鳞翅目昆虫染色体的研究方法

本研究以鳞翅目昆虫睾丸为材料,在常规压片法基础上引进空气干燥法进行改良。得到高清晰度的昆虫染色体图谱。睾丸在不同的低渗液里处理后,置入卡诺氏液固定,然后用空气干燥法制片,Giemsa液染色。结果表明这一方法制备所得到的昆虫染色体图,不仅染色体分散好,而且染色体的细微结构较清晰。     

人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备失败可能原因分析

在开设人类外周血淋巴细胞培养实验中 ,我们采用的实验方法是 :将教师事先配制好的经试培无菌后的 ,含 2 0 %小牛血清的 RPMI1 64 0培养液分装到 2 5m L圆形培养瓶中 ,每瓶 5m L ,每个学生一瓶。实验从抽血→接种→培养→加秋水仙素→收集细胞制片→核型分析等步骤均由学生自己完成。实验的具体操作方法是 :每个实验班 ( 2 0人 )由两个学生 (男女各 1名 )自愿献血 ,静脉取血 4 m L,肝素抗凝 ,每个学生在超净工作台内向培养液内加入一定量血液 ,然后将培养瓶放进 3 7℃恒温箱中培养 72 h,在收集细胞制备染色体之前的 2～ 3h,向培养瓶中加…     

果蝇唾腺染色体的观察和制片方法的改进

几年来我们在教学中进行了多方面的实验探索,在果蝇唾腺制片方法上加以改进,采用加蔗糖液保色,树脂胶封边,制备一种半永久制片标本。操作过程如下: 1.取出唾腺,在其上加2滴(37℃)蒸馏水低渗处理10～20分钟,使唾腺细胞涨大有利于染色体的分散。 2.用滤纸吸去蒸馏水,加1滴1N HCl解离8～15分钟(时间随当时的温度而定),吸去解离液,用蒸馏水轻轻冲洗2～3次,将水吸净。     

一种半永久玻片标本的制备方法

这里介绍一种用蔗糖液制备半永久玻片标本的方法。用这种蔗糖液制备半永久玻片标本研究染色体是很方便的和有实际意义的。这种用蔗糖液制备的半永久玻片标本,可以保存较长时间(一年或更长)。蔗糖液的制备方法取40克蔗糖(化学纯)溶解在60毫升水中,并加热至沸,直至溶液总体积减少了1/4时为止。为避免蔗糖液冷却后出现结晶,要向蔗糖液滴入2—3滴香柏油,细心搅匀,然后再加0.2克苯酚结晶,该糖液可保存一个月以上。花药制片方法 1.从经卡诺固定剂(95％酒精:冰醋酸3:1)固定的保存在70％酒精中的花序上取出一些花药,用醋酸地衣红色液(醋酸洋红、醋酸间     

黑麦1R染色体的显微分离与回收

建立了利用显微操作技术分离植物单个染色体的方法。以黑麦(Secale cereale L.)为材料,以其标准染色体组型图为依据,识别出黑麦含抗病基因的1R染色体。经显微操作,将单条1R染色体放入Ep-pendorf管中。研究表明,用α-溴奈饱和液对细胞进行预处理,可快速鉴别出黑麦1R染色体。采用去壁低渗制片技术,可明显地改善显微分离单染色体的条件。     

4种蜘蛛染色体研究初报

以早期胚胎细胞为材料,经秋水仙素处理、低渗、固定,制片及染色,制备蜘蛛体细胞染色体标本,并用血细胞染色体制片观察验证,镜检表明,4科4种蜘蛛的体细胞染色体数为:中华涡蛛(Oatonooa sinensis)为17和18,居室拟壁钱(Oecobius cellarioum)为22和24;北国壁钱(Uroctea lesserti)为39和42:大腹圆蛛(Aranea Ventricosus)为49和52。计数结果分析,它们的性别决定染色体机制是:中华涡蛛为XO型,居室拟壁钱为X_1X_2O型,北国壁钱为X_1X_2X_3O型,大腹圆蛛为X_1X_2X_3O型。     

雄性东亚钳蝎减数分裂和染色体组型

本文作者对我国药用动物东亚钳蝎——Buthusmartensi的精母细胞减数分裂和染色体组型进行初步观察。该虫的减数分裂有细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。染色体数目24者居多,2n=24,即2n=22A+xy。染色体组型有3对为中部着丝粒染色体,7对亚中部着丝粒和1对端部着丝粒染色体。1对性染色体xy均为亚中部着丝粒染色体。     

一例智力低下患者7q~ 标记染色体的来源鉴定

以人类染色体显微切割、PCR技术构建的现有人类染色体特异性和染色体区带特异性探针池作为绘画探针,采用正向染色体绘画技术,结合染色体筛查方法,查明了一例7q~ 标记染色体患者的染色体附加片段来源于3q26→3qter。确定该患者的核型为46,XX,-7, der(7)t(7;3)(7pter→7q32::3q26→3qter)。应用这个策略,能够快速有效地鉴定标记染色体的来源。     

用组培芽鉴定组培材料染色体数目的方法

通过与根尖比较研究组培芽制片方法的结果表明:用组培芽制片在预处理方法上,以低温(0℃)结合0.002 mol*L-1 8-羟基喹啉处理4～4.5 h的效果较好;解离时,以2.5%混合酶液(纤维素酶与果胶酶各占2.5%)于25℃下解离4～4.5 h效果较好.利用所确立的组培芽制片程序,鉴定出新创制的Cucumis属种间杂种双单倍体和马铃薯无性变异系的染色体分别为2n=19和2n=96.证明以组培芽为材料进行染色体制片是一种快捷而有效的鉴定组培材料染色体数目的方法.     

葫芦科植物幼嫩子房壁制片技术的优化及其染色体倍性鉴定

该研究利用黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜这几种葫芦科植物的幼嫩子房壁作为材料进行染色体制片,探索子房材料的样品大小、预处理时间和酶解时间对染色体制片的影响及其优化,并用该制片方法对黄瓜候选单倍体植株的子房壁进行倍性鉴定和荧光原位杂交实验。结果发现:(1)黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜的幼嫩子房壁最佳预处理时间分别为1 h 30 min、1 h、55 min和45 min,子房长度为0.2～1 cm,子房壁材料切成边长为1～1.5 mm小块,酶解时间为1 h 10 min～1 h 20 min时,用该优化制片方法均可观察到较多的分裂相。(2)利用该方法鉴定结果显示,葫芦科植物黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜的染色体分别为14、24、22和24条,黄瓜候选单倍体植株的体细胞染色体数为7条。(3)将该制片方法获得的染色体装片用于荧光原位杂交结果显示,在二倍体黄瓜染色体中有3对明亮的45S rDNA杂交信号和1对5S rDNA杂交信号,而单倍体黄瓜中相应信号数量均减半;在甜瓜、西瓜和西印度黄瓜中均有2对45S rDNA杂交信号和1对5S rDNA杂交信号。研究认为,利用葫芦科植物子房壁作为制片材料,不仅可以获得良好的分裂相,还具有易于取材、制片效率高等优点,因此子房壁制片法是研究植物染色体数目和鉴定倍性的有效方法,且该制片方法也适用于进一步的荧光原位杂交分析。     

一种用于染色体观察的改良绒毛细胞直接制备法

为弥补羊水检查时间过晚之不足,1984年 Simoni利用绒毛标本直接制备法观察染色体获 得成功,此后,即日益为人们所注目。我们改良 了绒毛细胞直接制备方法,以胶原酶代替乙酸 处理,对绒毛细胞直接制备法（简称乙酸法）和 改良法（简称胶原酶法）进行了比较。大致过程 如下： 取妊娠6-7周人流绒毛组织50mg左 右,严格挑选后,生理盐水洗净,移人含最终浓 度0.5,ug/ ml秋水仙素的RPMI 1640培养液中 孵育1小时（pH7.2, 370C),然后分成两份。一 份按乙酸处理法进行制片：(1)去除培养液,加 3m11.5外拘椽酸钠溶液低渗15分钟;(2）加人 数滴3:1的甲醇：冰乙酸预固定10分钟;(3）吸 弃固定液,重复固定巧分钟;(4)吸弃固定液, 加入1m160并乙酸水溶液,处理2分钟,即追加 纯甲醇2ml; (5)吸取细胞悬液于离心管内离心 (1500-1800rpm); (6）冰水滴片,风干,Giemsa 染色。另一份按改良的胶原酶法制备染色体,大 致如下：(1)弃培养液加人15ng/ml胶原酶4ml, 孵育15-20分钟（370C); (2）加人4m1生理盐 水,离心（1000rpm),分钟,弃上清液,经0.75% 氯化钾4 ml低渗20分钟（370C),用甲醇冰醋 酸固定液lml预固定后,依上法离心,弃上清 液;(3）甲醇冰醋酸（3:1)重复固定15分钟,混 匀后自然沉降,吸上层细胞悬液离心,如此重复 二次后,再固定15分钟,气干法制片。28例实 验结果见表1,无论是可数分裂相,还是完整分 裂相出现率,胶原酶法均比乙酸法为高,二者间 有显著差异。     

杉木染色体的研究简报

笔者将武昌狮子山人工种植的杉木林的核型进行了观察。种子在25℃的温箱中发芽,取根尖用常规压片法制片。核型分析取7个细胞的平均值。观察结果如下:杉木体细胞具有22条染色体(2n=22),与前人报道一致。未发现B染色体。染色体的相对长度、臂比和类型见表1。染色体形态和模式图见图1—1和图2。     

杉木染色体的研究简报

笔者将武昌狮子山人工种植的杉木林的核型进行了观察。种子在25℃的温箱中发芽,取根尖用常规压片法制片。核型分析取7个细胞的平均值。观察结果如下:杉木体细胞具有22条染色体(2n=22),与前人报道一致。未发现B染色体。染色体的相对长度、臂比和类型见表1。染色体形态和模式图见图1—1和图2。     

'土佐文旦'胚囊发育及其子代体细胞染色体的观察研究

选取母本‘土佐文旦’不同时期的花蕾及文旦杂交F1子代3~5 mm长的幼叶,采用石蜡制片法及柑橘染色体制片技术,观察不同时期母本子房结构及杂交F1子代体细胞染色体数目。结果显示:(1)追踪到母本大孢子的发生及不同时期胚囊的发育特征,获得了杂交F1子代清晰可靠、分散良好的体细胞染色体图像,母本石蜡切片观察结果为进一步确定2n雌配子的最佳诱导期提供依据;(2)杂交F1子代体细胞染色体观察结果表明,杂交F1子代中既有正常的二倍体也有三倍体,为进一步原位杂交技术及确认2n配子类型和可能的遗传效应奠定了基础。     

白花败酱染色体的核型分析

用去壁低渗染色体制片方法,对白花败酱(Patrinia villosa Juss)茎尖细胞染色体制片,研究其染色体组型.结果表明:白花败酱为二倍体、体细胞染色体数目为22;染色体组型公式为2n=2x=22=10m 4sm 4st 4t,第2、3、4、5、8号染色体为中间着丝点染色体,第6、11号染色体为近中着丝点染色体,第1、10号染色体为近端着丝点染色体,第7、9号染色体为端部着丝点染色体;染色体基数x=11,该染色体组内最长与最短染色体长度比值为3.037,臂比大于2:1的染色体共4条,占总数的36.4%,则白花败酱的核型类型为2B型.     

每期10题

图中所示为果蝇染色体及部分基因,1.卜班.w分别表示各对同源染色体。图(1)中的乐b.乙e.v-v.w一w表示位于染色体中不同基因座上的基因。根据图示回答下列各题:整一整· 1 1 11子有: 、A.Bb和反两种,其比值为l,1。 B.BE和be两种,其比值为1,l。 C.Bb、Ee、BE、be四种,其比值为9:3:3:l。 D.BE、be、Be、城四种,其比值为1:I:1:l。 6.含图(2)所示染色体组成的细胞,进行减数分裂产生的配子中有_个染色体组,组内染色体的特点是_.~..…。 、7.图(1).(2)果蝇的性别分别是L.图(l)、(2)个体中,性染色体是由()所组成的。 A.I和1 B.贾和互 C.I和1…     

黑麂的核型

我们在进行麂属核型进化的研究过程中,发现我国特有动物—黑麂(Muntiacus crinifrons)的染色体数目较少,比已知脊椎动物中,染色体数最少的赤麂(Muntiacus muntjak vaginalis)略多,与Wurster等(1972)报导的一头捕自马来西亚的雌性赤麂(Muntiacus,muntjak muntjak)的染色体数目相同,但形态有差异。现简报如下。 材料和方法 雌性:用肺成纤维细胞培养法,在含有15％小牛血清的F_(12)培养基中培养,温度38℃。终止培养前4小时加入秋水仙素,用胰酶消化法收获细胞,细胞悬浮在0.075M的氯化钾液中低渗15分钟,用甲醇—冰乙酸(3:1)液固定30分钟(每次15分钟)。空气干燥法制片。Giemsa染色。测量计算10个中期分裂相,按Leven等(1964)的标准进行染色体分组。     

海马硬化对癫痫敏感性的影响

癫痫是一种常见的神经系统疾病,随着神经影像学诊断技术的发展,海马硬化与癫痫的关系日益受到重视,报道约有60%～70%的癫痫患者伴有一侧海马硬化。动物研究发现癫痫敏感性长期增强的动物常伴有海马硬化,但二者的因果关系尚难以确定。全蝎是我国传统的抗癫痫药材,本实验室己证实全蝎具有防止癫痫敏感性形成的功效。本工作旨在用抗癫痫敏感性形成的手段观察海马硬化在癫痫敏感性形成中的作用。1　材料与方法(1)ＢｍＫ粗提液的制备　选用东亚钳蝎(ＢｕｔｈｕｓＭａｒｔｅｎｓｉｉＫａｒｓｃｈ,Ｂｍｋ)。去盐,42℃烘干并研成粉末,然后用生理盐水…     

减数分裂联会复合体的制备技术

在生物减数分裂制片中 ,镜下只能看到同源染色体 ,而联会同源染色体的 SC却无法看到 ,本室改进后的微铺展——硝酸银染色技术制备的 SC片 ,在光镜下可以清晰地观察到 SC这一特殊结构。现以小白鼠精母细胞 SC样品制备为例 ,方法如下 :取性成熟的昆明种雄性小鼠 ,颈椎断离处死 ,取两侧睾丸 ,用 2 .2 %柠檬酸钠洗去脂肪等污物 ,去除白膜 ,在 0 .9%的生理盐水中剪碎 ,制成细胞悬液 ,在一牙科蜡 (或涂有石蜡的平面 )上滴加一直径约 1cm的 0 .4 %KCl液珠。取少量细胞悬液滴加在液珠面上 ,在表面张力的作用下 SC则铺展开 ,用涂有 0 .3% Formv…     

猪带绦虫头节装片制作的改进

猪带绦虫头节装片制作的改进猪带绦虫是动物学、寄生虫学教学中的一种重要实验材料。我们参照经典的制片方法,井尝试以干燥兔胆囊生理盐水制备液代替新鲜猪胆汁生理盐水制备液,使用植物学制片中常用的爱氏苏木精液作为染色剂,进行猪带绦虫头节整体装片的制作,质量较为...