酵母tRNAAla中修饰核苷酸T54,Ψ55的生物功能

酵母tRNA^Ala的3′半分子与一个11聚的DNA片段(5′GGAATCGAACC3′)杂交后用RNase H酶解,该酶能在Ψ₅₅的3′侧定点剪切,这样就制备得片段C₃₆-Ψ₅₅该片段经1～2个高碘酸氧化和β-消去得片段C₃₆-T₅₄和C₃₆-G₅₃机器合成了3个酵母tRNA^Ala的片段,分别j是片段C₅₆-A₇₆,U₅₅-A₇₆(以U替代Ψ₅₅)和U₅₄-A₇₆(以UU替代T₅₄Ψ₅₅).合成和制备的片段以适当的组合用T₄RNA连接酶连接,产物是酵母tRNAtRNA^Ala的3′半分子或其类似物.3种3′半分子或其类似物分别与天然5′半分子连接得重组天然酵母tRNA^Ala(tRNAr)和2个酵母tRNA^Ala的类似物:(1)tRNAa(以U替代Ψ₅₅),(2)tRNAb(以UU替代T₅₄Ψ₅₅).体外测定了它们的丙氨酸接受活力和参入活力,发现酵母tRNA^Ala的类似物tRNAa和tRNAb与天然重组酵母tRNA^Ala相比,它们的氨基酸接受活力分别降低了25%和55%,参入活力分别降低了35%和30%.说明酵母tRNA^Ala中的修饰核苷酸T₅₄和Ψ₅₅对该tRNA的功能有重要的影响.     

重组点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶的性质

以特异性底物和多态的对大肠杆菌表达的重组点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶（简称ａｐＰＥＰ）催化性质的研究表明,ａｐＰＥＰ在４～３２℃比较稳定,最适催化温度为３４℃;在ｐＨ６～１０比较稳定,最适ｐＨ为８．４;ａｐＰＥＰ的比活力为６７．６ｕ／ｍｇ。对Ｚ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－βＮＡ底物的酶解常数Ｋｍ为０．０３ｍｍｏｌ／Ｌ。一些蛋白酶抑制剂和金属离子的抑制作用结果表明,ａｐＰＥＰ不受ＰＭＳＦ、ＴＬＣＫ、ＴＰＣＫ、胰     

应当重视RNA的研究

生命现象是一个十分复杂的过程。它需要许多生物大分子(如核酸、蛋白质、脂类和多糖)、小分子有机化合物以及无机盐类等的协同作用。Crick用他修改过的中心法则高度概括了生命现象的根本规律。中心法则不仅指出了遗传信息的流向并且认为DNA、RNA和蛋白质是生命规律的核心。DNA储存遗传信息并决定物种的遗传和变异。RNA不仅可以储存遗传信息并在遗传信息的表达过程中表现功能。蛋白质表现遗传性状。由此可见DNA、RNA和蛋白质都是非常重要。要深入了解生命规律必须全面研究三者的结构与功能以及它们之间的相互关系。任何偏废都是有害的。近年来发现RNA还具有酶的催化功能。这就从根本上改变了所有的酶都是蛋白质的传     

兴奋黑质对中缝大核神经元的抑制作用及其机制

本工作观察到在清醒、麻痹大鼠,电刺激黑质致密部(SN_C)或网状部(SN_R)均明显抑制中缝大核(NRM)神经元的自发放电;电针刺激双侧“足三里-三阴交”的同时,电刺激SN_C或SN_R可完全翻转电针对NRM神经元的兴奋效应,NRM神经元放电受抑制。将谷氨酸钠微量注入黑质,对中缝大核神经元亦具有抑制作用,电解损毁双侧中脑导水管周围灰质(PAG)腹外侧部或将多巴胺受体阻断剂氟哌啶醇注入该处,均可阻断此抑制效应。提示黑质对抗电针镇痛机制之一是通过其DA能投射纤维作用于PAG内的DA受体,进而抑制PAG-NRM系统而实现的。     

肺炎克氏杆菌(Klebsiellapneumoniae)中的二种不寻常核苷酸的酶促合成和鉴定

我们用肺炎克氏杆菌的粗酶制剂研究了腺苷多磷酸化合物的酶促合成。在用30～50%饱和度硫酸铵沉淀蛋白进行的反应中,发现了二个化合物。经鉴定证明这二个化合物分别是A~5′ppp~5′A和A~5′pppp~5′A。本文还报道了一种制备α-~(32)P标记核苷酸的方法。     

两株中和性抗hTNFa单抗可变区与hTNFa相互作用的计算机模拟及实验研究

在ＳＧＩ图形工作站上，用同源蛋白结构预测的方法，建立了２－株中和性抗ｈＴＮＦα小鼠单抗（１Ｃ３Ｅ６，３Ｆ６Ａ１０）可变区的三结构模型，并在实验研究２株单抗表位表异性的基础上，根据２株单抗与ｈＴＮＦα分子表面的形状、静电性、疏水性、氢键等性质，对２株单抗可变区与ｈＴＮＦα分子的可能结合模式进行了模拟和分析，再根据结合模型，设计并制备了２个ｈＴＮＦα突变体，然后从实验与计算机模拟两方面着手，对比研究了     

核糖核酸结构的研究 Ⅰ.小型两向电泳层析方法

进行核糖核酸結构的研究,除需要特异性強的核酸酶外,还必須具备分离酶解产物的良好方法。关于RNA~(**)酶解产物的分离,前人曾經使用过Dowex-1、ECTEOLA、DEAE、DEAE-Sephadex等阴离子交换剂进行柱层析,并取得不少成果,柱层析法虽有其优点,但时間长,工作量大,耗样品量多,且分离效果也不十分滿意,例如,A_pC_p、     

1-甲基次黄苷抗体的制备、鉴定及其在酵母丙氨酸转移核糖核酸研究中的应用

本文制备了m~1I~*专一性抗体。经过双向琼脂扩散实验,微量免疫沉淀抑制实验,半抗原结合抑制实验及亲和层析实验证明:抗体可以特异性地与m~1I相结合。可以和含有该核苷的tRNA_y~(ala)的反密码环部位结合。这种结合并不影响tRNA_y~(ala)t与鼠肝氨酰基-RNA合成酶相互识别。似乎从较为直接的意义上说明:反密码环部位不参与tRNA_y~(ala)分子与相应的鼠肝氨酰基-tRNA合成酶的识别。文中强调了用于核酸大分子研究的核酸类物质抗体,必须去除核酸酶的污染。用固相化的m~1I抗体进行亲和层析,可能是一种纯化tRNA_y~(ala)的有用手段。     

核糖核酸结构的研究 Ⅱ.絲腺与酵母核糖核酸的结构比较

目前认为蛋白貭生物合成的密碼主要决定于核酸的一級結构(即其核苷酸的排列順序),DNA~(**)的一級結构决定RNA的一級結构,后者再决定蛋白貭的一級結构,因此核酸結构的研究(以下均指一級結构),就成为一个很重要的課題。关于RNA結构的研究,继Markham和Smith及Volkin和Cohn之后,目前已有不少报告,如在Rushizky