抗人β-BCG单克隆抗体的制备及化学发光检测方法的建立

目的：制备人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）单克隆抗体,建立人β-HCG双抗体夹心CLIA检测方法。方法：用人β-HCG抗原免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株,然后将细胞株扩大培养并纯化上清液获得抗体,测定抗体亲和力、特异性及表位,最后建立双抗体夹心CLIA方法。结果：获得4株抗人β-HCG的杂交瘤细胞株（β-1—1、β-2—1、β-3—1、β-4—1）。用β-1—1和β-2—1建立的双抗体夹心法的检测范围为0．5mlU／mL．800mlU／mL,灵敏度0．23mIU／mL,检测结果的相对偏差均在±10％内,回收率在90％以上。结论：本研究最终成功制备了抗人β-HCGmAb,建立了定量检测人β-HCG的双抗体夹心CLIA方法,为β-HCG检测及疾病的诊断奠定基础。     

不同周龄Balb／c小鼠脏器质量及其变化趋势分析

目的：测定不同周龄Balb／c小鼠主要脏器质量、脏器系数,并进行比较。方法：取120只3周龄、5周龄、7周龄的Balb／c小鼠,雌雄各半,精确测量小鼠体重和主要脏器质量,计算脏器系数。结果：①雌性与雄性Balb／c小鼠脏器质量相比较：3周龄时肝、脾有显著差异（P〈0．05）;5周龄时肝有非常显著差异（P〈0．01）,脾、肺有显著差异（P〈0．05）;7周龄时肝、肺及双肾有非常显著差异（P〈0．01）,心、脾有显著差异（P〈0．05）。②雌性与雄性Balb／c小鼠脏器系数相比较：3周龄时肝、脾有显著差异（P〈0．05）;5周龄时肝、脾有非常显著差异（P〈0．01）,膀胱有显著差异（P〈0．05）;7周龄时肺、双肾有非常显著差异（P〈0．01）,脾、膀胱有显著差异（P〈0．05）。结论：随着周龄的增长,Balb／c雌、雄性小鼠之间,存在差异的脏器也在增多。     

骨髓间充质干细胞移植对异丙肾上腺素致心力衰竭大鼠心功能及炎性细胞因子表达的影响

目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对异丙基肾上腺素（ISO）致心力衰竭大鼠心脏功能和炎性细胞因子（TNF—α、IL-1β和IL-6）表达的影响。方法：采用全骨髓培养方法分离培养大鼠的MSCs;雄性Wistar大鼠45只,随机分为：正常对照组（n=15）、模型组（n=30）。正常对照组给予生理盐水皮下注射、模型组采用170mg／kg的剂量皮下注射ISO,连续4天给药;各组动物末次皮下注射4周后,行超声心动图检查,将模型组LVEF〈70％的大鼠（n=20）随机分为细胞移植组（n=10）和培养液组（n=10）,后大鼠开胸,细胞移植组将150μL（3×10^6MSCs）用微注射器分4点注射到左心室前壁,培养液组和正常对照组给与心肌内注射等量细胞培养液。移植后4周用超声心动图检测大鼠的心功能,并取心脏组织行免疫组化染色。结果：移植后4周,与正常对照组比较,细胞移植组和培养液组LVDs明显增加,EF和FS明显下降（P〈0．01）;而和培养液组相比,细胞移植组LVDs明显下降、EF和FS明显升高（P〈0．05）;免疫组化染色结果显示,与培养液组比较,细胞移植组TNF—α、IL-1β和IL-6阳性表达细胞明显降低（P〈0．05,P〈0．01,P〈0．01）。结论：MSCs移植可以改善心衰大鼠的心脏功能,同时下调心衰大鼠心脏炎性细胞因子TNF—α、IL-1β和IL-6的表达。     

骨髓间充质干细胞移植对异丙肾上腺素致心力衰竭大鼠心功能及炎性细 胞因子表达的影响*

摘要目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对异丙基肾上腺素（ISO）致心力衰竭大鼠心脏功能和炎性细胞因子（TNF-琢、 IL-1茁和IL-6）表达的影响。方法：采用全骨髓培养方法分离培养大鼠的MSCs;雄性Wistar 大鼠45 只,随机分为：正常对照组 （n=15）、模型组（n=30）。正常对照组给予生理盐水皮下注射、模型组采用170 mg/kg的剂量皮下注射ISO,连续4 天给药;各组动 物末次皮下注射4 周后,行超声心动图检查,将模型组LVEF<70 %的大鼠（n=20）随机分为细胞移植组（n=10）和培养液组（n=10）, 后大鼠开胸,细胞移植组将150 滋L（3× 106MSCs）用微注射器分4 点注射到左心室前壁,培养液组和正常对照组给与心肌内注射 等量细胞培养液。移植后4 周用超声心动图检测大鼠的心功能,并取心脏组织行免疫组化染色。结果：移植后4 周,与正常对照组 比较,细胞移植组和培养液组LVDs明显增加,EF 和FS明显下降（P<0.01）;而和培养液组相比,细胞移植组LVDs 明显下降、EF 和FS 明显升高（P<0.05）;免疫组化染色结果显示,与培养液组比较,细胞移植组TNF-琢、IL-1茁和IL-6 阳性表达细胞明显降低 （P<0.05,P<0.01,P<0.01）。结论：MSCs 移植可以改善心衰大鼠的心脏功能,同时下调心衰大鼠心脏炎性细胞因子TNF-琢、IL-1茁和 IL-6的表达。     

抗人beta-HCG单克隆抗体的制备及化学发光 检测方法的建立

目的：制备人绒毛膜促性腺激素（beta-HCG）单克隆抗体,建立人beta-HCG双抗体夹心CLIA 检测方法。方法：用人beta-HCG 抗原 免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株,然后将细胞株扩大培养并纯化上清液获得抗体,测定抗体亲和力、特异性及 表位,最后建立双抗体夹心CLIA方法。结果：获得4 株抗人茁-HCG的杂交瘤细胞株(beta-1-1、beta-2-1、beta-3-1、beta-4-1)。用beta-1-1 和 beta-2-1 建立的双抗体夹心法的检测范围为0.5 mIU/mL-800 mIU/mL,灵敏度0.23 mIU/mL,检测结果的相对偏差均在± 10 %内,回 收率在90 %以上。结论：本研究最终成功制备了抗人beta-HCG mAb,建立了定量检测人beta-HCG 的双抗体夹心CLIA 方法,为 beta-HCG 检测及疾病的诊断奠定基础。