超低温保存的梅花花药萌发率和授粉后的结实能力

试验比较梅花花粉和花药超低温保存后的花粉萌发率、授粉结实率和座果率的结果表明:(1)超低温保存花药用室温、自来水冲洗和温水浴3种方法化冻后的花粉萌发率差异不显著。(2)花药超低温保存1h后的花粉萌发率与新鲜花粉差异不显著。(3)超低温保存1个月和1年的花粉和花药都有授粉结实能力。     

我国种质资源超低温保存现状的文献计量学研究

超低温保存在保护动植物种质资源的多样性和安全性上发挥着重要的作用。采用中文期刊文献计量学方法研究我国近年超低温保存现状, 着重分析文献的所属学科、各年度发表论文数、基金类别、论文作者、论文机构单位、下载和引用情况、发表期刊名称等数据。结果表明, 2006-2014 年间国内各类期刊发表超低温保存相关的学术论文超过200篇; 超低温保存研究分布于众多学科中, 其中以园艺学科为甚, 其次为农作物、水产和渔业等学科。相关论文的资助项目包括国家自然科学基金、国家科技支撑计划、国家高技术研究发展计划(863 计划)等。开展相关研究的主要单位为各地高校及研究所, 如北京林业大学、河南大学、华中农业大学, 等。相关研究报道有较高的下载次数(981 次)和引用次数(43次); 报道相关内容较多的期刊包括植物生理学通讯、安徽农业科学、园艺学报, 等。结果可以大致反映出我国超低温保存研究的现状与发展趋势, 为相关领域工作的科研者、管理者和情报者提供有意义的参考依据。     

小酸浆(Physalis minima L.)茎尖的玻璃化法超低温保存

用玻璃化法超低温保存小酸浆茎尖的结果表明,1 cm的小酸浆茎段放在改良MS培养基上室温预培养3 d后.切取2mm长的茎尖放在0℃条件下用100%PVS2溶液中处理70min.快速投入液氮保存,1 d后取出.于40℃恒温水浴中化冻2～3min后用含1.2mol·L-1蔗糖的改良MS培养液洗涤30min,接种于再生培养基上暗培养7d再转接至正常光照35μmol·m-2·s-1条件下,成活率可达36.0%,再生植株生长正常.     

桃花粉低温和超低温保存方法比较研究

桃(Prunus persica(L.)Batsch)是我国重要的无性繁殖作物种质资源,目前主要保存于3个国家无性繁殖作物种质圃。随着以茎尖、花粉、休眠芽为保存载体的超低温保存技术的发展,超低温保存已成为无性繁殖作物重要备份保存方式。本研究以15份桃种质花粉为研究对象,开展含水量、回湿处理和保存温度(4℃低温保存和液氮超低温保存)对保存后花粉离体萌发率的影响研究。研究结果:明确了桃种质花粉超低温保存的含水量;揭示了回湿处理对部分桃种质花粉超低温保存产生显著影响;超低温保存后花粉离体萌发率最高可达83%;4℃低温保存和超低温保存比较研究结果表明,超低温保存4年后14份桃种质花粉离体萌发率仍可保持30%以上,11份桃种质花粉离体萌发率与保存前花粉离体萌发率相比无显著变化甚至显著提高,而4℃低温保存的花粉离体萌发率降至0。该研究为国家种质库建立花粉规模化超低温保存提供技术支撑。     

植物样品包埋脱水法超低温活体保存的研究进展

包埋脱水法是植物材料超低温保存的新技术,从1990年至今,已有30多篇文献报道。本文介绍了包埋脱水法的研究历史、技术要点和主要优点。     

胡萝卜与烟草原生质体的低温保存

在较长的时间内,可保持正常生理状态与细胞活性的原生质体的制备及保存技术是进行空间细胞融合实验的前提条件。本研究以0.7ml/L的葡萄糖作渗透压,在6-8℃低温条件下经过72小时保存后,供试原生质体的存活率仍可达81%,并保持了其长壁与分裂的特性。 Abstract:Storage duration and acativity of isolated protoplasts are important problem for experiment on plant cell fusion in space.We have achieved preliminary success using glucose as osmotic reagent,The survival protopasts after 72 hour storage in 0.7mol/L glucose at 6~8℃ reached 81% and maintained a very high activity of division.     

仙客来愈伤组织的超低温保存

为了避免连续继代造成仙客来愈伤组织的变异, 对仙客来愈伤组织进行了超低温冷冻保存研究。以继代后处于对数生长期的愈伤组织为实验材料, 首先在含有不同蔗糖浓度的培养基上预培养不同时间, 转至不同的冰冻保护剂中直接液氮冷冻或-20oC预冷冻2 h, 然后液氮超冷冻保存, 37oC水浴迅速解冻, 并用相应蔗糖浓度的液体培养基洗涤, 以中性红染色测定细胞的存活率, SPSS13.0软件进行统计学分析。结果表明: 预培养基中蔗糖浓度、预培养时间、降温方式、冷冻保护剂等对解冻后材料相对存活率存在不同程度的影响, 筛选出4%蔗糖浓度预培养3 d、9号保护剂、0oC停留30 min后直接冷冻为超低温保存的最佳方案, 通过简单的方法获得了较好的愈伤组织保存效果。     

仙客来愈伤组织的超低温保存

为了避免连续继代造成仙客来愈伤组织的变异, 对仙客来愈伤组织进行了超低温冷冻保存研究。以继代后处于对数生长期的愈伤组织为实验材料, 首先在含有不同蔗糖浓度的培养基上预培养不同时间, 转至不同的冰冻保护剂中直接液氮冷冻或-20oC预冷冻2 h, 然后液氮超冷冻保存, 37oC水浴迅速解冻, 并用相应蔗糖浓度的液体培养基洗涤, 以中性红染色测定细胞的存活率, SPSS13.0软件进行统计学分析。结果表明: 预培养基中蔗糖浓度、预培养时间、降温方式、冷冻保护剂等对解冻后材料相对存活率存在不同程度的影响, 筛选出4%蔗糖浓度预培养3 d、9号保护剂、0oC停留30 min后直接冷冻为超低温保存的最佳方案, 通过简单的方法获得了较好的愈伤组织保存效果。     

抗冻蛋白在超低温保存中作用机制的新模型

在超低温保存(cryopreservation,-80℃—-196℃)中,抗冻蛋白(antifreeze porteins,AFPs)对细胞存活率和热力学特性的影响十分复杂。在一些实验条件下,抗冻蛋白表现出保护活性;在另一些实验条件下,它却表现出毒害性。换句话说,它既能阻遏冰晶生长,又能促使成冰核效应(ice nucle-ation effect)发生。在总结最新实验结果的基础上,结合抗冻蛋白进化和结构生物学方面的新进展,我们提出了一个新模型,该模型对抗冻蛋白功能的两面性作了较好的诠释。     

衣藻细胞玻璃化超低温保存技术的研究

本研究以衣藻为材料,探讨其玻璃化超低温保存的条件和方法,结果表明,衣藻经含0.25mol/L蔗糖溶液的TAP培养基预培养一天后,在玻璃化冷冻保护剂中脱水5分钟,直接投稿液氮,48小时后快速化冻,去保护剂并用含0.5mol/L蔗糖溶液的TAP培养基境培养一天,再转到ATP培养基暗培养一天,最后置光照条件下恢复培养,其存活率可达31.45％,恢复培养后衣藻细胞的生长规律与未冻存的衣藻相一致。