坐骨神经阻滞引起成年大鼠初级体感皮层代表区的快速改变

为了探讨成年大鼠坐骨神经（ＳＣＩ）去传入后初级体感皮层是否发生快速重组,在氯胺酮麻醉下,利用微电极测定后爪代表区,然后用普鲁卡因阻滞对侧ＳＣＩ。结果表明,阻滞后１ｈ、４ｈ和８ｈ,隐神经代表区（ＳＡＲ）比对照分别增大３２．５％（ｎ＝７）、９３．０％（ｎ＝１７）和１００％（ｎ＝４）。此外,在原ＳＡＲ和新生ＳＡＲ记录的平均多单位诱发反应的峰潜伏期,后者比前者延长４．３ｍｓ。作者推测在快速出现的皮层重组机制中,皮层－皮层多突触通路的去抑制可能起重要作用     

成年大鼠体感皮层局限损伤引起的代表区重组

本文目的是探讨在成年大鼠初级体感皮层（ＳＩ）内进行局限损毁能否引起损毁区周围的代表区重组。在氯胺酮麻醉下用微电极技术测定隐神经代表区（ＳＡＲ）和坐骨神经代表区（ＳＣＲ）,然后用铂电极对ＳＡＲ进行选择性电解损毁。三至四周后进行重复测定。结果表明,在１４例所观察的大鼠中,９例在原损毁区以外发现新生的ＳＡＲ,其面积为０．２０±０．０８ｍｍ２。这表明成年大鼠ＳＩ神经元在中枢损伤后具有一定的重组能力。     

兔室旁核－脊髓径路对血量扩张引起肾交感神经活动抑制的作用

在室旁核（ＰＶＮ）完好或ＰＶＮ注射抗坏血酸的双侧窦主动脉去神经的麻醉兔,血量扩张引起肾交感神经活动（ＲＳＮＡ）抑制均约４８％。然而在红藻氨酸损毁ＰＶＮ后的３—４ｈ和３—４ｄ,这种ＲＳＮＡ抑制分别减弱到－２８．０±４．５％和－２５．７±４．１％（Ｐ＜０．０５）,同时其抑制时程也显著缩短（Ｐ＜０．０１）。此ＲＳＮＡ抑制也可被脊髓Ｔ１０—Ｔ１２节段蛛网膜下腔注射血管升压素能Ｖ１受体阻断剂而显著地减弱。在血量扩张时对照组与实验组血压均呈小而短暂升高,无显著差别。上述结果表明血量扩张引起的ＲＳＮＡ抑制,部分是通过迷走传入神经触发ＰＶＮ－脊髓径路介导的。     

转hDAF基因小鼠的构建(英文)

本工作构建了含有ｈＤＡＦ基因的转基因小鼠,以便研究ｈＤＡＦ基因能否消除异种器官移植中的排斥反应。 采用ＤＮＡ重组的方法构建ｈＤＡＦ基因的表达载体ｐＳＰ６４ＨＰ（Ｆｉｇ．１）。通过受精卵显微注射,将其中的目的基因片段,转移到小鼠体内,建立转基因小鼠。再通过Ｄｏｔ ｂｌｏｔｔｉｎｇ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ杂交方法对出生小鼠的基因组特征进行查证。 连续两次对直接裂解菌液做ＰＣＲ扩增,筛选出重组质粒（Ｆｉｇ．２＆３）,酶切图谱（Ｆｉｇ．４）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交（Ｆｉｇ．５）分析结果与预期吻合,出现预期条带;小鼠受精卵注射后存活比率为７７．９％,受精卵的发育率为３．４％,出生小鼠中,１０．５％出现清晰杂交信号。 表明：ｈＤＡＦ基因表达载体构建成功;并整合入小鼠基因组中。     

重组FAS分子的表达、纯化及抗体制备

用ＰＣＲ法扩增出编码人ＦＡＳ分子胞外区的ｃＤＮＡ片段,直接克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上,经ＤＮＡ序列测定后,再插入到谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－ＫＧ的ＥｃｏＲⅠ和ＳａｌⅠ位点之间,构成重组质粒ｐＫＧ－ｈＦＡＳ,将此质粒导入大肠杆菌,经ＩＰＴＧ诱导后获得ＧＳＴ－ｈＦＡＳ重组融合蛋白的表达,用谷胱甘肽偶联的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ经亲合层析获得纯化的ＧＳＴ－ｈＦＡＳ蛋白,经凝血酶酶切和二次亲合层析去除ＧＳＴ部分,得到纯化的ＦＡＳ蛋白．用纯化的ＦＡＳ抗原免疫家兔制备了抗ＦＡＳ抗体,经检测发现抗ＦＡＳ抗体能诱导Ｕ９３７细胞发生细胞凋亡     

MRSA和MRCNS院内分布调查

对１６３７ 人（ 件） 次医、护人员手及护理工作台和病房床头桌进行了金黄色葡萄球菌（ＳＡ） 、凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ） 、耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌（ ＭＲＳＡ） 及耐甲氧苯青霉素凝固酶阴性葡萄球菌（ ＭＲＣＮＳ） 的分布调查。结果表明,四种标本上ＳＡ 携带率分别为４．５ ％ 、３．１ ％ 、３．０ ％ 和６．１ ％ ;ＣＮＳ 携带率分别是３１．３ ％ 、３７．７ ％ 、３７．６ ％ 和４３．４ ％ 。而四种标本上ＭＲＳＡ 占检出ＳＡ 的百分率分别是２６．２ ％ 、２４．３ ％ 、２３．０ ％ 、３１．８ ％ ;ＭＲＣＮＳ占检出ＣＮＳ的百分率分别是２８．１ ％ 、２７．６ ％ 、２２．０ ％ 、３４．８ ％ 。所检出的ＭＲＳＡ 和ＭＲＣＮＳ对１４ 种抗生素的耐药性较ＳＡ 和ＣＮＳ都高。鉴于ＭＲＳＡ 和ＭＲＣＮＳ在医院环境中的分布,注意医护人员手及工作环境的清洁和消毒,是切断该类菌交叉感染的有效途径。     

缺氧复合失血性休克动物血浆对血管内皮细胞与白细胞粘…

本实验观察缺氧（模拟海拔４ ０００ｍ高原２４ｈ）复合失血性休克２４ｈ山羊血浆（ＳＰ）对培养的肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）与多形核白细胞（ＰＭＮ）粘附的影响,并对其机制进行了探讨。结果表明,ＰＡＥＣ在含２５％浓度ＳＰ的培养液中孵育１０ｍｉｎ－１２ｈ后,与ＰＭＮ粘附率明显增加（２７．４％－４６％,与对照组５％相比Ｐ〈０．０１）;温育１２ｈ末ＰＡＣＥ与ＰＭＮ的粘附力也比孵育３ｈ者明显增加（Ｐ〈０．０１）;     

优化mRNA翻译起始区提高人粒－巨噬细胞集落刺激因子在E．coli中的表达

人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）是一种重要的造血生长因子．利用基因重组技术构建两个ｈＧＭ－ＣＳＦ的Ｅ．ｃｏｌｉ表达菌株,一个为在不改变氨基酸顺序的前提下,对ｍＲＮＡ翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ））,另一个为未突变的对照（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ））．经酶切电泳、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ等分析鉴定,证明两者均能表达特异性的１４．６ｋＤｈＧＭ－ＣＳＦ,但ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ）的表达水平较ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ）提高了１．２６倍,占菌体总蛋白的１６．９％．ｍＲＮＡ翻译起始区二级结构预测分析表明,优化突变后生成自由能ΔＧ从原来的－１０．２提高至－９．４Ｋｃａｌ,ＡＵＧ从部分配对状态变为非配对状态．     

PCR-SSP技术对广东汉族人HLA-DR基因分型

探索具有高分辨率、高特异性和简捷快速的方法对ＨＬＡ－ＤＲ基因分型,为临床器官移植配型和疾病相关性分析提供实用的方法和基础资料．利用ＤＲ１～ＤＲｗ１８序列特异性的１９组引物及１对内参照引物进行ＰＣＲ扩增即ＰＣＲ－ＳＳＰ对ＨＬＡ－ＤＲ进行基因分型,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,溴乙锭染色,在紫外光下观察分型结果．每个被检个体的ＤＲ型别可由特异引物扩增出现的电泳谱带直接判断．双盲检测２２例的结果１００％正确．在１０２例中国广东地区汉族人中,ＤＲ９和ＤＲ２的基因频率最高,分别为０．２２０５和０．１９１２,ＤＲ１０为最低（０．００９８）．与用ＰＣＲ－ＳＳＯ方法分型获得的结果比较,基因型别分布基本一致,但一些等位基因的频率有差异,表明ＨＬＡ－ＤＲ基因频率的分布在不同地区、不同种族的人群间存在着差异．ＰＣＲ－ＳＳＰ法分辨率和特异性虽不及ＰＣＲ－ＳＳＯ法但比血清学方法精细,分型的全过程只需２～４ｈ能满足临床器官移植配型的要求．基因频率调查结果为器官移植配型和疾病相关性分析提供了基础资料．     

复制缺陷型腺病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在体内外的高效转移和表达

为了构建含人凝血因子Ⅷ基因的重组腺病毒载体系统,首先构建了含ＦⅧ（Ｂ结构域缺失型）的载体质粒ｐＡｄ－ｈＦⅧ和插入内含子结构的ｐＡｄＩ－ｈＦⅧ,经脂质体介导,证明两质粒的目的基因均能在ＣＯＳ－７细胞中表达有凝血活性的ＦⅧ因子,其中经纯化的载体质粒ｐＡｄ－ｈＦⅧ与ｐＢＨＧ１０经脂质体介导,共转染至２９３包装细胞,经同源重组和Ｅ１蛋白反式互补,形成Ｅ１／Ｅ３缺失型重组腺病毒载体颗粒Ａｄ－ｈＦⅧ．ＰＣＲ检则到病理２９３培养液上清的病毒ＤＮＡ中具有目的基因扩增片段,证明病毒ＤＮＡ含有ＦⅧ基因．经扩增、纯化、滴度测定,用于感染离体细胞ＣＯＳ－７、Ａ５４９、Ｌ９２９、２９３．证实该病毒能在上述细胞中高效转移和表达目的基因,其表达量具有一定范围内的剂量依赖性．ＣＯＳ－７细胞中,ＭＯＩ＞１０００时,有细胞毒效应,表达量反而下降．经耳缘静脉注射Ａｄ－ｈＦⅧ至家兔后,１～４周能测到一定水平的ＦⅧ蛋白,１周内升至最高峰．免疫组化研究表明感染的离体细胞和家兔肝等组织均有ＦⅧ表达,其中肝脏表达最高．为甲型血友病的基因治疗开辟了新途径     

人GRY-RBP基因的表达及其RNA结合活性的初步鉴定

ＲＲＭ ＲＮＡ 结合蛋白在基因的转录后调控中起着重要作用．人ＧＲＹ－ＲＢＰ 是我们实验室最近克隆的一个新的全长ｃＤＮＡ,编码一个ＲＲＭ ＲＮＡ 结合蛋白．ＧＲＹ－ＲＢＰ 的全编码区用ＰＣＲ扩增后,克隆到ｐＥＴ３０ａ＋ 表达载体中,在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得了高效表达,表达的ＧＲＹ－ＲＢＰ重组蛋白占细菌总蛋白的２１％ ．利用融合在ＧＲＹ－ＲＢＰＮ 端的Ｈｉｓ．Ｔａｇ,采取亲和层析的方法纯化了表达的重组蛋白．为了检测ＧＲＹ－ＲＢＰ的ＲＮＡ 结合活性及其所结合的ＲＮＡ 性质,将表达的蛋白与ｐｏｌｙ（Ａ）－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ结合,发现ＧＲＹ－ＲＢＰ能与ｐｏｌｙＡ （Ａ）结合,结合活性能被可溶性的ｐｏｌｙ（Ａ）、ｐｏｌｙ（Ｃ）减弱．改变ＮａＣｌ浓度和加入不同浓度的酵母ｔＲＮＡ竞争物后,ｐｏｌｙ（Ａ）结合活性不变．     

大鼠酰胺化酶的信号肽引导的昆虫细胞表达外泌系统

将大鼠酰胺化酶的信号肽及前导肽编码序列引入昆虫核多角体病毒转移表达载体,构建ＰＡＢＣｈＧＲＦ（Ｇｌｙ）、ＰＡＢＣＩＧＦＩ融合基因的昆虫细胞分泌表达质粒ｐＢａｃＰＡＧ２、ｐＢａｃＰＡＩ,并与经修饰的银纹夜蛾核多角体病毒ＢａｃＰＡＫ６线性化ＤＮＡ共转染秋粘虫细胞Ｓｆ２１,通过同源重组、筛选和鉴定,得到它们的重组病毒ＢａｃＰＡＧ、ＢａｃＰＡＩ。将重组病毒感染Ｓｆ２１细胞,ＰＡＢＣｈＧＲＦ（Ｇｌｙ）和ＰＡＢＣＩＧＦＩ均得到有效外泌表达,表达产物通过ＩｇＧＳｅｐｈａｒｏｓｅ柱可获得快速纯化。     

人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在Pichia pastoris中的表达

用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）基因,与ｐＰＵＣ１８重组,经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析,获得全长人ＰＡＩ－２基因．ＰＡＩ－２基因与表达载体ｐＰＩＣ９重组,构建受乙醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化ＧＳ１１５宿主菌,经表型筛选和ＰＣＲ扩增筛选阳性克隆,用甲醇诱导表达,重组ＰＡＩ－２以分泌型表达,占分泌总蛋白的３０％,具ＰＡＩ－２抗原性,与低分子量尿激酶形成了抗ＳＤＳ复合物,具抑制纤溶的活性（９１．４ＡＩＵ／ｍｌ）．对培养条件也进行了探讨．     

普通小麦4A染色体重排的原位杂交研究

以普通小麦第四部分同源染色体组的１３个ＲＦＬＰ（限制性片段长度多态性）标记为探针,通过原位杂交进行了物理定位和４Ａ染色体重排的物理特征研究。ＲＦＬＰ分析确定的标记所在的染色体臂和原位杂交结果相一致。位于４ＡＬ上的９个ＲＦＬＰ探针有６个的杂交点集中分布在距着丝点约６０％～７０％的区域内。本结果支持了４Ａ染色体来自于双重易位的假说,第一次易位产生的４ＡＬ／５ＡＬ染色体又和７ＢＳ发生易位,现在的４Ａ染色体结构为４ＡＬ／５ＡＬ／７ＢＳ,保留在４Ａ的５ＡＬ、７ＢＳ染色体片段约分别为０５μｍ、２２μｍ。所用ＲＦＬＰ标记杂交点聚集的区段分布于染色体臂的近端部,可能和易位断点及染色体的交换重组有关。４ＡＬ上Ｃ－带距着丝点的相对距离和各标记杂交点集中区段距着丝点的相对距离接近。     

BA对花生叶片腺苷酸含量和能荷的影响

去顶去根花生幼苗库叶（上位叶）经１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ ＢＡ涂抹处理１２ｈ和４８ｈ时,库叶ＡＴＰ含量增加,分别高于对照１９．４％和３３．１％。ＡＤＰ含量在处理后１２－３６ｈ,不断增加,以后逐渐降低,接近对照水平,ＢＡ处理库叶减少ＡＭＰ含理。ＢＡ促进库叶能荷值增加,调节总腺苷酸含量的动态变化。ＢＡ处理库叶１２ｈ,叶片组织和线粒体呼吸速率增加,加强了线粒体氧化磷酸化和能量传递的过程。     

大鼠内侧隔核、斜角带中NOS与ChAT、NGF-R、AChE的共存神经元

用酶组织化学和免疫组织化学双标技术,观察了正常ＳＤ大鼠基底前脑内侧隔核（ＭＳ）、斜角带垂直支（ＶＤＢ）和水平支（ＨＤＢ）中ＮＯＳ阳性神经元的形态和分布及ＮＯＳ与胆碱能神经元标志物ＣｈＡＴ、ＮＧＦ受体（ＮＧＦ－Ｒ）和ＡＣｈＥ之间的共存关系。结果发现,ＭＳ、ＶＤＢ和ＨＤＢ的头端ＮＯＳ阳性神经元较多、胞体较大、突起多,尾端ＮＯＳ阳性神经元数目较少、胞体较小、突起少而短。ＮＯＳ＋ＣｈＡＴ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９０％,占ＣｈＡＴ阳性神经元总数的３９％;ＮＯＳ＋ＮＧＦ－Ｒ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的８３％,占ＮＧＦ－Ｒ阳性神经元总数的４０％;ＮＯＳ＋ＡＣｈＥ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９６％,占ＡＣｈＥ阳性神经元总数的３９％。这些结果为研究Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ病理过程中基底前脑隔区胆碱能神经元退变与ＮＯ的关系提供了形态学依据。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌肌浆网Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase基因转录调节的影响

观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对心肌肌浆网Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ基因（ＳＥＲＣＡ２ａ）转录调节的影响,评价ＤＭＰ８１１对此效应的干预作用．６周龄雄性ＳＤ大鼠随机分为３组,每组６只．组１：生理盐水输注;组２：ＡｎｇⅡ输注＋ＤＭＰ８１１管饲（３ｍｇ·ｄ－１·ｋｇ－１）;组３：ＡｎｇⅡ输注（２００ｎｇ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１．１周后称其体重,取心脏并称重,提取心脏总ＲＮＡ后采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ的方法检测ＳＥＲ－ＣＡ２ａ的转录水平,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＡｎｇⅡ１型受体（ＡＴ１）ｍＲＮＡ水平．实验后,组３心重（ＣＷ）、心重／体重（Ｃ／Ｂ）、ＡＴ１受体转录水平均高于组１（分别增加４．７±０．４％,４．９±０．９％和２４．７±３．５％;Ｐ＜０．０１）,而ＳＥＲＣＡ２ａ基因转录水平显著低于组１（降低２０．１±３．０％,Ｐ＜０．０１）,并且ＳＥＲＣＡ２ａｍＲＮＡ水平与ＡＴ１受体ｍＲＮＡ水平呈负相关（ｒ＝－０．７４,Ｐ＜０．０１）．ＡｎｇⅡ导致的上述改变能被ＤＭＰ８１１完全阻断．ＡｎｇⅡ通过其Ⅰ型受体的介导,诱导了ＳＥＲＣＡ２ａ的转录下调     

青藏高原毛茛科3种特有植物核型和进化研究

对青藏高原高山冰缘地区毛茛科３种特有植物的核型进行了分析。它们的核型公式（Ｋ）、染色体相对长度组成（Ｃ．Ｒ．Ｌ．）和核型不对称系数（Ａｓ．Ｋ％）分别为：青藏金莲花Ｔｒｏｌｉｕｓｐｕｍｉｌｕｓｖａｒ．ｔａｎｇｕｔｉｃｕｓ：Ｋ（２ｎ）＝６ｍ＋８ｓｍ（２ＳＡＴ）＋２ｓｔ,Ｃ．Ｒ．Ｌ．＝４Ｌ＋４Ｍ２＋４Ｍ１＋４Ｓ,Ａｓ．Ｋ％＝６３．５７,核型属２Ｂ型;甘青乌头Ａｃｏｎｉｔｕｍｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ为Ｋ（２ｎ）＝６ｍ＋１０ｓｍ,Ｃ．Ｒ．Ｌ．＝４Ｌ＋８Ｍ１＋４Ｓ,Ａｓ．Ｋ％＝６２．５４,２Ｂ型;单花翠雀花Ｄｅｌｐｈｉｎｉｕｍｃａｎｄｅｌａｂｒｕｍｖａｒ．ｍｏｎａｎｔｈｕｍ为Ｋ（２ｎ）＝６ｍ＋８ｓｍ＋２ｓｔ,Ｃ．Ｒ．Ｌ．＝４Ｌ＋４Ｍ２＋４Ｍ１＋６Ｓ,Ａｓ．Ｋ％＝６４．３４,属３Ｂ型。经同相关近缘种核型资料比较,青藏金莲花核型不对称性和进化程度比金莲花Ｔ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ低;甘青乌头的核型不对称性和进化程度在其近缘类群（乌头组Ｓｅｃｔ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ）已报道的种之内最低;单花翠雀花核型不对称性和进化水平比翠雀组（Ｓｅｃｔ．Ｄｅｌｐｈｉｎａｓｔｒｕｍ）已报道的展毛翠雀花Ｄ．ｋａｍａｏｅｎｓｅｖａｒ．ｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ、     

重组大肠杆菌生产谷胱甘肽发酵条件的研究

研究了重组Ｅ．Ｃｏｌｉ产ＧＳＨ的发酵条件,重点考察了添加酵母膏、前体氨基酸和ＡＴＰ的影响。结果发现,前体氨基酸和ＡＴＰ均能促进胞内ＧＳＨ的积累,若在发酵０ｈ和１２ｈ分别加入２０ｇ／ＬＡＴＰ和９ｍｍｏｌ／Ｌ前体氨基酸,则细胞干重和胞内ＧＳＨ含量可分别比对照提高２４％和１４倍。应用正交试验得出的针对细胞干重和ＧＳＨ总量的最佳组合,最大细胞干重和ＧＳＨ总量比原试验中的最好结果分别提高了１０％和２６％。在分析了该菌对葡萄糖利用情况的基础上,对该菌进行了指数流加培养,２５ｈ细胞干重与发酵液内ＧＳＨ总量分别达到８０ｇ／Ｌ和８８０ｍｇ／Ｌ,比摇瓶最好结果分别提高了８３和４６倍。     

可溶性55kD人肿瘤坏死因子受体(shTNFR55)在变铅青链霉菌中的分泌表达

从 Ｈｅ Ｌａ 细胞中提取总 Ｒ Ｎ Ａ,采用反转录 Ｐ Ｃ Ｒ 技术,从该总 Ｒ Ｎ Ａ 中扩增了约 ５３０ ｂｐ 的ｓｈ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ,并克隆至质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ中酪蛋白酶 ｍ ｅｌ Ｃｌ 分泌信号肽编码序列的下游,构建成含融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 的重组质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．把融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入链霉菌表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ 的多克隆位点,使之位于 ｅｒｍ 强启动子的下游,得到重组表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．经 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交证明重组质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入了 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因片段．对重组菌株 Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ（ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ）的发酵液进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ、受体配基杂交（ Ｌｉｇａｎｄ ｂｌｏｔ）分析、对 Ｔ Ｎ Ｆ 敏感的 Ｌ９２９ 细胞的细胞毒性中和试验表明,可溶性肿瘤坏死因子受体 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 在链霉菌中得到了分泌表达,表达产物具有生物学活性．表达产物的分子量约在 ２６～２８ ｋ Ｄ 之间．