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81.
人源性抗HBsAg Fab抗体的发酵生产研究 总被引:3,自引:0,他引:3
为了适应工业生产的需要,利用fed—batch方法,重组人源性抗HBsAg Fab抗体酵母工程菌在30L发酵罐中进行了高密度发酵,发酵最适温度30℃,pH值范围5.0~5.3,溶氧范围20%~30%。发酵液OD600值达到300时开始诱导,甲醇最佳诱导浓度为10mL/L。重组人源性抗HBsAg Fab抗体经离子交换层析纯化,纯化产品经SDS-PAGE、Western blot进行分析和ELISA方法进行活性测定。结果显示,重组Fab抗体在Fed-batch发酵系统中可高效表达,经过192h的发酵生产,重组人源性抗HBsAg Fab抗体的表达量可达412mg/L。发酵上清经过离子交换层析纯化,获得纯度为95%的重组Fab抗体,该Fab抗体经ELISA分析具有较高的HBsAg抗原亲和力和特异性。结果证实可以通过高密度发酵毕赤酵母工程菌来高效生产重组人源性抗HBsAg Fab抗体,为后续的工业化生产应用奠定了基础。 相似文献
82.
83.
人白细胞介素12(hIL\|12)基因在杆状病毒表达载体系统中的表达 总被引:2,自引:1,他引:1
人白细胞介素12(hIL-12)是细胞介导免疫发生的关键调节因子,也是目前发现的唯一的异源二聚体细胞因子,由P35和P40两个亚基经二硫键连接而成.利用DNA重组技术,分别构建了含hIL-12p35基因和p40基因的重组转移载体质粒pAcAB3-p35和pAcAB3-p40.将两个重组转移载体分别与致死缺陷型线性化苜蓿丫纹液蛾核型多角体病毒(AcNPVBaculoGold LinearizedBaculovirus)基因DNA共转染昆虫细胞,构建出遗传稳定的重组病毒AcNPV-OCC-hIL-12(p35)与AcNPV-OCC——hIL-12(p40).将两种病毒分别感染Sf9细胞,取细胞培养物上清和细胞裂解物上清进行SDS-PAGE和Western blot检测,结果显示hIL-12p35和p40两基因均在昆虫细胞中获得表达,且能分泌至胞外.表达产物具有免疫原性. 相似文献
84.
85.
人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达 总被引:5,自引:0,他引:5
本文以黑曲霉(Aspergillus niger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列,换用在毕赤酵母(Pichia pastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因(PhyA-as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDSPAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌,其中SPANⅢ菌株达到了在摇床培养条件下,每毫升发酵液产生165000u植酸酶的水平,基本满足工业化生产的要求。 相似文献
86.
目的:探讨经多西紫杉醇修饰的人工晶体对眼组织相容性的影响。方法:按照随机数字表法将32 只日本大耳兔分为两组:
实验组通过手术植入表面经多西紫杉醇修饰处理后的疏水性人工晶体,对照组植入疏水性人工晶体。比较两组人工晶体亲水角、
术后24 小时光耀斑块计数以及人工晶体周围组织炎症浸润数。结果:实验组的亲水角小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
实验组光耀斑块计数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组家兔人工晶体周围组织炎症浸润计数低于对照组,差异有
统计学意义(P<0.05)。结论:人工晶体表面经多西紫杉醇修饰后,其亲水性、与眼组织的组织相容性增加,且可缓解光耀斑炎症感
染和降低并发症的发生,有重要的临床参考价值。 相似文献
87.
88.
NaCl对大麦幼苗根系蛋白质和游离氨基酸含量的影响 总被引:16,自引:0,他引:16
大麦幼苗在200mmol/LNaCl处理6d过程中,根中蛋白水麦活性下降,可溶性蛋白含量在处理1、2、4d下降,6d时有所提高。多数游离氨基酸相对含量及其总量呈上升势,胁迫1、2、6d时,总量较对照分别上升64.20%、56.69%和1.69%,其中Pro、Glu、Ala和Thr较为突出,盐胁迫下根系质膜和液泡膜结合慢白含量上升。可溶性蛋经SDS-PAGE电泳和扫描分析,在盐胁迫1、2、6d中25 相似文献
89.
花卉根部植物线虫调查 总被引:3,自引:0,他引:3
从龙岩市24种常见花卉根际土壤中鉴定出滑刃线虫属,真滑刃线虫属,螺旋线虫属,拟鞘线虫属,根结线虫属,针线虫属,盘旋线虫属,矮化线虫属,垫刃线虫属和剑线虫属共10属植物寄生线虫,调查结果表明,木本花卉和多年生草本花卉根部线虫群体结构比较复杂,虫口密度较高。 相似文献
90.