荧光显微镜观察大蒜油对腹水癌细胞的影响

用吖啶橙染色,荧光显微镜观察大蒜油对—S180,昆明小鼠,U14 C57BL/6J小鼠和L1210DBA小鼠的癌细胞作用的影响,结果表明大蒜油有直接破坏癌细胞的DNA,RNA和分裂中期染色体的作用。给药后2—6小时作用最强,12小时后癌细胞数逐渐恢复,因此给药间隔不应超过12小时。我们研究证实大蒜油有明显的抗癌作用,为临床应用提供有力的依据。     

大蒜油不同给药途径对癌细胞周期移行过程的影响

本研究采用流式细胞光度术(FCM)分析癌灶局部及肌注大蒜油(GO)后,S180腹水癌细胞周期移行过程的变化。实验结果表明癌灶局部注射 GO 后,组方图上高倍体 DNA 峰值减少,癌细胞由 G_1期向 S 期运行受阻,S 期细胞显著减少,G_1期与 Go 期细胞积累。肌注 Go 对癌细胞周期影响远不如癌灶局部给药明显。Go 与 G_1期癌细胞积累的原因可能与 GO 对癌细胞周期活动选择性的抑制,或特异性杀伤 S 期或 G_2+M 期癌细胞有关。     

大蒜油对人CFu－L与CFu－GM集落形成能力的影响

本研究用体外细胞培养技术观察了大蒜油对人白血病细胞集落（ＣＦｕ－Ｌ）及骨髓粒单细胞集落（ＣＦｕ－ＧＭ）形成能力的影响。结果证明大蒜油对白血病细胞集落生长有明显的抑制作用,而相同浓度的大蒜油对正常人骨髓（ＢＭ）粒单细胞集落的形成能力亦有一定程度的抑制作用,但抑制作用较弱。     

大蒜油抗肿瘤作用的流式细胞光度术分析

用流式细胞光度术（ｆｌｏｗｅｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）+Ｓ０．２ｍｌ／日。吐温对照组ｌＰ吐温８００．２ｍｌ／日,以排除大蒜油制剂中溶剂（吐温８０）的影响。实验组ｌＰＧＯ１００ｍｇ／ｋｇ／．日。于连续４次注射后的６ｈ,２、３、５、１０天及１０次注射ＧＯ后７天取材,行ＦＣＭ样品制备。三、ＦＣＭ样品制备与测定中国中医研究院基础所腹水癌细胞用ＰＢＳ洗涤,７０％酒精固定,ＲＮａｓｅ消化细胞中的ＲＮＡ,ＰＩ染色。用腹腔内淋巴细胞作标准二倍体细胞。用４２０型荧光激活细胞分选仪（美国Ｂｅｃｔｏ－Ｄｉｃｋｓｏｎ公司产品）测单个肿瘤细胞的ＤＮＡ含量,用组方图显示肿瘤细胞ＤＮＡ倍体性质。图中第一个是ＤＮＡ二倍体（ＺＣ）峰,处于该峰的细胞为Ｇ;／Ｇ。期细胞,第二个峰为４ＣＤＮＡ峰,该处细胞为Ｇ。－Ｉ－－Ｍ期细胞,从２。到４。之间的细胞为Ｓ期细胞。大于４。ＤＮＡ峰细胞为高倍体细胞‘’：。根据不同峰值大小判定用药后肿瘤细胞倍体性质的变化。结果ＮＳ与吐温对照组肿瘤细胞都为非整倍体性,且呈多倍体性（图１,２）。连续４次给药后６ｈ,绝大部分多倍体肿瘤细胞被杀伤,残存肿瘤细胞以二倍体为主,多倍体肿瘤细胞峰值显著下降,甚至在组方图上几乎显不出多倍     

定量细胞化学分析大蒜油抗癌的作用

本文应用细胞化学和显微分光光度计对癌细胞的 DNA,ACP,ANAE、SDH 和G6PDH 进行定量测定,又用流式细胞计分析癌细胞 RNA 含量的变化.实验证明大蒜油能明显抑制癌细胞 DNA 与 RNA 合成,并减低五种酶的活性。表明大蒜油能影响癌细胞的核酸代谢、能量代谢及功能活动、抑制癌细胞的分裂增殖,从而起到抗癌效应.     

冷冻保护剂DMSO对人骨髓细胞部分化学成份的影响

冻存前的多数骨髓细胞质内充满了深蓝色的POX反应颗粒,棕黄色的ANAE反应颗粒及粉红色的糖原颗粒。用5％和20％BMSO作为低温保护剂于液氮中冻存7天的骨髓细胞含破碎细胞成份较多,完整细胞内POX、ANAE及糖原反应均弱。用10％DMSO作为低温保护剂冻存的骨髓细胞中糖原、ANAE反应减弱不明显,POX反应强度略增加。用MPV-Ⅱ型显微分光光度计对上述样品进行定量测定的结果显示5％、20％DMSO低温冻存组骨髓细胞三种化学成份含量均明显降低,10％DMSO低温冻存组骨髓细胞中糖原、ANAE含量均降低,POX含量稍有增加。结果表明10％DMSO对骨髓细胞某些化学成份影响较小。     

不同冷冻条件对骨髓造血细胞的CFU－GM形成能力及DNA活性的影响

本文对不同冷冻条件下人骨髓造血细胞的粒单系集落（ＣＦＵ－ＧＭ）形成能力及ＤＮＡ活性变化进行测定。结果证明：室温下低温保护剂二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）使骨髓造血细胞形成ＣＦＵ－ＧＭ的能力下降;程序降温至－８０℃与降至－８０℃后与在液氮内冻存７天骨髓造血细胞相比较,二者形成ＣＦＵ－ＧＭ的能力以及ＤＮＡ活性均无明显变化;在程序降温过程中,消除融合热释放组骨髓造血细胞形成ＣＦＵ－ＧＭ的能力明显高于来消除融合热释放组。     

大蒜油诱发小鼠中性粒细胞的抗肿瘤活性

大蒜油诱发的小鼠腹腔中性粒细胞具有活跃的形态学特征,显示出强阳性的过氧化氢酶反应。与酵母聚糖(zymosan A)共同孵育,CeCl_3电镜细胞化学沉淀技术显示,中性粒细胞吞噬zymosan A后呈现强烈的H_2O_2生成反应。大蒜油诱发的大鼠腹腔中性粒细胞与~(51)Cr标记的S180肿瘤细胞共同孵育,它与肿瘤细胞的结合能力以及对肿瘤细胞的杀伤能力都高于糖原诱发的小鼠腹腔中性粒细胞。     

融合热释放对低温冷冻人骨髓细胞的核酸与酶类活性的影响

本文用定性定量组织细胞化学方法,对冻前及不同降温条件冻存的人骨髓细胞的 DNA、碱性磷酸(ALP)、过氧化物酶(POX)活性进行测定。在程序降温过程中,没有消除融合热的骨髓细胞的 DNA、ALP、POX 活性均显著下降。消除融合热后,冻存骨髓细胞 DNA 活性没有改变,ALP、POX 活性略有下降。因而,融合热的释放是骨髓细胞生物活性下降的重要因素。     

小鼠腹腔活化巨噬细胞的酸性磷酸酶测定

在两组Mφ数量相等的条件下,用金氏改良法测定小鼠腹腔Mφ的Acp含量,结果注射葡聚糖后小鼠腹腔Mφ的Acp含量明显高于对照组。同时,从Gomori氏硝酸铅染色的标本上,亦看到用葡聚糖活化后的小鼠腹腔Mφ胞体明显增大,细胞铺展明显,细胞质中的Acp阳性颗粒多而粗大,个别Mφ细胞质中的Acp颗粒呈强阳性反应。结果表明葡聚糖(Dextran T500)是一种较理想的Mφ活化物,具有明显增强Acp活性的作用。