研究: 载脂蛋白E拟肽EpK对apoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响

前期设计合成了一种模拟人载脂蛋白E(apoE)结构域的小分子多肽EpK,体外实验证实该拟肽具有抑制巨噬细胞炎症及增强高密度脂蛋白(HDL)介导细胞胆固醇外流的作用．本文拟借助慢病毒体系分泌性表达EpK,研究EpK在体对apoE基因敲除(apoE^-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的影响．将11月龄雌性apoE^-/-小鼠18只,随机分两组,分别经眼球后静脉丛注射pWPI慢病毒(Lv-GFP对照组)和含EpK的重组慢病毒(Lv-EpK组)．小鼠普食喂养,间隔采血监测血脂状态,检测血浆对氧磷酯酶(PON1)活性,病毒注射18周后小鼠安乐死,从主动脉根部连续冰冻切片及主动脉胸腹段纵剖面(en face)进行油红O染色分析斑块面积,采用实时荧光定量PCR检测小鼠肝脏相关基因的mRNA表达水平,蛋白质印迹检测血浆中apoA-Ⅰ、PON1及血清淀粉样蛋白A(SAA)水平．结果显示：慢病毒感染小鼠可成功在血循环中检测到EpK,与Lv-GFP对照组比较,Lv-EpK组apoE^-/-小鼠的血脂及脂蛋白分布、apoA-Ⅰ水平、PON1活性无明显改变,但EpK组小鼠的主动脉斑块面积较对照组显著减少(主动脉根部斑块面积(0.87±0.07) mm² vs (1.03±0.08) mm²,P < 0.05;主动脉胸腹段斑块占管腔比42.0% vs 55.8%,P < 0.01)．EpK可显著降低血中SAA水平,并抑制肝脏炎症因子TNF?琢和IL-6的表达．结果说明,EpK拟肽具有减退apoE^-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的作用,其机制可能与其发挥的抗炎作用有关．     

PES1慢病毒表达载体的构建及其对乳腺癌ZR75-30细胞生长的影响

目的:利用慢病毒载体表达PES1基因,研究其对乳腺癌ZR75-30细胞生长的影响.方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增PES1基因,克隆到pCDH载体,构建成pCDH-PES1,将其与包装载体共转293T细胞,包装成Lenti-PES1慢病毒载体并测定病毒滴度,感染乳腺癌ZR75-30细胞,Western印迹鉴定病毒载体...     

肠道菌群相关代谢物丁酸的量效和时效对人脐带间充质干细胞IL-6表达的影响CSCD

目的探究人肠道菌群相关代谢物丁酸(butyric acid,BA)对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的细胞因子分泌的影响。方法用含不同浓度丁酸(0.02、0.08、0.32、1.25和5.00 mmol/L)的培养基培养细胞24、48和72 h,采用ELISA法检测上清液中白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)表达情况,以不含丁酸的完全培养基作为对照组。结果培养24 h,中等浓度区IL-6表达增加,以浓度为1.25 mmol/L时增加最明显,低、高浓度组与对照组比较差异无统计学意义;培养48 h,低浓度组IL-6表达下降,中间浓度区的1.25 mmol/L浓度组及高浓度组表达量增加;培养72 h,低浓度区IL-6表达量下降且差异有统计学意义,中间浓度区表达增加,高浓度组呈下降趋势但差异无统计学意义。结论丁酸对hUC-MSCs的IL-6表达有量效性和时效性,因此丁酸的不同量效和时效对hUC-MSCs的生理性和病理性功能调节可能会有不同效应。     

多色荧光原位杂交对昆明山海棠和丙烯酰胺诱发微核染色体组成的研究

采用着丝粒和端粒DNA探针多色荧光原位杂交,分析了昆明山海棠和丙烯酰胺诱导的 NIH3T3细胞微核的染色体组成。结果表明,昆明山海棠和丙烯酰胺诱导的由整条染色体组成的微核分别可达70.7％和65.9％,提示昆明山海棠和丙烯酰胺均有较强的非整倍体毒性。     

小鼠着丝粒DNA探针对流式仪分选微核的染色体组成的初步研究

本文报道用作者建立的流式细胞仪红细胞微核自动检测技术,将染色体断裂剂丝裂霉素C(MMC)和非整倍体毒剂秋水仙碱(COM)诱导的大量微核分选在载玻片上,然后使用小鼠着丝粒γ-卫星DNA探针(约为234bp),对分选微核进行荧光原位杂交(FISH),以显示微核(MN)内着丝粒的情况,进而判定M N是由整条染色体还是由染色体断片组成。结果MN内着丝粒荧光阳性比例为COM50.1%,MMC 22.3%。两者相差显著,藉此方法可以准确有效地将两类毒剂区分开。 Abstract:Basis on auther’s new automatic flow cytometric technique for micronuclei,a lot micronuclei induced by clastogen Mitomycin C and aneugen colcemid were collected on slides using sorting function of flow cytometry,them the centromere Gamma satellite DNA probes of mouse (about 234bp) was used to do in situ hybridization for micronuclei,furthermore,the kinetochores of micronuclei can be showed,and the micronuclei which consist of the whole chromosomes or the chromosome fragments,can also be indicated.The results showed that 50.1% MN induced by COM and 22.3% MN induced by MMC had the positive fluorescent singles.There are significant difference between them,this means it is possible to distinglish clastogens and aneugens exactly and effectively with this method.     

动物活体成像生物发光稳定细胞株的构建

目的:构建组成型表达萤光素酶基因的载体,建立稳定高表达萤光素酶的MCF-7乳腺癌细胞株,检测其对细胞增殖的影响及在传代后的表达效果.方法:以载体pGIA.20为模板,PCR扩增萤火虫萤光素酶基因,将其克隆到载体pIRESpuro2上,将获得的pIRESpuro2-Luc经酶切和测序验证后,转染293T、MCF-7及ZR...     

2型糖尿病家系患者LEPR基因Gln223Arg多态性的研究

目的：研究黑龙江地区汉族人2型糖尿病家系的LEPR基因Gln223Arg多态性,探讨其与2型糖尿病发病的关系。方法：应用聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性（PCR-RFLP）技术,对来自于黑龙江地区120个2型糖尿病家系中的210例2型糖尿病患者及319例正常对照的LEPR基因Gln223Arg（668 A→G）位点进行基因分型。结果：LEPR基因Gln223Arg三种基因型在病例组和对照组间整体分布有统计学意义（P=0.034,df=2）;除AG基因型（x2=4.550,P〈0.01）外,其余各基因型及等位基因在病例组和对照组间分布未见显著性差异（P〉0.05）。结论：LEPR基因Gln223Arg多态性与黑龙江地区汉族人2型糖尿病有关,LEPR基因可能为中国人2型糖尿病发病的相关易感基因。     

食品毒理学实验教学改革与思考

食品安全日益严峻的现实给食品毒理学实验教学提出了新的挑战和要求.为进一步适应社会和学科发展需要,提高食品毒理学的实验教学效果,笔者根据课程的特点以及在实际教学中所发现的相关问题,对食品毒理学实验课程改革进行了思考,并且提出了提高实验教学质量的一些方法和措施.     

肠道细菌相关代谢产物脱氧胆酸的 量效和时效对秀丽隐杆线虫生长发育的影响

目的观察脱氧胆酸对线虫生存和生长发育的影响,了解脱氧胆酸的作用。方法实验对象分为对照组和实验组,其中实验组分为低浓度组、中浓度组和高浓度组。将L1期线虫放于实验组中培养48 h后观察不同浓度的脱氧胆酸对线虫生长的影响,在D0期(幼年成虫期)、D4期(线虫成年后第4天)、D6期(线虫成年后第6天)观察不同浓度的脱氧胆酸对线虫运动能力、抗感染能力、寿命和生殖能力的影响。结果不同浓度的脱氧胆酸对线虫生长的影响未见明显差异。在不同时间、不同浓度脱氧胆酸的作用下,线虫运动能力随着剂量的增加和时间的延长而降低,中高浓度脱氧胆酸可缩短线虫的寿命和降低抗感染能力,并呈剂量依赖性。高浓度的脱氧胆酸可以减少线虫的子代及缩短线虫的产卵时间。结论脱氧胆酸不影响线虫的生长。大剂量的脱氧胆酸对线虫可能存在量效和时效的生殖毒性作用和慢性毒性作用,缩短线虫的寿命,降低线虫的运动及抗感染能力,其作用机制仍需进一步研究。     

八段锦联合心脏运动康复对急性心肌梗死急诊PCI术后患者心功能、运动耐力和生活质量的影响

摘要 目的：观察八段锦联合心脏运动康复对急性心肌梗死（AMI）急诊经皮冠状动脉介入术（PCI）后患者心功能、运动耐力和生活质量的影响。方法：选择2019年6月~2021年6月期间我院收治的AMI急诊PCI术后患者100例,根据随机数字表法分为对照组（心脏运动康复干预,50例）和观察组（八段锦联合心脏运动康复干预,50例）,观察两组患者心功能、运动耐力及生活质量改善情况,对比两组心脏不良事件发生率。结果：干预后,两组左心室射血分数（LVEF）较干预前升高,且观察组高于对照组（P<0.05）。干预后,两组左室舒张末期内径（LVDD）、左室收缩末期内径（LVDS）、B型脑利钠肽（BNP）较干预前下降,且观察组低于对照组（P<0.05）。干预后,两组运动持续时间（ED）、峰值摄氧量（VO₂peak）及无氧阈值（AT）较干预前升高,且观察组高于对照组（P<0.05）。干预后,两组健康调查简表（SF-36）各维度评分较干预前升高,且观察组高于对照组（P<0.05）。观察组的心脏不良事件发生率低于对照组（P<0.05）。结论：八段锦联合心脏运动康复用于AMI急诊PCI患者的术后干预中,可促进心功能恢复,改善患者的运动耐力及生活质量,同时还可降低心脏不良事件发生率。