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野生型康氏木霉(Trichodermakoningi)854-B2经多种理化诱变因子及空间微重力辐射等因素的处理,选育到1株高活力纤维素酶变异株B-7。其固体培养物的纤维素酶,以滤纸为底物酶活力为34μ/g,以羧甲基纤维素(CMC)为底物酶力为1472μ/g。与野生菌854-B2相比,产酶活力水平分别提高5倍和7倍多。酶在滤纸上作用的最适条件为pH4.5—5.0,温度55—60°C;25°C,保温24h,pH稳定范围为pH4.0—6.5;70°C保温30分钟,剩余酶活力34.4%。 相似文献
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分子生物学技术在动物营养学中的应用与发展前景 总被引:5,自引:0,他引:5
分子生物学理论与技术的发展和应用已渗透到,生命科学的各各领域,动物营养学的发展需要在分子水平上分析及解释营养素对动物机体的生理,病理变化调控,如生长发育,新陈代谢,遗传变异,免疫与疾病等。本综述了分子生物学在动物营养学中的应用;利用分子生物学技术改造或生产动物性营养物质;从基因水平上研究如何提高动物生产性能及肉用性能:如肉质与瘦肉率等;在分子水平上研究营养与基因表达,调控的关系,以从根本上阐明营养对机体的作用机制;利用基因工程技术开发饲料资源。 相似文献
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用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEMTB3克隆质粒,得到大小约为225bp的ShTB基因片段,分别将其插入到经双酶切的pQE40和pQE30表达载体中,构建了2个ShTB的重组表达质粒pQE40B3和pQE30B2,分别转化到E.coliM15,经IPTG诱导后,重组质粒目的蛋白均得到表达。其中,pQE40B3表达蛋白约占菌体总蛋白的37%,主要为包涵体形式。pQE30B2表达蛋白约占菌体总蛋白的16%,主要为可溶性形式,约9.2%。为重组抗原的制备提供了必要的物质基础。 相似文献
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志贺毒素A/B(ShT-A/B)亚单位基因的克隆与序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
应用PCR技术从Ⅰ型痢疾志贺茵(Shigella dysenteriae type Ⅰ)中,分别扩增出约895bp和225bp的成熟ShT-A,B基因片段,直接克隆至pGEM-T载体中,经蓝白斑筛选、PCR和双酶切鉴定正确后,命名为pGEM-ShTA_2和pGEM-ShTB_3。测序结果表明,插入的片段是ShT-A,ShT-B,且与GenBank中ShT-A,B核酸序列完全一致,从而为重组ShT-A,B的表达研究奠定了基础。 相似文献
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用KpnⅠ、HindⅢ酶切克隆载体pCEM-ShTB_3,然后亚克隆入带有二氢叶酸还原酶(DHFR)的融合表达载体pQE40,构建重组质粒pQE40-ShTB. 转化到E.coli M15中,经IPTG诱导,实现了ShTB-DHFR融合蛋白的高表达,表达量约占菌体总蛋白的21.9%,为包涵体形式。在变性条件下,包涵体蛋白经螯合镍离子的次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和柱一步纯化,得到了纯度为90.5%的重组ShT-B.以纯化的ShTB-DHFR融合蛋白免疫昆明鼠,并结合腹腔注射S180细胞,成功制备了抗ShTB腹水多克隆抗体,效价达1∶1×10~6.间接ELISA和Western印迹结果表明,抗ShT-B多抗与重组蛋白和天然ShT均有特异性结合。本试验结果为毒素检测方法的研究奠定了基础。 相似文献
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