7号淀粉酶链霉菌M1033菌株葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的高效表达

从已克隆的含７号淀粉酶链霉菌Ｍ１０３３菌株产葡萄糖异构酶基因的质粒ｐＵＢ中,用ＤｄｅＩ和Ｋｐｎｌ酶解,分离出酶结构基因,以平端方式与大肠杆菌质粒ｐＴ７-７连接,构建了重组表达质粒ｐＴＫＤ-ＧＩ。将ｐＴＫＤ-ＧＩ转化到特异大肠杆菌寄主Ｋ３８,经４２℃热诱导,所产葡萄糖异构酶占菌体可溶性蛋白３５％。通过ＤＥＡＥ－Ａ５０柱和Ｇ－１５０柱层析,发酵液可获电泳纯蛋白３４ｍｇ／Ｌ。