生长因子β的受体冯起宇（北京大学生命科学学院,北京１００８７１）关键词ＴＧＦ－β,受体转化生长因子β（ＴＧＦ－β）是２５ｋ的多肽,它是一种多功能的细胞因子,广泛影响细胞的增殖、分化、胞外基质中产物的生成等一系列生命过程［１］。ＴＧＦ－β对细胞的影...     

转化生长因子-β族信号的转导

ＴＧＦ－β族细胞因子通过各自信号转导产生多种生物学效应,其基本过程是：信号沿ＴＧＦ－β族配体→受体→ＳＭＡＤ蛋白→转录因子→ＤＮＡ表达的次序较导,在ＴＧＦ－β族各因子刺激各自具有蛋白激酶活性的两型膜受体时,各因子先结合Ⅱ型受体,结合配体的Ⅱ型受体再激活Ⅰ型受体。活化的Ⅰ型受体磷酸化通路特异性ＳＭＡＤ,后者与公用性ＳＭＡＤ结合后从胞浆移至核内,核内ＳＭＡＤ通过与转录因子结合和直接与ＤＮＡ结合调节基因     

转化生长因子—β对细胞外基质基因表达调节作用的研究进展

转化生长因子－β是一类具有激素样活性的多肽生长因子,许多正常和转化细胞均可合成并分泌ＴＧＦ－β,ＴＧＦ－β既可刺激细胞的增殖,又可刺激细胞的分化,对细胞进行双向调节。细胞外基质对细胞的增殖和分化也具有控制作用,ＥＣＭ主要成份的ｍＲＮＡ表达可被ＴＧＦ－β诱导和调节,而且两者具有一定的相关性。提示ＴＧＦ－β可能是通过ＥＣＭ实现其对细胞的双向调节。     

HeLa细胞的反式作用因子CTF／NF—1与其顺式作用元件的特异性作用

本文运用凝胶延迟反应和足迹法研究了ＨｅＬａ细胞核蛋白中的反式作用因子ＣＴＦ／ＮＦ－１与其对应的顺式作用元件的特异性作用。研究结果表明ＨｅＬａ细胞的ＣＴＦ／ＮＦ－１包含有不同分子量的组分,它们均能特异性结合于特异位点ＡＴＡＴＴＧＧＣＴＴＣＡＡＧＣＣＡＡＡＡＴＧＧＡ序列,形成至少５种不同分子量形式的因子－元件复合物,这一结果对阐明ＣＴＦ／ＮＦ－１复杂多样的调控机制及其组成种类有重要意义,此外,本文还建     

转化生长因子－β（TGF－β）受体及其信号传递

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）受体及其信号传递虞冠华,葛锡锐,姚（中国科学院上海细胞生物学研究所上海２０００３１）转化生长因子－β（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ－β,ＴＧＦ－β）是具有多种生物学功能的细胞生长因子,其信号通过细胞表...     

人转化生长因子β1cDNA在COS—7细胞中的表达

在测定了ＴＧＦβ１全长序列的基础上,构建了两个ＴＧＦβ１的表达载达ｐＣＭＶβ和ｐＳＶＬβ;分别从转录水平和翻译水平检测了这两个载本在ＣＯＳ－７细胞中的表达。同时利用ＣＯＳ－７短暂表达系统,建立了ＴＧＦβ１的生物测活法;并分别研究了上清收获时间、表达载体、转染方法对ＴＧＦβ１表达的影响。     

人转化生长因子β1 cDNA在COS－7细胞中的表达

在测定了ＴＧＦβ１全长序列的基础上,构建了两个ＴＧＦβ１的表达载体ｐＣＭＶβ和ｐＳＶＬβ;分别从转录水平和翻译水平检测了这两个载体在ＣＯＳ－７细胞中的表达。同时利用ＣＯＳ－７短暂表达系统,建立了ＴＧＦβ１的生物测活法;并分别研究了上清收获时间、表达载体、转染方法对ＴＧＦβ１表达的影响     

转化生长因子与肿瘤

转化生长因子包括α,β两大类型,ＴＧＦ－α是一种皮皮细胞有丝分裂原,ＴＧＦ－β则抑制细胞的生长。大量研究表明,ＴＧＦ－α－β同肿瘤有明显的关系,二者在肿瘤的发生,发展,侵袭和转移过程中,有十分重要的作用,并将可能用于肿瘤的防治。     

TGF-βⅡ型受体在实验性IgA肾病肾小管的表达

用免疫组织化学方法研究了ＴＧＦ－βⅡ型受体在实验性ＩｇＡ肾病及正常小鼠肾内的表达。结果表明ＴＧＦ－βⅡ型受体在实验性ＩｇＡ肾病及正常小鼠肾内均有表达,但最明显的是ＩｇＡ肾病的肾小管。该结果提示ＩｇＡ肾病时,肾小管有可能在ＴＧＦ－β的作用下增加细胞外基质的合成,从而导致肾小管间质的纤维化     

hEGF和hTGF—αN结构域与C结构域的功能差异

用ＰＣＲ的方法将人表皮生长因子和人转化生长因子－α（ｈＴＧＦ－α）的Ｎ结构域和Ｃ结构域互换,构造了两个嵌合分子Ｅ－ＴＧＦ（ＥＧＦ１－３２－ＴＧＦ－α３４－５０）和Ｔ－ＥＧＦ（ＴＧＦ－α１－３３－ＥＧＦ３３－５３）。野生型和嵌合分子基因在大肠杆菌ｐｈｏＡ系统表达并纯化定量。各重组体的受体竞争结合活性大小为ｈＥＧＦ〉ｈＴＧＦ－α和Ｅ－ＴＧＦ〉Ｔ０－ＥＧＦ,它们的促细胞生长活性的大小为ｈＴＧＦ－α和Ｅ－     

转化生长因子β受体的研究进展

转化生长因子β受体有３个亚型：Ⅰ型,Ⅱ型,Ⅲ型,其结构功能特点及在转导ＴＧＦ－β信号过程中的作用机制不同,细胞在受体水平的变化影响ＴＧＦ－β的功能。     

逆转录PCR及原位杂交检测人IgA肾病肾脏中TGF-β mRNA

为研究转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）在ＩｇＡ肾病病理机制中的作用,本文用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法及原位杂交法检测ＩｇＡ肾病患者肾活检组织中的ＴＧＦ－βｍＲＮＡ。结果证实：在人正常肾和ＩｇＡ肾病肾组织中均可检测到ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物;ＴＧＦ－βｍＲＮＡ原位杂交的阳性信号主要分布于肾小管和集合管上皮细胞内,肾小球内的阳性信号较弱,且强度与系膜的增生程度有关。     

肽类生长因子对抗癌基因的诱导作用

观察了肽类生长因子对２ＢＳ细胞中抗癌基因表达的影响,结果表明,ＥＧＦ或ＦＧＦ均可明显诱导２ＢＳ细胞中Ｒｂ基因的表达,其幅度分别为３０５％,２４３％;ＥＧＦ也可诱导２ＢＳ细胞中ＴＧＦβ１基因表达增加３０－５０％,但ＦＧＦ对ＴＧＦβ１的表达无明显影响;ＥＧＦ或ＦＧＦ对Ｐ５３基因的表达均无明显诱导作用。上述结果为生长因子作用机制研究及生长因子与抗癌基因的关系提供了新的线索。     

HeLa细胞的反式作用因子CTF／NF－1与其顺式作用元件的特异性作用

本文运用凝胶延迟反应（ＧｅｌＲｅｔａｒｄａｔｉｏｎＡｓｓａｙ）和足迹法（Ｆｏｏｔｐｒｉｎｔｉｎｇ）研究了ＨｅＬａ细胞核蛋白中的反式作用因子ＣＴＦ／ＮＦ－１与其对应的顺式作用元件的特异性作用。研究结果表明ＨｅＬａ细胞的ＣＴＦ／ＮＦ－１包含有不同分子量的组分,它们均能特异性结合于特异位点ＡＴＡＴＴＧＧＣＴＴＣＡＡＧＣＣＡＡＡＡＴＧＧＡ序列,形成至少５种不同分子量形式的因子－元件复合物。这一结果对阐明ＣＴＦ／ＮＦ－１复杂多样的调控机制及其组成种类有重要意义。此外,本文还建立了一种制备核蛋白提取物的新方法,有效地解决了因反式作用因子含量极低带来的研究上的困难。