| 人FAM33A基因启动子的克隆与鉴定 |
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| 引用本文： | 杜刚,;卜友泉,;杨正梅,;兰欢,;崔涛,;镇磊,;刘革力,;宋方洲.人FAM33A基因启动子的克隆与鉴定[J].国外医学：分子生物学分册,2009(3):219-224. |
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| 作者姓名： | 杜刚 ;卜友泉 ;杨正梅 ;兰欢 ;崔涛 ;镇磊 ;刘革力 ;宋方洲 |
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| 作者单位： | [1]重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆市400016; [2]重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市400016; [3]重庆医科大学实验动物中心,重庆市400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（No.30801356、30871237、30872758）,重庆市科委自然科学基金（No.2007BB5302） |
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| 摘 要： | 目的鉴定人FAM33A基因的启动子，为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法采用5’RACE技术（5’端cDNA快速扩增）鉴定FAM33A的转录起始位点。采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略，构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因。采用Lipofeetamine^TM2000转染H1299细胞，并通过Dual-Lu-ciferase@ Reporter Assay System进行荧光素酶报告基因活性检测。结果确定了FAM33A的转录起始位点，构建了覆盖FAM33A 5’端ATG附近约2kb区域的一系列FAM33A启动子荧光素酶报告基因。启动子活性分析表明，这些重组体均具有较高的启动子活性，同时含有典型的GC盒以及Sp1、E2F和GATA-1等潜在的转录因子结合位点。结论FAM33A启动子区域主要定位于转录起始位点附近约590bp的区域内。
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| 关 键 词： | FAM33A基因 启动子 转录调控 细胞周期 |
Cloning and Identification of Human FAM33A Promoter |
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| Institution: | DU Gang, BU Youquan, YANG Zhengmei, LAN Huan, CUI Tao, ZHEN Lei, LIUGeli, SONG Fangzhou(1. Molecular medicine and cancer research center of Chongqing medical university, Chongqing,400016, China;2.Department of biochemistry and molecular biology of Chongqing medical university, Chongqing,400016, China;3.Laboratory Animal Center, Chongqing Medical University, Chongqing , 400016, China) |
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