硝普钠灌注对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响

目的:探讨外源性一氧化氮(nitric oxide,NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响。方法:64只220～300g雄性SD大鼠随机分成3组:A1组(n=8),仅行剖腹关腹手术;A2组(n=12):12对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,无SNP干预;A3组(n=16):16对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,SNP加入灌注液进行供肠灌注。采用前述3组动物模型再灌注5小时肠造口标本,TUNEL法检测小肠蜡块标本的细胞凋亡情况。结果:与A1组(3.86±4.74%)相比,A2(22.44±10.94%)、A3组(17.12±8.44%)小肠粘膜的细胞凋亡指数均有显著增高(P<0.05),A3组较A2组细胞凋亡指数显著降低(P<0.05)。结论:小肠移植导致小肠粘膜细胞凋亡增加,外源性NO供体SNP灌注能够显著降低植入小肠的细胞凋亡,从而可能减弱粘膜屏障的损伤。     

转化生长因子β1质粒对新鲜同种异体骨移植的免疫影响

目的：研究局部含注射转化生长因子β1（TGF-β1）基因的质粒时大鼠同种异体骨移植的免疫排斥反应的影响。方法：将64只Wister大鼠完全随机分成4组,每组16只,切取SD大鼠的胫骨移植到Wister大鼠人工建模后形成的胫骨缺损区。TGF-β1组于移植骨局部一次性注射含有TGF-β1基因的质粒（40μg／只）;空质粒组于移植局部注射空质粒;免疫抑制剂组术前3天开始腹腔内注射环孢素A（10mg／kg）直至处死;异体移植组仅行异体骨移植,不予特殊处理。术后3、6、12周行光镜和电镜检查。结果：异体移植组和空质粒组骨基质排列紊乱,骨细胞消失,基质区内见块状低电子密度区。TGF-β1组和免疫抑制剂组可见骨细胞和完整的成骨细胞,骨小管状态良好。混合淋巴细胞培养（MLC）结果显示TGF-β1组（0-331±0．017）与免疫抑制剂组（0．501±0．004）差异无统计学意义（P〉0．05）,TGF-β1组与空质粒组（1．104±0．023）和异体移植组（1．206±0．019）差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：新鲜骨移植过程中局部注射TGF-β1质粒可发挥免疫抑制作用,降低宿主的免疫排斥反应：     

缺血后适应对局灶性脑缺血/再灌注大鼠caspase-3表达的影响

目的：探讨缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后caspase-3表达的影响。方法：大脑中动脉线拴法复制大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤动物模型。将30只雄性SD大鼠随机分为3组（n=10）：假手术组（sham组）、缺血/再灌注（I/R）组和缺血后适应（IP）组。利用原位缺口末端标记法观察神经细胞凋亡的变化。应用Western blot检测大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后caspase-3蛋白表达水平的变化。结果：大鼠脑缺血/再灌注后凋亡细胞数量和caspase-3蛋白表达水平均显著升高,而缺血后适应组凋亡细胞数量和caspase-3蛋白表达水平均显著低于缺血/再灌注组（P〈0.01）。结论：缺血后适应可抑制大鼠脑缺血/再灌注后细胞凋亡的发生,此作用可能与下调caspase-3蛋白表达有关。     

氧化氮对抗脑缺血再灌注所致脑细胞凋亡的机制探讨

目的探讨一氧化氮（nitric oxide,NO）对局灶性脑缺血再灌注所致神经细胞损伤的影响及影响机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组（N组）、脑缺血再灌注组（MCAO组）、脑缺血再灌注加侧脑室微量注射20mmol／L的L-Arg5肚组（L-Arg组）及脑缺血再灌注加侧脑室微量注射20mmol／L的L-NAME5 μl组（L-NAME组）,作脑缺血30min,再灌注12h、24h和2d,冰冻切片,相邻切片分别作焦油紫染色、NOS免疫组化、NOSmRNA原位杂交、TUNEL法原位检测凋亡细胞。结果N组NOS的活性弱阳性表达;MCAO组术后24hNOS的表达明显增强,与各组比较,P〈0．05;L-Arg组术后12h小血管内皮细胞出现NOS的阳性高表达,术后24h神经细胞NOS的阳性表达最高,与各组比较,P〈0．05;L-NAME组各时间点NOS活性的表达为阴性或可疑阳性,与各组比较P〈0．05,NOS的活性明显受到抑制。凋亡细胞的计数结果为N组26．3±4、2个,MCAO组62±4．2个,L-Arg组40、6±2．7个,L-NAME组78．3±3．3个,P〈0．05。结论适量NO可有效降低细胞凋亡的发生,减轻脑缺血再灌注所致的神经细胞的损伤。     

缺血预适应对大鼠肢体缺血/再灌注后小肠细胞凋亡的影响

目的：观察大鼠肢体缺血再灌注后小肠粘膜自由基及钙含量改变与细胞凋亡情况．以及缺血预适应对其变化的影响。方法：将雄性Wistar大鼠18只,随机分为对照（Control）组,缺血／再灌注（I／R）组和缺血预适应（IPC＋I／R）组,分别测定血浆和小肠组织超氧化物歧化酶（SOD）、黄嘌呤氧化酶（XOD）、丙二醛（MDA）的含量,小肠组织钙及线粒体钙含量;小肠组织的Bel-2和Bax蛋白的表达水平;检测小肠细胞凋亡情况。结果：肢体I／R后血浆和小肠粘膜SOD减少而XOD和MDA增加;小肠组织钙及线粒体钙含量增多;Bel-2蛋白表迭和Bax表达增多,但Bel-2／Bax比值降低;凋亡细胞增多。IPC减轻了I／R后引起的XOD、MDA含量的升高,并且增加了SOD的含量;减轻了组织和线粒体钙超载;Bel-2的表达则明显升高而Bax表达较I／R组明显减少,Bel-2／Bax比值升高;凋亡细胞减少。结论：肢体IR引起小肠粘膜自由基的增多,钙超栽,凋亡细胞增多;IPC可能通过减少自由基的产生及钙超载,抑制细胞凋亡而对肢体I／R继发的小肠功能损伤起保护作用。     

缺血后适应对局灶性脑缺血/再灌注大鼠p38表达的影响

目的：探讨缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后p38表达的影响。方法：将30只雄性SD大鼠随机分为3组（n=10）：假手术组（sham组）、缺血/再灌注（I/R）组和缺血后适应（IP）组。利用TUNEL法观察神经细胞凋亡的变化,应用Westernblot检测大鼠局灶性脑I/R损伤后p38蛋白表达水平的变化。结果：大鼠脑缺血/再灌注后凋亡细胞数量和p38蛋白表达水平均显著升高,而IP组凋亡细胞数量和p38蛋白表达水平均显著低于IR组（P〈0.01）。结论：缺血后适应可抑制大鼠脑缺血/再灌注后细胞凋亡的发生,此作用可能与下调p38蛋白表达有关。     

人参皂甙Rb1对香烟烟雾诱导的大鼠神经细胞凋亡和细胞内Ca抖浓度的影响

目的：探讨人参皂甙Rb1（GRb1）对香烟烟雾诱导的大鼠神经细胞凋亡和细胞内Ca^2±浓度的影响。方法：雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、吸烟组和GRb1组,每组16只。吸烟组和GRbI组连续吸烟12周制作吸烟大鼠模型,期间每周给予GRb1组和吸烟组大鼠分别腹腔注射40mg／kg的GRb1和等量生理盐水,对照组不做任何处理。提取大鼠大脑皮层组织,TUNEL法检测各组细胞凋亡情况,荧光分光光度法检测细胞内Ca^2±浓度变化情况。结果：TUNEL法检测表明,未经香烟烟雾处理的对照组大鼠大脑皮层细胞自然凋亡率为2．54±0．92个／视窗。连续吸烟12周,吸烟组大鼠大脑皮层细胞凋亡率较对照组显著升高,达20．62±2．13个／视窗（q=35．72,P〈0．01）。GRb1组细胞凋亡率虽也有增加,为11．48±2．37个／视窗,明显低于吸烟组（q=15．39,P〈0．01）。对照组、吸烟组和GRb1组大鼠大脑皮层细胞内Ca^2±浓度分别为236．62±12．52ng／L、636．37±18．63ng／L和353．61±13．72ng／L．GRb1组Ca^2＋浓度显著低于吸烟组（q=54．73,P〈0．01）。结论：GRb1对吸烟大鼠脑损伤的保护作用可能与抑制细胞内的Ca^2＋超载、降低香烟烟雾诱导的神经细胞凋亡有关。     

骨髓间充质干细胞移植对异丙肾上腺素致心力衰竭大鼠心功能及炎性细胞因子表达的影响

目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对异丙基肾上腺素（ISO）致心力衰竭大鼠心脏功能和炎性细胞因子（TNF—α、IL-1β和IL-6）表达的影响。方法：采用全骨髓培养方法分离培养大鼠的MSCs;雄性Wistar大鼠45只,随机分为：正常对照组（n=15）、模型组（n=30）。正常对照组给予生理盐水皮下注射、模型组采用170mg／kg的剂量皮下注射ISO,连续4天给药;各组动物末次皮下注射4周后,行超声心动图检查,将模型组LVEF〈70％的大鼠（n=20）随机分为细胞移植组（n=10）和培养液组（n=10）,后大鼠开胸,细胞移植组将150μL（3×10^6MSCs）用微注射器分4点注射到左心室前壁,培养液组和正常对照组给与心肌内注射等量细胞培养液。移植后4周用超声心动图检测大鼠的心功能,并取心脏组织行免疫组化染色。结果：移植后4周,与正常对照组比较,细胞移植组和培养液组LVDs明显增加,EF和FS明显下降（P〈0．01）;而和培养液组相比,细胞移植组LVDs明显下降、EF和FS明显升高（P〈0．05）;免疫组化染色结果显示,与培养液组比较,细胞移植组TNF—α、IL-1β和IL-6阳性表达细胞明显降低（P〈0．05,P〈0．01,P〈0．01）。结论：MSCs移植可以改善心衰大鼠的心脏功能,同时下调心衰大鼠心脏炎性细胞因子TNF—α、IL-1β和IL-6的表达。     

骨髓间充质干细胞移植对异丙肾上腺素致心力衰竭大鼠心功能及炎性细 胞因子表达的影响*

摘要目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对异丙基肾上腺素（ISO）致心力衰竭大鼠心脏功能和炎性细胞因子（TNF-琢、 IL-1茁和IL-6）表达的影响。方法：采用全骨髓培养方法分离培养大鼠的MSCs;雄性Wistar 大鼠45 只,随机分为：正常对照组 （n=15）、模型组（n=30）。正常对照组给予生理盐水皮下注射、模型组采用170 mg/kg的剂量皮下注射ISO,连续4 天给药;各组动 物末次皮下注射4 周后,行超声心动图检查,将模型组LVEF<70 %的大鼠（n=20）随机分为细胞移植组（n=10）和培养液组（n=10）, 后大鼠开胸,细胞移植组将150 滋L（3× 106MSCs）用微注射器分4 点注射到左心室前壁,培养液组和正常对照组给与心肌内注射 等量细胞培养液。移植后4 周用超声心动图检测大鼠的心功能,并取心脏组织行免疫组化染色。结果：移植后4 周,与正常对照组 比较,细胞移植组和培养液组LVDs明显增加,EF 和FS明显下降（P<0.01）;而和培养液组相比,细胞移植组LVDs 明显下降、EF 和FS 明显升高（P<0.05）;免疫组化染色结果显示,与培养液组比较,细胞移植组TNF-琢、IL-1茁和IL-6 阳性表达细胞明显降低 （P<0.05,P<0.01,P<0.01）。结论：MSCs 移植可以改善心衰大鼠的心脏功能,同时下调心衰大鼠心脏炎性细胞因子TNF-琢、IL-1茁和 IL-6的表达。     

缺血后处理对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的影响

目的：探讨缺血后处理对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响。方法：健康雄性sD大鼠24只,随机分为对照组（C组）、缺血／再灌注组（I／n组）和缺血后处理组（IPostC组）（n=8）。对比观察各组血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）活力及含量变化,原位缺口末端标记法（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡情况,免疫组化及RT-PCR法检测肺组织中Bax、Bcl一2蛋白和基因的表达。结果：I／R组与c组相比,MDA含量、MPO活力明显升高,SOD活力明显下降（均P〈0．01）,肺组织原位细胞凋亡检测示I／R组凋亡指数（AI）（39．03±3．46）显著高于C组（2．88±0．34）,Bcl-2／Bax比值在蛋白和基因水平明显降低（均P〈0．01）;IPostC组与I／R组相比MDA含量显著降低（P〈0．05）,MPO活力显著降低（P〈0．01）,SOD活性升高（P〈0．01）,AI为8．03±0．88显著低于L／R组,并能明显升高Bcl-2／Bax比值（均P〈0．01）。结论：缺血后处理通过减轻脂质过氧化反应及中性粒细胞聚集,降低Bax／Bel．2比值,使肺组织细胞凋亡减少,从而有效地减轻肺缺血／再灌注损伤。     

Neuritin在大鼠脑外伤合并骨折过程中的作用研究

目的：研究脑外伤合并股骨骨折的骨痂中Neuritin的表达及血清中变化,探讨中枢神经系统损伤加速对骨折愈合的作用,为临床难治性骨创伤提供新的理论依据。方法：取96只雄性SD大鼠随机分成：A组正常组8只、B组单纯骨折组40只、C组单纯脑外伤组8只及D组骨折合并脑外伤组40只,做股骨骨折和采用脑损伤液压装置建脑损伤模型,术后3、7、14、21、28天取血离心,ELISA法测血清中的Neuritin值。分时间处死B组和D组,取骨痂做切片,行免疫组织化学染色,观测各时间点骨痂中Neuritin的变化和骨折愈合情况。结果：①免疫组织化学染色：骨折愈合过程中血管内皮细胞、软骨细胞及成骨细胞的胞浆中有阳性表达,并显色强。D组1w至3w时的Neuritin阳性细胞百分数均高于B组有显著性统计意义（P〈0．05）,但4周时（P〉0．05）。②血清浓度值：A组值（81．37±1．37）,B组、C组、D组3天（94．94±3．77107．28±3．46118．35±1．43）逐渐升高,2周达到高峰（110．18±1．48131．89±3．26161．48±1．46）,然后下降,3d至3w时各组有显著性统计意义（P〈0．05）,4周下降为略高于正常（P〉0．05）。结论：血清和骨痂中Neuritin的表达显著升高,提示Neuritin可能是大鼠股骨骨折合并脑损伤时促进骨折修复的重要因素一。     

大鼠原位肝移植急性排斥反应模型的建立

目的建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。方法采用改进的Limmer和Kamada的二袖套法建立大鼠肝移植模型。将大鼠分为2组：①实验组：急性排斥反应组（Wistar→SD）;②对照组：免疫耐受组（SD→SD）。结果免疫排斥组肝存活时间（7.4±1.7）d低于对照组（18.9±7.6）d,差异有统计学意义0.05（P〈0.05）。结论Wistar→SD大鼠之间的原位肝移植模型可产生中、重度的免疫排斥反应,是一种较理想的可作为研究急性排斥反应的动物模型。     

补骨脂抑制人工关节假体周围骨溶解的研究

目的：探讨中药补骨脂对人工关节置换术后假体周围骨溶解,假体无菌性松动的核因子KB受体活化因子配体-核因子KB受体活化因子受体-骨保护素（RANKL-RANK-OPG）信号通路的作用。方法：取24只200＋5g雌性SD大鼠。随机分为A、B、C组,均注射钛颗粒溶液建立骨溶解模型,术后A组采用中药补骨脂水溶液腹腔注射,B组采用外源性OPG腹腔注射作为阳性对照,C组采用生理盐水腹腔注射作为阴性对照。给药4周后,通过免疫组化及反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组动物体内RANKL／RANK的表达水平变化。结果：用药4周后,3组12只大鼠背部气囊均为厚壁囊腔,骨溶解模型成功建立,免疫组化及RT-PCR检测RANKIJRANK均呈阳性表达。免疫组化RANKL平均光密度（AOD）值A组（0．168±0．017）、B组（0．147±0．009）明显低于C组（0．314±0．011）,差异有统计学意义（P〈0．05）;A组、B组之间比较无明显差异。RANKAOD值测定A组（0．172±0．015）、B组（0．193±0．045）明显低于C组（0．342±0．007）,差异有统计学意义（P〈0．05）;A组、B组之间比较无明显差异。RT-PCR检测RANKL相对量A组（0．575±0．143）、B组（0．543±0．174）明显低于C组（0．951±0．362）,差异有统计学意义（P〈0．05）;A组、B组之间比较无明显差异。RANK相对量A组（0．433±0．025）、B组（0．611±0．209）明显低于C组（0．871±0．211）,差异有统计学意义（P〈0．05）;A组、B组之间比较无明显差异。结论：中药补骨脂对人工关节置换术后假体周围骨溶解,假体无菌性松动具有抑制作用。     

瑞舒伐他汀和阿托伐他汀在急性冠脉综合症中对氯吡格雷抗血小板活性的对比研究

目的：在急性冠脉综合征（acute coronary syndromes,ACS）的治疗中,抗血小板治疗及调脂治疗是最基础的治疗方案。近来有学者提出,氯吡格雷和他汀类药物都经过细胞色素CYP3A4途径代谢,二者因存在竞争性抑制,有可能降低氯吡格雷抗血小板的活性。本试验将针对阿托伐他汀及瑞舒伐他汀进行研究。方法：选择急性冠脉综合症的患者42例,所有患者均接受氯吡格雷治疗（负荷剂量300mg,维持剂量75mg／d）。随机分配为A、B两组,A组（n=20）服用阿托伐他汀治疗（20mg／d）,B组（n=22服用瑞舒伐他汀治疗（10mg／d）。分别于氯吡格雷服用前、服药治疗后3天、服药治疗后7天后采静脉血送检,测定ADP（10μmol／L）诱导的血小板聚集率。结果：阿托伐他汀组（A组）及瑞舒伐他汀组（B组）相比,服用氯吡格雷前ADP诱导的血小板聚集率基线值无统计学差异。服用氯吡格雷3日及7日后,ADP诱导的血小板聚集率明显降低,（3．85±2．58）vs（3．09±2．27）,（0．65±0．88）vs（1．05±0．95）,P〉0．05,无明显统计学差异。结论：氯吡格雷的确可以降低血小板的活性。同时,短期之内氯吡格雷的抗血小板活性未受到他汀类的影响。包括经过CPY3A4途径的他汀,如阿托伐他汀。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠低氧性肺动脉高压的影响

目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对大鼠低氧性肺动脉高压（HPH）的影响。方法：体外分离、培养、鉴定SD大鼠骨髓MSCs、绿色荧光蛋白腺病毒标记MSCs细胞。将健康雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（NC组）8只、低氧性肺动脉高压组（HPH组）8只,低氧性肺动脉高压同时骨髓间充质干细胞移植组（MSCs组）24只,低氧性肺动脉高压同时携带血管内皮生长因子（VEGF）的MSCs移植组（VEGF＋MSCs组）24只。采用常压间歇低氧法建立大鼠肺动脉高压模型,干细胞转染并行干细胞移植。观察大鼠平均肺动脉压力（mPAP）,计算右心室肥厚指数（RVHI）,显微镜下观察各组大鼠肺小动脉形态结构改变,并在荧光显微镜下观察干细胞移植7d,14d,28d时腺病毒转染荧光标记的MSCs在肺小动脉分布及表现。结果：NC组28d时mPAP（mmHg）为15．5±1．5,而HPH组、MSCs组及MSCs＋VEGF组分另q为26．1±1．9、21．6±2．7及20．1±2．9,均明显高于NC组（P〈0．01）,但MSCs组及MSCs＋VEGF组较HPH组明显下降（P〈0．01）,MSCs组与MSCs＋VEGF组无明显差别。NC组28d时RVHI为0．28±0．02,而HPH组、MSCs组及MSCs＋VEGF组RVHI分别为0．43±0．07、0．34±0．03及0．35±0．01,均明显高于NC组（P〈0．01）,但MSCs组及MSCs＋VEGF组较HPH组明显下降（P〈0．05）,MSCs组与MSCs＋VEGF组无明显差别。HPH组28d时,肺小动脉管壁明显增厚,管腔明显狭窄、闭塞,内皮细胞不完整,而MSCs组血管壁较HPH组变薄,管腔通畅,内皮细胞完整性改善,MSC8组及MSCs＋VEGF组的表现改变不明显。结论：骨髓间充质干细胞移植可改善肺小动脉血管重塑,从而部分逆转HPH的进程;而将VEGF与MSCs联合移植并未提高单纯MSCs移植的作用。     

双歧杆菌对新生大鼠坏死性小肠结肠炎肠损伤及肠细胞凋亡影响

目的探讨添加双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)模型肠损伤的保护作用。方法 32只新生SD大鼠按析因设计随机分成4组,每组动物8只。A1B1组为NEC模型组并添加双歧杆菌(109CFU/d),A1B2组为NEC模型组,但未添加双歧杆菌;A2B1组为对照组并添加双歧杆菌(109CFU/d),A2B2组为对照组,且未添加双歧杆菌。在出生48 h开始给予鼠配方奶人工喂养,100%氮气缺氧90 s,4℃冷刺激10 min,每天2次,连续3 d,建立新生大鼠NEC模型;在最后1次缺氧、冷刺激后24 h空腹断头处死小鼠,解剖留取十二指肠下端至直肠上端肠道组织,其中,回盲部近端肠管进行病理学检查及肠损伤评分,组织学评分≥2为NEC,其余肠管进行肠细胞凋亡率检测及电镜观察。采用流式细胞仪检测肠细胞凋亡率。SPSS 11.0统计学软件进行统计分析,α=0.05为显著性检验标准。结果造模后,A1B1组、A1B2组相继出现腹泻、腹胀、生长发育减慢和活动度减少,显微镜下可见肠黏膜坏死、黏膜下层出血以及肌肉层坏死等肠损伤表现,透射电镜显示肠黏膜出现大量凋亡细胞,形成凋亡小体,但A1B1组程度较轻。A1B1、A1B2、A2B1和A2B24组肠损伤组织病理评分(x±s)分别为2.04±0.52、3.38±0.55、0.33±0.36和0.38±0.33,肠细胞凋亡率分别为(23.97±10.48)%、(47.28±21.98)%、(11.42±4.75)%和(12.16±4.95)%;各组间肠损伤组织评分、肠细胞凋亡率差异有显著统计学意义(H分别为26.657、20.916,P均0.01);与A1B2组相比,A1B1组新生鼠肠损伤组织评分、肠细胞凋亡率均明显降低,但仍高于A2B1、A2B22个对照组(P均0.01);肠组织损伤评分值、肠细胞凋亡率均受到NEC造模和添加双歧杆菌两个因素的影响,NEC造模与补充双歧杆菌之间均存在交互作用。结论添加双歧杆菌可以降低新生鼠NEC肠损伤程度,可能通过抑制肠上皮细胞凋亡,从而降低新生大鼠发生NEC危险性。     

高压氧对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的:观察高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法:56只SD大鼠被随机分为三组,假手术组(n=8);I/R组(n=24),夹闭双肾动脉45分钟后恢复血流灌注;I/R+HBO组(n=24),夹闭双肾动脉45分钟并在恢复血流后1h、24 h、48 h行HBO治疗,每次HBO后采血并取双肾,比色法测定血浆尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)值,原位末端标记(TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡情况,实时定量PCR法检测促凋亡基因Bax的mRNA含量.结果:与sham组(BUN值为9.563± 1.384 mmol/L;Cr值为45.912±2.685 mmo1/L,TUNEL值为2.088％)比较,I/R组大鼠再灌注1小时尿素氮(12.5±1.487 mmol/L)和血肌酐水平(51.388±3.092 mmol/L)升高,但差异无统计学意义,而TUNEL阳性细胞数(9.775％)和Bax的mR-NA(3.219± 0.427)表达水平均显著升高(P＜0.05),再灌注24小时及48小时后尿素氮(28.087± 2.012 mmol/L、41.225± 1.397mmol/L)和血肌酐(241.75± 11.853 mmol/L、278.75± 12.578 mmol/L)水平、TUNEL阳性细胞数(12.512％、14.413％)和Bax的mRNA(5.541±0.227、6.407± 0.291)表达水平均显著升高(P＜0.05);而HBO治疗可显著降低再灌注24小时及48小时的大鼠尿素氮(14.15±1.397 mmol/L、25.962± 2.497 mmol/L)和血肌酐(146.375± 8.782 mmolL、210.125± 11.519 mmol/L)水平(P＜0.05),但仍显著高于假手术组(P＜0.05).结论:HBO治疗可以改善I/R后肾功能,其作用机制可能与在早期明显降低Bax的mRNA表达,减轻肾小管上皮细胞凋亡有关.     

高浓度藏红花溶液导致大鼠肝损伤中caspase-3、bcl-2、NF-kB表达及意义

目的：通过研究高浓度藏红花溶液引起肝损伤大鼠肝功能、肝组织病理及肝组织中半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）,bcl-2,NF-kB表达,探讨半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）,bcl-2,NF-kB在高浓度藏红花溶液导致的肝损伤中的作用及机制。方法：清洁级雄性大鼠45只,随机分为3组,每组15只,分别标记为A组（藏红花组）;B组（酒精组,阳性对照）;C组（生理盐水组,阴性对照）。分别给予藏红花高浓度水煎浓缩溶液、60%酒精、生理盐水灌胃共6周。第6周末,心腔取血测定ALT、AST。肝组织HE染色,免疫组化方法检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3及调控基因Bcl-2、NF-kB的表达。结果：藏红花组大鼠肝功能ALT、AST升高,肝组织正常结构消失,肝细胞肿胀坏死,部分碎裂,凋亡蛋白caspase-3,bcl-2,NF-kB表达增加（69.6%±16.7%vs 5.3%±1.6%;55.4%±14.5%vs4.5%±2.8%;44.1%±12.6%vs2.5%±1.9%;P〈0.05）。结论：高浓度藏红花溶液可以引起大鼠肝损伤,肝组织caspase-3,bcl-2,NF-kB表达增加,细胞凋亡机制参与了藏红花肝损伤过程。     

传输靶向COX-2 siRNA联合化疗药物对大鼠胃癌细胞生长的抑制作用

目的：通过动物实验探讨传输靶向COX-2siRNA联合化疗药物对大鼠胃癌细胞生长的抑制作用。方法：24只健康SD大鼠平分为三组,治疗组用COX-2-siRNA转染的胃癌SGC7901细胞接种,同时进行环磷酰胺、丝裂霉素C化疗治疗;阴性对照组,用阴性对照siRNA转染的胃癌SGC7901细胞接种,同时进行环磷酰胺、丝裂霉素C化疗治疗;对照组（n=8）,用未经转染的胃癌SGC7901细胞接种,不进行化疗治疗;三组转染后都接种了裸鼠。结果：治疗组、阴性对照组及对照组胃癌细胞凋亡率分别为（22．28±0．12）％、（1．23±0．17）％和（1．03±0．14）％,治疗组与阴性对照组和对照组比较差异都有统计学意义（t=18．152,17．555,P〈0．05）。治疗组的抑瘤率为76．7％,阴性对照组和对照组分别为12．8％和6．89％,治疗组的抑瘤率明显高于其他两组（x^2=15．211,13．899,P〈0．05）。Western blotting检测结果显示治疗组的COX-2蛋白表达含量得到了明显抑制。结论：传输靶向COX-2 siRNA和化疗药物的配合应用可有效抑制COX-2蛋白的表达,从而抑制胃癌细胞的生长,从而起到更好的治疗效果。