拟草果总黄酮制备纯化及抗炎活性研究

该文在前期研究的基础上,以拟草果的甲醇粗提液为原料,研究了拟草果总黄酮成分的纯化方法以及考察拟草果总黄酮的抗炎活性。结果表明:采用静态吸附-洗脱试验筛选HP-20为纯化拟草果总黄酮的最佳大孔吸附树脂; 以吸附率、解吸率等参数为指标,考察上样液和洗脱液的质量浓度、体积、流速等因素对纯化工艺的影响,确定最佳工艺条件:上样液质量浓度为0.5 mg·mL^-1、上样体积流量为4 mL·min^-1、上样体积为15 BV、洗脱剂乙醇浓度为70%、洗脱流速为2 mL·min^-1、洗脱剂用量为10 BV,在此条件下纯化的总黄酮保留率为65.48%; 通过检测获得的拟草果总黄酮对脂多糖刺激的小胶质BV2细胞中白介素(IL)-6水平的影响发现,其可显著下调炎症因子IL-6的表达,具有一定的抗炎活性。     

气管哮喘患者血清趋化因子CXCL12水平的表达及其与炎症因子和肺功能的相关性研究

摘要 目的：探讨支气管哮喘患者血清趋化因子CXCL12水平与炎症因子和肺功能的关系。方法：选择2017年10月至2019年10月我院收治的支气管哮喘患者共106例,其中急性发作期67例（急性发作组）、慢性持续期39例（慢性持续组）,另选择50例体检的健康志愿者为对照组,均进行血清CXCL12检测,分析CXCL12与炎症因子、肺功能、嗜酸性粒细胞（EOS）、免疫球蛋白E（IgE）、呼出气一氧化氮（FeNo）的相关性。结果：急性发作期组血清CXCL12、白介素-4（IL-4）、白介素-17A（IL-17A）、白介素-13（IL-13）、EOS、IgE、FeNO水平高于慢性持续期组和对照组（P＜0.05）,慢性持续期组血清CXCL12、IL-4、IL-17A、IL-13、EOS、IgE、FeNO水平高于对照组（P＜0.05）;急性发作期组第1秒用力呼气容积（FEV1）、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值（FEV1/FVC）、第1秒用力呼气容积占预计值百分数(FEV₁ %pred)低于慢性持续期组和对照组（P＜0.05）,慢性持续期组FEV FEV₁、FEV FEV₁/FVC、FEV FEV₁%pred低于对照组（P＜0.05）。多元线性回归分析结果显示血清CXCL12与支气管哮喘患者FEV FEV₁、FEV FEV₁/FVC呈负相关（P＜0.05）,与EOS、IgE、IL-4、IL-17A、IL-13呈正相关（P＜0.05）。结论：CXCL12在支气管哮喘进程中可能发挥促炎作用,血清CXCL12水平可反映患者病情严重程度和肺通气功能。     

人ACE2转基因小鼠对SARS-CoV的易感性

目的建立敏感的SARS小动物模型。方法通过显微注射技术,将编码SARS-CoV细胞受体的人血管紧张素转换酶(hACE2)基因导入小鼠的基因组中制备了hACE2转基因小鼠,在小鼠ACE2(mACE2)启动子的调控下,hACE2蛋白在转基因小鼠的肺脏、心脏、肾脏和小肠表达。我们观察了野生型和转基因小鼠在SARS冠状病毒接种后病原学和病理学方面的反应。结果在接种后第3天和第7天,病毒能够更有效地在转基因小鼠的肺脏复制,而且转基因小鼠出现更严重的肺损伤。肺组织的损伤包括肺间质充血、出血,单核细胞、淋巴细胞浸润及血浆蛋白的渗出,肺泡上皮细胞增生、脱落,此外,在转基因小鼠的某些器官还发现了血管炎、变性和坏死等病理变化。在转基因小鼠的肺上皮细胞、血管内皮细胞和脑神经细胞检测到病毒抗原。结论转基因小鼠比野生型小鼠对SARS病毒更易感,而且表现出更接近SARS患者的病理变化。     

东方蜜蜂微孢子虫的基因结构优化及新基因鉴定

东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae是一种寄生于蜜蜂中肠上皮细胞的单细胞真菌,对蜜蜂的健康危害严重,给世界各国的养蜂业造成较大损失。本研究基于前期获得的N.ceranae孢子的转录组数据对其已注释基因进行结构优化,并对未注释基因进行预测和分析。通过将测序得到的clean reads比对参考基因组和转录本重构,共对10个N.ceranae的已注释基因的5'端或3'端进行了延长。利用Cuffcompare软件将重构转录本与参考基因组进行比对,共鉴定出27个新基因,随机挑选9个新基因进行RT-PCR验证,均能扩增出符合预期的目的片段,表明预测出的新基因真实存在。有6个新基因能够注释到GO数据库和6个基因注释到KEGG数据库。进一步分析结果显示上述新基因注释到细胞等10个GO条目上,它们可能在N.ceranae的生命活动中具有重要功能。研究结果为N.ceranae的基因结构和功能注释信息的完善提供了有益补充,也为新基因的功能研究打下了基础。     

万古霉素- 脂质体对兔股骨头置换感染模型预防作用的实验研究

目的:制备万古霉素脂质体抗生素缓释系统,研究该缓释系统在治疗兔人工股骨头置换术后感染中的作用,为临床的进一步应用提供理论基础和实验依据。方法 :建立兔人工股骨头置换术后感染模型,将配置好的万古霉素-脂质体药物释放系统、万骨霉素于术中即分别放入关节腔及髓腔内,同时设对照组。大体观察左侧髋关节及观察右髋关节的活动度。实验动物于人工股骨头置换术后即刻、第4、8周,分别行髋关节X线摄片检查。实验动物建立感染模型6周后,分别取关节腔内肉芽组织或假膜组织,观察细菌生长情况,计数细菌菌落。并用4%的甲醛溶液固定组织,石蜡包埋(骨组织先用EDTA脱钙处理),HE染色,光镜观察组织炎细胞浸润状况。实验动物建立感染模型术前和术后第1、3、6周后,测定血清C-反应蛋白和血沉的变化。结果:成功建立了兔人工股骨头置换术后感染模型,各组兔人工股骨头置换术后股骨头均在位,经万古霉素-脂质体药物释放系统治疗后,万古霉素-脂质体组翻修术后8周X线结果提示关节间隙清晰,无明显骨缺损即透亮线形成,而万古霉素-骨水泥组置换术前后对比片,无明显变化。对照组感染未控制者术后6周X线结果显示,关节间隙模糊,假体及股骨结合部出现轻度骨吸收。细菌培养结果显示,空白对照组中实验动物细菌感染率为100%,而加入万古霉素后,万古霉素-PMMA组的实验动物细菌感染率为33.3%,显著降低;万古霉素-脂质体组实验动物细菌感染率为16.7%,与万古霉素-PMMA组相比,感染率显著降低(P<0.05);联合应用万古霉素-PMMA和万古霉素-脂质体,与其它组相比较,感染率显著降低(P<0.05),提示这种模式具有良好的抑菌效果。病理组织切片,发现实验动物建立感染模型6周后,空白对照组中实验动物感染人工股骨头周围股骨组织明显充血及炎性细胞浸润,万古霉素-PMMA组、万古霉素-脂质体组和万古霉素-脂质体组+万古霉素-PMMA的实验动物,炎性细胞浸润明显减少,提示术后关节周围细菌感染得到了有效的抑制。与术前相比较,各组CRP均显著升高(P<0.01),而经过万古霉素-PMMA组、万古霉素-脂质体组和万古霉素-脂质体组+万古霉素-PMMA治疗的实验动物,CRP均显著低于空白对照组中实验动物(P<0.05)。结论:本实验中首先建立兔人工股骨头置换术后感染模型,并观察了万古霉素-脂质体药物释放系统对兔人工股骨头置换术后感染的效应,通过X线检查、细菌培养、病理组织切片观察以及血清C-反应蛋白和血沉变化的测定,结果表明,通过上述方法制备的万古霉素脂质体对于人工股骨头置换术后感染具有良好的预防和治疗作用,为临床的进一步应用提供了初步的实验基础和理论依据。     

幽门螺杆菌液体培养工艺的研究

Hp的液体培养尤其是大规模培养仍存在许多问题,通过单因子试验统计分析。优化筛选了适于幽门螺杆菌的液体培养基和摇瓶培养条件。结果表明,在适宜的摇瓶培养条件下,Hp能够在添加β-环糊精（β-Cyclodextrin,β-CD）的布氏肉汤中很好地生长,菌体收获量达到0.6g/mL。     

生物表面活性剂发酵液的组成及表面活性

假单胞菌（Pseudomonas sp.)生长在正烷烃或植物油中,能生产出表面活性物质,分析其发酵液,类脂物和多糖是主要代谢产物,发酵液中表面活性物质主要是糖脂化合物及甘油单脂,发酵液稀释到5%,能将表面张力降到27mN/m,表面性能在广泛pH(2-12),高矿化度溶液中和高温下都非常稳定,发酵液的良好表面性能显示了它在三次采油,土壤处理等领域中应用潜力。     

Leber氏病的PCR基因诊断

木文报告了用PCR技术对线拉体DNA突变引起的人类Leber氏病的研究。此病惠者的 mtDNA第11778位由G突变成A,这种点突变使sfaNI酶识别位点消失,因此可通过PC1t扩增此特 异片段确定其酶切多态性。我们扩增了含sfaN1酶切识别位点在内的一段340bp的mtDNA, sfaNI酶 将正常人的mtDNA切成190师和150bp两片段,而患者的mtDNA则保留完整的340bp, 关键词：线粒体DNA, PCR, Leber氏肩     

新型东亚钳蝎小分子成分的生化性质及其对大鼠心室肌细胞Ito的作用

分离纯化获得了两个东亚钳蝎小分子活性多肽ＢｍＰ０２和ＢｍＰ０３。经质谱鉴定二者皆为单一峰,分子量分别为２．９５０ｋＤ和２．９３５ｋＤ。ＢｍＰ０２的氨基酸序列已被测定。用全细胞膜片箝方法记录到ＢｍＰ０２对大鼠心室肌细胞短暂外向钾电流（Ｉｔｏ）具有明显的抑制作用（ｎ＝５）,冲洗后可部分恢复,且其抑制活性具有浓度依赖性和电压非依赖性。进一步研究表明,ＢｍＰ０２可影响短暂外向钾通道的失活化和恢复过程,但却不影响其激活过程     

TI-RADS分类联合血清TSH、TPOAb、TgAb检测对甲状腺良恶性结节的诊断价值

摘要 目的：分析甲状腺影像报告和数据系统（TI-RADS）分类联合血清促甲状腺激素（TSH）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（TgAb）检测对甲状腺良恶性结节的诊断价值。方法：回顾性分析2019年1月至2021年1月中国人民解放军联勤保障部队解放军第九〇一医院收治的76例甲状腺结节患者的临床资料。术后病理结果显示32例为甲状腺恶性结节（恶性组）,44例为良性结节（良性组）。对比两组超声征象以及血清TSH、TPOAb、TgAb的表达情况。甲状腺恶性结节的影响因素通过多因素Logistic回归进行分析,TI-RADS分类联合TSH、TPOAb、TgAb检测对甲状腺良恶性结节的诊断价值通过受试者工作特征（ROC）曲线进行评估。结果：恶性组结节质地为实性、边界模糊/毛刺、微钙化、内部回声为低回声、纵横比＞1、TI-RADS分类≥4类占比明显高于良性组（P＜0.05）,而两组结节直径、结节数目比较无差异（P＞0.05）。恶性组TSH、TPOAb、TgAb水平均高于良性组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示,质地为实性、边界模糊/毛刺、微钙化、内部回声为低回声、纵横比＞1、TI-RADS分类≥4类、高TSH、高TPOAb、高TgAb水平为甲状腺恶性结节的危险因素（P＜0.05）。ROC曲线结果显示,TI-RADS分类、TSH、TPOAb、TgAb联合检测较各指标单独检测的诊断效能更高。结论：TI-RADS分类联合血清TSH、TPOAb、TgAb检测可有效鉴别甲状腺结节性质,且联合检测诊断效能更高。