| 家蝇抗菌肽AMPs17蛋白原核表达条件的优化及其抗真菌活性检测 |
| |
| 引用本文： | 杨隆兵,国果,马慧玲,李妍,赵欣宇,苏佩佩,张勇.家蝇抗菌肽AMPs17蛋白原核表达条件的优化及其抗真菌活性检测[J].中国生物工程杂志,2019,39(4):24-31. |
| |
| 作者姓名： | 杨隆兵 国果 马慧玲 李妍 赵欣宇 苏佩佩 张勇 |
| |
| 作者单位： | 贵州医科大学基础医学院 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室 贵阳 550025 |
| |
| 基金项目： | * 国家自然科学基金资助项目(81760647);国家自然科学基金资助项目(81560337) |
| |
| 摘 要： | 目的:优化AMPs17重组蛋白的原核表达条件,分析重组蛋白的抗真菌活性。方法:比较不同的诱导温度(25℃、28℃、30℃、32℃、34℃)、异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导浓度(0. 025mmol/L、0. 05mmol/L、0. 1mmol/L、0. 3mmol/L、0. 5mmol/L、0. 8mmol/L、1. 0mmol/L)和诱导时间(12h、15h、18h、21h、24h)对AMPs17重组蛋白表达量的影响,筛选AMPs17重组蛋白的最佳表达条件;采用镍离子金属螯合剂亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,SDS-PAGE和ImageJ图像分析系统对表达结果进行分析,Western blot对AMPs17重组蛋白进行鉴定,高效液相色谱分析重组蛋白的纯度,微量液体稀释法及菌落计数法检测其抗真菌活性。结果:在诱导温度为32℃、IPTG浓度为0. 05mmol/L的条件下诱导培养15h,AMPs17重组蛋白的表达量最高且最为稳定;HPLC色谱仪分析显示AMPs17重组蛋白纯度可达到90%以上;优化后的AMPs17重组蛋白能有效抑制白色念珠菌的生长。结论:优化了家蝇抗菌肽AMPs17的诱导表达条件,获得了高表达、稳定且具有抗真菌活性的蛋白质,为后续抗菌机制及应用研究提供一定的实验基础。
|
| 关 键 词： | 家蝇 家蝇抗菌肽-17 原核表达 条件优化 抗真菌活性 |
| 收稿时间： | 2018-09-30 |
Optimization of Prokaryotic Expression Conditions and Antifungal Activity Detection of Antibacterial Peptide AMPs17 Protein in Musca domestica |
| |
| Long-bing YANG,Guo GUO,Hui-ling MA,Yan LI,Xin-yu ZHAO,Pei-pei SU,Yon ZHANG.Optimization of Prokaryotic Expression Conditions and Antifungal Activity Detection of Antibacterial Peptide AMPs17 Protein in Musca domestica[J].China Biotechnology,2019,39(4):24-31. |
| |
| Authors: | Long-bing YANG Guo GUO Hui-ling MA Yan LI Xin-yu ZHAO Pei-pei SU Yon ZHANG |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Musca domestica AMPs17 Prokaryotic expression Condition optimization Antifungalactivity |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国生物工程杂志》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国生物工程杂志》下载免费的PDF全文 |
|
