家蝇抗菌肽AMPs17蛋白原核表达条件的优化及其抗真菌活性检测

目的:优化AMPs17重组蛋白的原核表达条件,分析重组蛋白的抗真菌活性。方法:比较不同的诱导温度(25℃、28℃、30℃、32℃、34℃)、异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导浓度(0. 025mmol/L、0. 05mmol/L、0. 1mmol/L、0. 3mmol/L、0. 5mmol/L、0. 8mmol/L、1. 0mmol/L)和诱导时间(12h、15h、18h、21h、24h)对AMPs17重组蛋白表达量的影响,筛选AMPs17重组蛋白的最佳表达条件;采用镍离子金属螯合剂亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,SDS-PAGE和ImageJ图像分析系统对表达结果进行分析,Western blot对AMPs17重组蛋白进行鉴定,高效液相色谱分析重组蛋白的纯度,微量液体稀释法及菌落计数法检测其抗真菌活性。结果:在诱导温度为32℃、IPTG浓度为0. 05mmol/L的条件下诱导培养15h,AMPs17重组蛋白的表达量最高且最为稳定;HPLC色谱仪分析显示AMPs17重组蛋白纯度可达到90%以上;优化后的AMPs17重组蛋白能有效抑制白色念珠菌的生长。结论:优化了家蝇抗菌肽AMPs17的诱导表达条件,获得了高表达、稳定且具有抗真菌活性的蛋白质,为后续抗菌机制及应用研究提供一定的实验基础。     

微循环阻力指数在心血管疾病中的应用

随着医疗水平的发展,心血管疾病的诊断和治疗越来越规范和细致,不仅需要对心脏大血管进行评估,对微循环的评估也是十分重要。微循环阻力指数(index of microcirculatory resistance,IMR)是2003年由Fearon医生提出的一种操作方便、能真实反映微循环阻力的冠状动脉功能学定量评价指标。IMR的可重复性好,且不受冠状动脉狭窄影响,在预测围手术期心梗、PCI术后微血管阻塞、ST段抬高性心肌梗死患者PCI预后,评价PCI辅助治疗手段的有效性,阐明应激性心肌病的发病机制以及评价心血管药物的应用等方面具有重要意义。本文就IMR的特点及临床应用做一综述。     

海蜇胶原蛋白肽的降血脂及抗氧化作用的研究

本研究以海蜇胶原蛋白为原料,经酶解得到海蜇胶原蛋白肽,探讨海蜇胶原蛋白肽对小鼠血脂的影响及抗氧化作用。以高脂饲料喂养ICR小鼠,建立高脂血症模型,研究胶原蛋白肽对小鼠肝系数和脂肪系数的变化情况及小鼠血脂水平、肝组织抗氧化功能的影响。结果表明海蜇胶原蛋白肽能显著降低小鼠肝系数和脂肪系数,能显著降低高脂血症小鼠血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、动脉硬化指数(LDL-C/HDL-C)水平,升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和抗动脉粥样硬化因子(HDL-C/TC);能提高肝组织超氧化物歧化酶(SOD)谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,并能减低丙二醛(MDA)的含量。海蜇胶原蛋白肽具有辅助减低血脂水平和增强抗氧化功能的作用。     

单克隆抗体制备的亲和填料在血浆高丰度蛋白分离中的应用研究

分离去除高丰度蛋白成为血浆蛋白质组研究的关键问题之一。我们从已建株的17株抗人血浆白蛋白单克隆抗体库中选出一株合适抗体。该抗体用Protein G Sepharose 4B吸附,然后用交联剂DMP（Dimethyl pimelinediimidate chloride）使之与Protein G 蛋白共价交联。实验结果显示600µL（结合1mg抗体）胶能分离10µL血浆中的白蛋白和球蛋白。填料进行重复使用10次后吸附能力变化无显著改变。对填料的吸附蛋白进行MALDI-TOF/TOF 鉴定主要为白蛋白和球蛋白,及其碎片,但发现吸附的蛋白有转铁蛋白,纤维蛋白原,抗胰蛋白酶,前脂蛋白,Vitamin D 结合蛋白,Keratin 10和 CD5 antigen like蛋白。实验结果表明该方法能在固定目的抗体同时最大量地保持抗体活性,该方法有望在蛋白质组学研究的高丰度蛋白分离中得到广泛应用。     

景感生态学视角下的健康社区构建

景感生态学是基于中国传统人居环境营造理论与实践结合现代生态学基本原理形成的新兴学科，注重探讨生态系统服务与可持续发展的关系。可持续发展目标中健康与福祉是其重要内容，因此健康人居环境的营造也是景感生态学的重要应用领域之一。在健康人居环境的营造过程中，健康社区构建具有作为"细胞工程"的基础性作用。因此，从景感生态学的视角探讨健康社区的构建，有助于景感生态学进一步应用于可持续发展与人居环境营造的实践，为健康与福祉的顺利实现提供支撑。从健康社区的定义和主要理念出发，基于健康社区构建的需求本体和供给客体及其相互作用关系，结合生态环境科学的"时-空-量-序"的视角，探讨了生态环境研究应用于健康社区构建的作用及面临的系统性不足、人文性不足和耦合性不足等挑战；进而以景感生态学作为连接生态环境学科与建筑规划学科的纽带，探讨了景感生态学在应对上述挑战中的作用。从景感生态学视角来看，健康社区构建就是将人类健康这一愿景融入到社区健康需求本体与健康供给客体及其相互关系的调控与营造，从而实现社区及人群的健康和可持续发展。健康社区的构建强调社区人群主观健康需求与客观健康供给之间的互动与耦合，与景感生态学强调"景"与"感"相互融合、相互作用具有高度一致性。本文从景感生态学的研究要素、景感营造的理念与研究工具等方面，系统地提出景感生态学视角下的健康社区构建框架：包括融合多景感要素的社区人群健康生态系统服务体系、营造多景感载体的社区人群健康行为意识引导体系和建设多方位的健康社区趋善化管理与智能感知体系。景感生态学所提供的崭新视角和系统性思路，对于健康社区的构建将具有重要的指导作用。     

脂肪酸从头合成代谢及其抑制剂在肿瘤中的研究进展

代谢重编程是肿瘤的重要特征之一。肿瘤细胞常会发生过度增殖、局部侵袭、转移、复发和耐药等。这些过程均需要大量的脂肪酸,用于合成肿瘤细胞所必需的生物膜和信号分子等。因此,研究脂肪酸从头合成代谢在肿瘤细胞发生发展过程中所发挥的重要作用有助于深入理解肿瘤的发病机制,为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路。本文将对脂肪酸合成代谢在肿瘤中的研究进展进行论述,并关注脂肪酸合成相关代谢酶抑制剂的研究现状,旨在为肿瘤的治疗提供更多的线索。     

利用抗生素对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的影响进行菌株区分

目的为了探讨抗生素对中心碳代谢的影响,我们研究了大肠埃希菌和铜绿假单胞菌在11种不同抗生素的刺激下,三羧酸循环相关有机酸的代谢变化。方法利用毛细管电泳技术对2种菌在不同抗生素作用下细胞内的主要有机酸进行检测,然后通过多变量统计分析对数据进行处理。结果通过多变量统计分析发现,2种细菌可以通过抗生素对其胞内有机酸的影响不同而得到区分。结论胞内有机酸的变化具有菌株特异性,可以用于细菌的区分。     

全程综合护理干预对提高心肌梗死患者依从性及预后的研究

目的:探讨全程综合护理干预对心肌梗死患者遵医行为及预后的影响.方法:100例心肌梗死患者随机分为对照组及全程综合护理组,每组各50例.对照组实施传统的常规护理,综合护理组患者开展全程综合护理.出院随访1年,1年后复查冠状动脉造影,比较期间服药日比率和心血管事件发生率.结果:全程综合护理干预提高患者服药日比率(81.1±6.2％vs.60.9±5.9％,P＜0.05),并减少患者心肌梗死及PCI术后再狭窄等心血管事件的发生(P＜0.05).结论:全程综合护理干预可提高心肌梗死患者遵医行为,降低二次心梗和冠状动脉再狭窄等心血管事件发生率,改善了患者的预后,为心梗患者的护理提供了新思路.     

幽门杆菌Catalase/GST融合蛋白的表达、标签切除及鉴定

旨在利用GST融合基因表达系统表达幽门螺杆菌Catalase融合蛋白,并利用凝血酶切除GST标签.将重组质粒Catalase/pGEX-4T-1转化大肠杆菌BL21( DE3)感受态中,用IPTG进行诱导表达,菌体经反复冻融、溶菌酶裂解及超声破菌后,Catalase/GST融合蛋白以部分可溶性的形式表达在上清中.采用谷胱甘肽琼脂糖树脂Glutathione Sepharose 4B对其进行纯化,得到Catalase/GST融合蛋白,再用凝血酶进行GST标签的切除,所得产物进行Western blotting鉴定.高效表达出Catalase/GST融合蛋白的相对分子质量约85 kD,凝血酶成功地切除了GST标签,Western blotting证实Catalase蛋白能被鼠抗Catalase单克隆抗体识别.