紫花苜蓿白粉病病原菌鉴定及其生物学特性

【背景】白粉病是影响苜蓿产量和品质的主要真菌病害之一,引起紫花苜蓿白粉病的病原有3种：蓼白粉菌(Erysiphe polygoni DC.)、豆科内丝白粉菌(Leveillula leguminosarum Golov.)和豌豆白粉菌(Erysiphe pisi DC.)。【目的】系统研究紫花苜蓿白粉病病原菌的生物学特性,以及分生孢子和闭囊壳的形态特征,明确宁夏地区紫花苜蓿白粉病病原种类。【方法】采用室内盆栽法调查病害发生和闭囊壳形成条件,利用气象站自动获取数据,采用光学显微镜观察病原菌特征,采用水琼脂玻片法观察病原菌分生孢子萌发特性。【结果】紫花苜蓿白粉病发生的温度范围为20?24 °C,湿度范围为40%?60%,形成闭囊壳的条件为温度20?25 °C、湿度70%左右,闭囊壳的形成大约需要42 d。分生孢子以向基式的产孢方式在分生孢子梗上产孢,成熟的分生孢子卵圆形或椭圆形,大小为(29?46)×(12.5?21.0) μm。闭囊壳黑褐色,球形或近球形,直径71?135 μm,具有大量附属丝,少数为不规则分枝1?2次。闭囊壳内含有4?6个子囊,子囊倒棒型或卵圆形,具柄,大小为(58?90)×(29?60) μm。子囊内含有4?6个子囊孢子,子囊孢子单孢,卵圆形或椭圆形,大小为(21?34)×(10.5?20.0) μm。分生孢子萌发的最适温度范围为22?26 °C,最适pH为6.5,光照促进分生孢子的萌发。葡萄糖、D-木糖和甘露醇促进分生孢子萌发和芽管生长,半胱氨酸促进分生孢子萌发,甘氨酸促进芽管生长。【结论】宁夏地区紫花苜蓿白粉病的病原菌确定为蓼白粉菌(Erysiphe polygoni DC.)。     

台湾青枣在福建主产区的气候适宜度

台湾青枣属新兴果树品种,经济效益显著。为实现台湾青枣在福建的优质高产,本研究基于产量和气象数据,结合文献和物候观测资料以及农业气候适宜度模型,给出了台湾青枣在福建主产区的气候适宜度模型参数,分析了主产区气候适宜度特征及其变化趋势。结果表明: 基于等权重求和法构建的模型可靠性最高;台湾青枣在福建主产区的气候适宜度较高,多数年份为适宜或较适宜;1996—2013年,气候条件对台湾青枣生长的影响总体呈趋好态势,有利于发展青枣生产;主产区全生育期温度适宜度＞综合气候适宜度＞日照适宜度＞降水适宜度,9—10月是水分管理的关键期。研究结果对福建省台湾青枣的生产管理和长期规划具有指导意义。     

喘息性支气管炎患儿外周血CD4+CD25+CD127low 调节性T细胞及淋巴细胞亚群的改变与临床意义

目的探讨喘息性支气管炎患儿外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞及淋巴细胞亚群数量变化与临床意义。方法选取我院16例喘息性支气管炎患儿、同期住院的25例支气管肺炎患儿和18例患有肾结石等非感染性疾病患儿为研究对象,采用流式细胞术分别检测3组患儿外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞及淋巴细胞亚群百分比。结果喘息性支气管炎患儿外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low)/CD4~+(Treg)比例(9.2%±2.1%)高于支气管肺炎组(6.9%±1.4%)和对照组(5.8%±2.2%),差异有统计学意义(F=16.5、17.7,均P0.01)。喘息性支气管炎患儿CD8~+百分比(19.7%±7.8%)低于支气管肺炎组(27.0%±8.8%)和对照组(30.7%±4.4%),差异有统计学意义(F=6.6、22.4,均P0.01)。喘息性支气管炎患儿B淋巴细胞百分比(33.4%±15.2%)高于支气管肺炎组(22.7%±6.9%)和对照组(17.7%±9.9%),差异有统计学意义(F=9.2、10.9,均P0.01)。结论喘息性支气管炎患儿外周血淋巴细胞亚群比例异常,体内存在免疫功能紊乱,CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞可能参与喘息性支气管炎的发生发展。     

微流水培养条件下斑鳜仔鱼的摄食与生长

在孵化环道连续微流水培养、水温(24±2)℃条件下,斑鳜(Siniperca scherzeri Steindachner)初孵仔鱼全长为(4.87±0.10)mm(n=50),卵黄囊体积为(1.461±0.172)mm3(n=50),油球直径为(0.47±0.04)mm(n=50).仔鱼孵出12h,胸鳍增大,具有一定阵发性水平游动能力,1日龄巡游模式建立;2日龄口膜消失,开始主动摄食,进入混合营养期,3 日龄外源性摄食关系完全建立.5日龄仔鱼的卵黄和油球全部消失.进入外源营养期;15日龄全长达到(13.72±0.76)mm(n=12).仔鱼发育过程中,其全长生长存在内源性营养阶段的较快速生长,混合营养阶段的慢速生长以及外源性营养阶段的快速生长三个生长期相,平均增长率为0.59 mm/d,对仔鱼全长TL(mm)与日龄D(d)进行同归,其生长模型为:TL=-0.0004D3+0.0283D2+0.2159D + 4.9335(R2=0.985,n=261).2-15 日龄,口宽与全长呈正比关系.仔鱼从初孵到PNR仅为5-6d,具有摄食能力的时间4d,仔鱼依赖外源性营养开始时间较早,对饥饿的耐受力较差.     

采用基因组测序技术进行胚胎种植前遗传学筛查的方法学研究及应用

目的采用第三代测序技术(NGS),对辅助生殖种植前的胚胎进行染色体非整倍性筛查,以提高移植胚胎的质量和试管婴儿的成功率。方法首先采用接受试管婴儿技术治疗不孕症的夫妇多余的正常囊胚进行方法学研究。采用多重置换扩增法扩增细胞基因组DNA。在此基础上对一对不孕症夫妇的囊胚进行检测,并指导囊胚选择。结果正常囊胚DNA抽提后,琼脂糖凝胶电泳显示扩增的DNA产物质量符合要求。文库构建后进行测序,数据结果显示为正常样本。在成功建立方法的基础上,选择的囊胚发育良好,成功孕育健康胎儿并导致健康婴儿出生。结论 NGS是一个可靠的胚胎染色体非整倍性筛查技术。该方法具有通量高、可自动化等优点,可以提高异常染色体的诊断水平。     

羟乙基淀粉沉淀(HES)法分离脐血造血干细胞的临床优势分析

目的:探讨羟乙基淀粉沉淀(HES)法分离脐血单个核细胞(MNCs)的效果。方法:采集脐血31份,应用羟乙基淀粉(HES)沉淀飞和密度离心(Ficoll)法分离脐血MNCs,、纯化CD3+细胞、CD14+细胞、CD34+细胞,以台盼蓝拒染法检测细胞活力。结果:HES法MNCs回收率、CFU-GM计数高于Ficoll法(85.29±3.79 VS 47.06±4.61,t=35.67,P0.05;67.31±11.57/l×105MNCs VS28.54±6.39/l×105MNCs,t=16.33,P0.05);HES法分离的MNCs中CD3+、CD14+、CD34+细胞数均高于Ficoll法(t=5.76,t=2.51,t=6.67,P0.05)。结论:HES法分离MNCs可获得较好的回收率,是人脐血干细胞理想的分离方法。     

ANO1对口腔鳞癌SCC-25细胞株的影响

采用免疫组化检测160例口腔鳞癌组织及相应正常组织的ANO1表达,并进行多项体外买验,以明确ANO1对SCC-25细胞迁移的影响。结果显示,正常组织中的ANO1阳性表达明显低于口腔鳞癌组织;有淋巴结转移的口腔鳞癌组织的ANO1阳性表达显著高于无转移的口腔鳞癌组织;多项体外实验表明,ANO1过表达有利于SCC-25细胞的迁移;尼氟灭酸能减缓细胞的迁移速度。综上所述,ANO1促进了口腔鳞癌患者体内的肿瘤转移,并增加了SCC-25细胞的体外移动、侵袭、伸展、剥脱能力,有望成为治疗口腔鳞癌的新的靶点。     

热休克蛋白70（HSP70）对HBV复制及抗原分泌的影响

目的了解慢性乙型肝炎患者（CHB）血清中热休克蛋白70（HSP70）与HBV—DNA的关系,并探讨HSP70能否影响乙型肝炎病毒（HBV）的复制与抗原分泌。方法选择安徽医科大学第二附属医院住院和门诊CHB患者60例为研究对象,并以30例健康体检人群为对照者,采用酶联免疫技术（ELISA）分析CHB患者和对照者血清HSP70表达水平,运用荧光定量PCR技术分析CHB患者血清HBV—DNA复制水平;以RNA干扰（RNAi）技术抑制HepG2．2．15细胞中HSP70基因的表达,同时分析细胞培养上清中HBVDNA以及相关抗原的表达情况。结果CHB患者血清中HSP70的表达水平明显高于其在健康对照者血清中的表达水平（P〈0．05）,且与HBV—DNA拷贝数呈正相关性（r=0．540,P〈0．05）;其中HBeAg阳性的CHB患者血清中HSPT0的表达水平也显著高于HBeAg阴性CHB患者血清中的表达水平（P〈0．05）。以RNAi技术特异性降低HSP70在HepG2．2．15细胞中的表达,HepG2．2．15细胞培养上清中HBV—DNA和相关抗原的分泌量明显降低（P〈0．05）。结论HSP70蛋白很可能在HBV的生命周期中发挥重要作用,从而影响HBV的复制和乙型肝炎的进展。     

珊瑚Acropora pulchra (brook)的化学成分研究

首次对来自中国北海涠洲岛的珊瑚Acropora pulchra(brook)的化学成分进行研究,从乙醇浸提液的乙酸乙酯部分分离鉴定出7个化合物,并确立结构为十五酸十七酯(I)、正十六碳醇(Ⅱ)、鲨肝醇(Ⅲ)、1-正十六酸甘油酯(Ⅳ)、N—l—羟基甲基-2-羟基-(E,E)-3,7-十七碳二烯基十六酸酰胺(V)、胸腺嘧啶(Ⅵ)、尿嘧啶(Ⅶ)。     

斜纹夜蛾核多角体病毒抑制苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒诱导的斜纹夜蛾细胞凋亡

野生型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus, AcMNPV)感染斜纹夜蛾(Spodoptera litura)细胞系Sl-zsu-1,可引起典型的细胞凋亡;但可以在草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞Sf-9中复制并形成多角体.比较了AcMNPV p35基因在病毒感染两种细胞的复制和转录情况,认为p35在非受纳细胞中及时有效的表达能阻止细胞发生凋亡;共感染实验结果表明,斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus, SpltMNPV)可以抑制AcMNPV诱导的细胞凋亡并可帮助病毒进行复制,推测SpltMNPV基因组中与p35同源的p49基因挽救了细胞的自杀行为.