进口冰鲜大西洋鲑中传染性鲑鱼贫血症病毒的鉴定

传染性鲑鱼贫血症病毒(Infectious salmon anaemia virus,ISAV)作为一种对鲑鳟鱼类危害严重的病原,对世界鲑鳟养殖业造成较大经济损失。本研究依据世界动物卫生组织(OIE)推荐的方法,对2014年经深圳口岸进口的冰鲜大西洋鲑进行了ISAV检测,9批挪威进口冰鲜大西洋鲑被检出疑似ISAV阳性。然而,9批样品ISAV病毒分离结果均为阴性。基于ISAV血凝素酯酶(Hemaglutinin esterase,HE)基因序列的分析结果,9株ISAV均属于HPR非缺失型ISAV(HPR0ISAV),且与挪威ISAV分离株同源性达98.3%~100.0%。本研究共从491批冰鲜大西洋鲑中检出HPR0ISAV阳性9批,阳性检出率为1.8%。因此,应加强对挪威进口冰鲜大西洋鲑的检疫,以防HPR0ISAV传入我国。     

白花蛇舌草对Ⅱ型胶原蛋白诱导的大鼠类风湿性关节炎的治疗作用

目的：探讨白花蛇舌草（HD）对Ⅱ型胶原蛋白诱导的大鼠类风湿性关节炎（CIA）的治疗作用。方法：取SD大鼠60只随机分为对照组10只、造模组50只,造模组于背部皮内注射Ⅱ型胶原乳剂建立CIA大鼠模型,采用大鼠关节炎评分法评价其模型是否复制成功。造模组再随机分为模型组、雷公藤多苷（GTW）6 mg/kg组、白花蛇舌草3、6、12 g/kg组,每组10只,每天灌胃给予相应的试剂。每周观察关节炎指数和痛阈,于连续干预28 d后,各组大鼠眼眶静脉取血,观察白细胞介素1β（IL-lβ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、前列腺素E₂（PGE₂）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）及护骨素（OPG）水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠关节炎指数,血清IL-lβ、TNF-α、PGE₂、RANKL、OPG及RANKL/OPG水平均明显升高（P<0.05）,光照阈值明显降低（P<0.05）;与模型组比较,雷公藤多苷组、白花蛇舌草低、中、高剂量组关节炎指数,血清IL-lβ、TNF-α、PGE₂、RANKL、OPG及RANKL/OPG水平均明显降低（P<0.05）,光照阈值明显升高（P<0.05）。结论：白花蛇舌草可明显降低CIA模型大鼠关节炎指数,升高痛域阈值,下调IL-lβ、TNF-α、PGE₂、RANKL、OPG水平,从而有效的防治CIA。     

水稻N-糖酰胺酶基因 (OsPNGase A) 的克隆及在毕赤酵母中的分泌表达

N-聚糖酶是一类广泛应用于糖蛋白的N-糖基化修饰研究中的去糖基化酶。本研究通过RT-PCR从水稻中克隆了一个高GC含量(69.48%)的N-聚糖酶基因(Os PNGase A,XM_015775832),通过无缝克隆技术构建酵母分泌型表达载体p PICZ(α)A-Os PNGase A,在毕赤酵母SMD1168H中进行诱导表达,发酵液经DEAE Sepharose阴离子交换层析和His Trap HP金属离子螯合层析纯化,产量可达到12.3 mg/L,比活力为258 U/mg。SDS-PAGE结果显示,纯化的Os PNGase A为单一条带且与预期分子量一致。Os PNGase A能作用于水稻中重组表达的人转铁蛋白(TRF)、玉米中重组表达的鸡蛋抗生物素蛋白(Avidin)以及辣根过氧化物酶(HRP),并且对Avidin的酶切效果优于商业化的PNGase F。Os PNGase A反应的最适p H和温度分别为p H 6.0和40℃,在中性和碱性以及含有100 mmol/L还原剂β-ME和DTT的条件下仍具有活性。水稻Os PNGase A的成功表达为植物糖蛋白的研究提供一个新的工具酶,酵母分泌表达体系的建立为PNGase A的大量制备奠定了基础。     

基于功能类群分析呼兰河口湿地浮游植物群落结构特征

浮游植物对水环境条件变化敏感,其群落演替特征被广泛应用于指示水环境变化。基于3种浮游植物功能类群方法,对呼兰河口湿地浮游植物群落结构进行研究。于2018年春季（4、5月）、夏季（6、7、8月）和秋季（9、10月）三季,在呼兰河口湿地共设置11个采样点,通过ASNOSIM和SIMPER分析探索FG、MFG和MBFG功能类群的演替特征,基于RDA分析阐述功能类群对环境因子的响应模式。研究期间共鉴定浮游植物243个分类单位,隶属于7门9纲18目32科75属;其种类组成主要以绿藻门（46.09%）、裸藻门（19.34%）和硅藻门（18.52%）为主。共划分FG功能类群25个,MFG功能类群20个,MBFG功能类群6个;ANOSIM分析表明不同季节之间FG和MFG功能类群结构差异显著;SIMPER分析表明S1/Lo/W1/P/J/Y、9b/5a/11b/6a/2c/2d/1c和Ⅲ/Ⅰ类群是影响不同季节之间功能类群变化的主要类群;RDA分析表明,FG、MFG和MBFG功能类群的演替受多种环境因素共同影响,其中pH、BOD₅、Tur.和COD_Mn与功能类群演替关系密切。相较于MBFG功能类群,FG和MFG功能类群能更好的响应呼兰河口湿地水环境的空间异质性。     

饲料蛋氨酸水平对异育银鲫幼鱼生长性能影响的研究

研究通过8周的生长实验, 研究饲料中不同蛋氨酸水平对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)幼鱼生长性能、体成分、氨基酸沉积率的影响。实验以鱼粉、豌豆浓缩蛋白、喷雾干燥血球粉为蛋白源, 设计低蛋氨酸(0.57%)实用基础饲料, 并在此基础上分别添加0、0.08%、0.16%、0.24%、0.32%、0.40%的DL-蛋氨酸配成蛋氨酸含量分别为0.57%、0.64%、0.74%、0.81%、0.88%、0.95%(干物质基础, 实测值)的6种等氮等能(粗蛋白质: 37.22%, 总能: 17.61 MJ/kg)的配合饲料。选取初始体重为2.60 g的异育银鲫幼鱼为实验对象, 每个处理3个重复, 每个重复50尾鱼, 养殖系统为室内循环水养殖系统, 每天表观饱食投喂4次。结果显示在饲料中补充DL-蛋氨酸会显著提高异育银鲫幼鱼的特定生长率和蛋白质沉积率(P0.05), 表明异育银鲫可有效利用外源DL-蛋氨酸。各处理组实验鱼肥满度、肝体比、脏体比差异不显著(P0.05), 不同蛋氨酸水平对全鱼水分、粗脂肪、能量没有产生显著影响(P0.05), 补充DL-蛋氨酸显著提高鱼体的粗蛋白质含量, 灰分含量显著降低(P0.05)。随着饲料中蛋氨酸水平的提高, 全鱼蛋氨酸沉积率显著降低, 之后再升高(P 0.05)。补充DL-蛋氨酸可以有效促进其他必需氨基酸在鱼体内的沉积。在饲料中胱氨酸水平为0.42%时, 通过折线模型回归分析, 以蛋氨酸沉积率得到的异育银鲫幼鱼蛋氨酸需求量为占饲料干物质的0.89%, 即占饲料蛋白的2.17%。       

黄芪甲甙干预大鼠肺纤维化相关基因的时空表达

目的:通过基因芯片技术研究大鼠肺纤维化不同时间点和应用黄芪甲甙干预后的基因差异表达,寻找肺纤维化的致病基因和应用黄芪甲甙进行干预治疗相关的靶基因.方法:用含41000个基因的安捷伦大鼠芯片同模型组7天和模型组28天以及BLM+黄芪甲甙组28天的大鼠肺组织进行杂交.利用安捷伦基因扫描仪扫描杂交图像.模型组7天和BLM+黄芪甲甙组与模型组28天进行比较,筛选Ratio值大于2的差异基因进行分析,重复3次.结果:模型组28天对比7天共有2063个基因表达差异,筛选109个基因,43个上调,66个下调.黄芪甲甙28天组对比模型28天组4269个基因表达差异,筛选68个基因,45个上调,23个下调.通过GO和PATHWAY分析软件,提示有不同的功能分类和信号传导途径.结论:基因芯片为了解肺纤维化不同时间点的基因表达的异常,以及黄芪甲甙治疗肺纤维化的可能机制和药物靶基因的提供了理论基础.     

NaCl处理下黄花补血草幼苗生理特性的变化

以荒漠盐生植物黄花补血草(Limonium aureum(Linn.) Hill)为材料,研究不同浓度NaCl处理下渗透调节物含量、活性氧产生和抗氧化酶活性的变化。结果显示：NaCl处理诱导黄花补血草幼苗脯氨酸、可溶性糖和H2O2含量升高及超氧阴离子（O₂^-·）产生速率增大,可溶性蛋白含量在25和50 mmol·L^-1 NaCl处理时低于对照,而100和150 mmol·L^-1 NaCl处理时显著增加;不同浓度NaCl处理下,黄花补血草超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性显著升高,过氧化物酶活性与对照比呈现先增加后减小的变化,而过氧化氢酶活性表现为先降低后升高的变化趋势,但均低于对照。结果表明,黄花补血草在盐胁迫下通过积累渗透调节物和提高SOD、APX活性,使其具有较强的渗透调节能力和抗氧化能力,从而增强对盐环境的适应性。     

三种麻醉机通气系统对患者肺部病原微生态的影响研究

目的分析不同麻醉机通气系统对患者肺部病原微生态的影响情况。方法选择90例全麻插管手术患者作为研究对象,将其随机分为A组(未干预组)、B组(呼吸过滤器组)和C组(麻醉消毒机组),每组30例,比较患者术后肺部感染发生情况。结果三组在麻醉前进行病原菌检测,检出定植菌株,均为条件致病菌:革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌,主要为微球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、芽胞杆菌、棒状杆菌、黄杆菌属、酵母样真菌。三组麻醉机各部位病原菌阳性率比较:麻醉前,三组麻醉机不同部位的病原菌阳性率差异无统计学意义(P0.05);结束麻醉后,检查麻醉机各端口病原菌阳性检出率,其中C组显著低于A组(P0.05),A、B两组差异无统计学意义(P0.05)。B、C两组患者术后肺部感染发生率显著低于A组患者(P0.05)。结论经过干预的麻醉机通气系统对患者肺部微生态环境的影响较小,患者术后呼吸道感染的发生率显著降低。     

猪源戊型肝炎病毒基因IV型ORF3编码蛋白的表达及鉴定

通过PCR从已构建的猪源戊型肝炎病毒全基因克隆扩增ORF3全基因,将扩增产物插入到pMD18-T载体中,亚克隆至原核表达载体pET28a（+）,构建pET28a-ORF3表达载体,转入E.coli BL21 (DE3),IPTG诱导表达。Ni-NTA层析柱纯化表达蛋白,用SDS-PAGE、免疫印迹、ELISA等方法分析鉴定表达产物。结果成功扩增到345 bp的目的基因;构建了重组表达载体pET28a-ORF3;转化宿主菌E.coli BL21 (DE3)后表达产物的相对分子质量在6.50~16.5 kDa之间,与预期表达的目的蛋白相对分子质量相符;表达的目的蛋白能与阳性猪源和人源血清发生特异性反应,证实其具有较好的反应原性。     

生态学的多样性指数:功能与系统发育

生物多样性是生态学的核心问题。传统的多样性指数仅包含物种数和相对多度的信息,这类基于分类学的多样性指数并不能很好地帮助理解群落构建和生态系统功能。不同物种对群落构建和生态系统功能所起到的作用类型和贡献也不完全相同,且物种在生态过程中的作用和贡献往往与性状密切相关,因此功能多样性已经成为反映物种群落构建、干扰以及环境因素对群落影响的重要指标。同时,由于亲缘关系相近的物种往往具有相似的性状,系统发育多样性也可以作为功能多样性的一个替代。功能多样性和系统发育多样性各自具有优缺点,但二者均比分类多样性更能揭示群落和生态系统的构建、维持与功能。