乳腺癌ConA、LCA、PSA免疫组化研究

运用ＡＢＣ法研究５０例乳腺癌三种凝集素受体（Ｌｅｃｔｉｎ－Ｒ）的表达,并以乳腺纤维瘤和乳腺小叶增生症各１０例作为对照。结果表明：该三种凝集素受体在乳腺良、恶性病变中的表达率无显著性差异。ＣＯｎＡ－Ｒ在乳腺癌以胞浆型定位为主,在纤维腺瘤则以胞膜型多见（Ｐ＜０．０５）。ＬＣＡ－Ｒ和ＰＳＡ－Ｒ在乳腺三种病变中均以胞浆型为主。ＣｏｎＡ－Ｒ与乳腺癌分化程度具良好的相关性;ＬＣＡ－Ｒ与乳腺癌瘤体大小有关。该三种凝集素受体与ＥＲ、ＰＲ及ＣＥＡ的表达未显示密切的关联。     

人FAM33A基因启动子的克隆与鉴定

目的鉴定人FAM33A基因的启动子,为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法采用5’RACE技术（5’端cDNA快速扩增）鉴定FAM33A的转录起始位点。采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略,构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因。采用Lipofeetamine^TM2000转染H1299细胞,并通过Dual-Lu-ciferase@ Reporter Assay System进行荧光素酶报告基因活性检测。结果确定了FAM33A的转录起始位点,构建了覆盖FAM33A 5’端ATG附近约2kb区域的一系列FAM33A启动子荧光素酶报告基因。启动子活性分析表明,这些重组体均具有较高的启动子活性,同时含有典型的GC盒以及Sp1、E2F和GATA-1等潜在的转录因子结合位点。结论FAM33A启动子区域主要定位于转录起始位点附近约590bp的区域内。     

7号淀粉酶链霉菌M1033菌株葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的高效表达

从已克隆的含７号淀粉酶链霉菌Ｍ１０３３菌株产葡萄糖异构酶基因的质粒ｐＵＢ中,用ＤｄｅＩ和Ｋｐｎｌ酶解,分离出酶结构基因,以平端方式与大肠杆菌质粒ｐＴ７-７连接,构建了重组表达质粒ｐＴＫＤ-ＧＩ。将ｐＴＫＤ-ＧＩ转化到特异大肠杆菌寄主Ｋ３８,经４２℃热诱导,所产葡萄糖异构酶占菌体可溶性蛋白３５％。通过ＤＥＡＥ－Ａ５０柱和Ｇ－１５０柱层析,发酵液可获电泳纯蛋白３４ｍｇ／Ｌ。     

木糖异构酶的结构及蛋白质工程

木糖异构酶的结构及蛋白质工程肖亚中,伍传金,崔涛（中国科学技术大学生物系合肥２３００２６）关键词木糖异构酶,结构与功能,蛋白质工程木糖异构梅（Ｄ－ＸｙｌｏｓｅＩｓｏｍｅｒａｓｅ,ＥＣ５。３。１。５,下简称ＸＩ）催化五碳Ｄ－木糖转化为Ｄ－木酮糖,在体外亦能催化六碳Ｄ－葡萄糖至Ｄ－果糖的异构化反应［１,２］。该反应是工业上大规模以淀粉制备高果糖浆的关键步骤［３］,故习惯上将木糖异构酶称为葡萄糖异构酶 。