蛋白水解酶复合体抑制剂lactacystin对小鼠卵母细胞减数分裂和初次卵裂的作用

为探讨泛素-蛋白水解酶复合体通路(UPP)在小鼠卵母细胞减数分裂和卵裂中的作用, 使用蛋白水解酶复合体特异性抑制剂lactacystin作用于减数分裂不同时期的卵母细胞和受精卵, 结果发现, lactacystin对GVBD的发生无明显影响, 但可明显抑制随后的减数分裂进程, 使极体排放受阻, 引起超排卵母细胞的孤雌激活率下降, 并抑制第一次卵裂. β-tubulin免疫荧光染色显示lactacystin抑制减数分裂微管的组装和纺锤体的形成; 对已进入中期的卵母细胞使用lactacystin, 则对中期纺锤体形态无影响. lactacystin还可使受精卵阻滞于间期或第一次有丝分裂中期. 免疫荧光染色还显示蛋白水解酶复合体催化亚单位PA700在GV期定位在GV及其周围区域, 在中期定位于纺锤体区域. 以上结果表明UPP对小鼠卵母细胞减数分裂和早期卵裂是必需的, 且对减数分裂的作用是多方面的, 在前期与纺锤体的正常形成有关, 而在中期则为染色体的分离和进入后期所必需.     

抗白血病药物三尖杉酯碱对L1210细胞着丝粒蛋白含量及CenpB基因表达的影响

以小鼠白血病细胞系L1210为对象,探讨了抗白血病药物三尖杉酯碱(Harringtonine,HT或Har)对细胞内着丝粒蛋白含量及着丝粒蛋白CenP基因表达的影响。间接免疫荧光(IIF)检测结果显示,随HT作用时间延长,L1210细胞着丝粒荧光斑点减弱;免疫印迹(Western blot)检测结果显示,所用的抗着丝粒抗血清(ACA 血清)能够识别8种不同分子量的着丝粒蛋白：140、80、70、56、37、34、32和17kD。受HT作用,细胞中这些着丝粒蛋白的含量不同程度地降低。在L1210细胞中识别17、80 and l40kD蛋白质的ACA抗体也分别与分子量相当的已知为CenpA、CenpB和CenpC的3种蛋白发生交叉反应。Northern和Dot blot显示,HT的抑制作用使细胞中CenpB mRNA表达水平较之对照细胞下降。结果表明,HT可(通过抑制基因mRNA的表达)降低细胞中某些着丝粒蛋白的含量;HT对细胞的杀伤及诱导凋亡作用可能与CenpB等着丝粒蛋白基因的表达抑制有关。     

The cloning and expression characterization of the centrosome protein genes family (centrin genes) in rat testis

Centrins are members of the centrosome protein family, which is highly conserved during revolution. The homologous genes of centrin in many organisms had been cloned, but the sequences of the rat centrin genes were not reported yet in GenBank. We cloned the cDNA fragments of centrin-1, -2 and -3 from the rat testis by RT-PCR, and analyzed the homology of the deduced amino acid sequences. The expression characterization of centrin genes in rat spermato-genesis was carried out by semi-quantitative RT-PCR. The results show that the homology of the corresponding centrin proteins in human, mouse and rat is high. The expression of centrin-1 is testis-specific, spermatogenic cell-specific and developmental stage-related. Centrin-1 begins to be transcribed when the meiosis occurs, and its mRNA level reaches the peak in round spermatids. Centrin-2 and centrin-3 are highly expressed in spermatogonia and their mRNA level decreases markedly when meiosis occurs. These results suggest that centrin-1 may play roles in     

超排SD大鼠卵母细胞减数分裂中期Ⅰ的阻滞和恢复

超排SD大鼠卵母细胞减数分裂中期Ⅰ的阻滞和恢复@谭信$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室　中国北京100080 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @孙青原$中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @陈大元$中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080…     

泛素-蛋白水解酶复合体通路对SD大鼠卵母细胞排极过程的影响

泛素-蛋白水解酶复合体通路对SD大鼠卵母细胞排极过程的影响@谭信$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875　首都医科大学　中国北京100054 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875 @唐永政$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875     

cAMP和卵丘细胞对大鼠卵母细胞的GVBD,p90rsk和MAPK磷酸化的调节作用

cAMP和卵丘细胞对大鼠卵母细胞的GVBD,p90rsk和MAPK磷酸化的调节作用@谭信$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080北京师范大学生命科学学院　中国北京100875 @孙青原$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　中国北京100875 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　中国北京100875 @陈大元$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　中国北京1008…     

反义细胞周期蛋白E真核表达载体的构建及其对体外人乳腺癌细胞的抑制作用

 为了探讨细胞周期蛋白 E(cyclin E)与人乳腺癌细胞恶性特征间的相关性 ,利用反义 RNA抑制基因表达的技术 ,构建了细胞周期蛋白 E反义 RNA的真核表达载体并转入人乳腺癌细胞中 .通过 G41 8筛选出阳性克隆 ,经 PCR和 Western印迹检测 ,确定细胞中含有重组质粒 ,并且细胞周期蛋白 E蛋白的水平明显降低 ,由此获得了反义 RNA表达载体导致的细胞周期蛋白 E表达受抑制的细胞 .细胞模型建立后 ,观察分析了细胞形态 ,细胞生长的血清依赖性以及软琼脂成集落能力 ,与对照细胞相比所发生的变化 .结果显示 ,细胞周期蛋白 E受抑制后 ,乳腺癌细胞体积变大 ,细胞生长对血清依赖性增加 ,低血清培养到第 6d时 ,细胞密度约为对照细胞的五分之一 ,细胞成集落能力也显著下降 ,软琼脂中克隆形成率下降 57% .这些变化都表明乳腺癌细胞恶性程度由于细胞周期蛋白 E表达受抑制而减弱 ,可以推测 cyclin E与乳腺癌细胞的恶性增殖及非锚定依赖性生长有着明显的关系 .     

抑制PKCα对乳腺癌细胞特性及cyclinE和CDK2基因表达的影响

Human breast cancer cell line Bcap-37 was stably transfected with the plasmid expressing antisense PKC alpha RNA, and cells, in which PKC alpha was inhibited due to antisense PKC alpha RNA, were isolated. Changes in serum-dependent growth in cell culture, cell clonogenicity in soft agar and growth in nude mice were tested, and the expressions of cyclin E and CDK2 were analyzed. After PKC alpha was inhibited, the cells showed that serum-dependent growth and anchorage-dependent growth enhanced, tumorigenicity in nude mice decreased. The results suggest that less aggressive breast cancer phenotypes may be induced by inhibition of PKC alpha. Levels of cyclin E and CDK2 mRNA in cells with antisense PKC alpha RNA were lower than those in control cell. These indicate that signal transduction system with PKC alpha is closely related to cell cycle control system with cyclin/CDK in the functions.     

《分子细胞生物学》(附数字课程)

书号:978-7-04-032271-2出版时间:2012年12月定价:66.00元字数:92万目录第一章细胞生物学研究方法第二章质膜成分、结构与功能第三章物质的跨膜运输第四章真核细胞内膜系统第五章线粒体的结构与功能第六章叶绿体与光合作用第七章细胞骨架第八章细胞核及染色体第九章细胞信号转导第十章细胞增殖及其调控