Construction of shuttle, expression vector of human tumor necrosis factor alpha (hTNF-α) gene and its expression in a cyanobacterium, Anabaena sp. PCC 7120

The construction of the shuttle, expression vector of human tumor necrosis factor alpha (hTNF-a) gene and its expression in a cyanobacterium Anabaena sp. PCC 7120 was reported. The 700-bp hTNF cDNA fragments have been recovered from plasmid pRL-rhTNF, then inserted downstream of the promoter PpsbA in the plasmid pRL439. The resultant intermediary plasmid pRL-TC has further been combined with the shuttle vector pDC-8 to get the shuttle, expression vector pDC-TNF. The expression of the rhTNF gene in Escherichia coli has been analyzed by SDS-PAGE and thin-layer scanning, and the results show that the expressed TNF protein with these two vectors is 16.9 percent (pRL-TC) and 15.0 percent (pDC-TNF) of the total proteins in the cells, respectively, while the expression level of TNF gene in plasmid pRL-rhTNF is only 11.8 percent. Combined with the participation of the conjugal and helper plasmids, pDC-TNF has been introduced into Anabaena sp PCC 7120 by triparental conjugative transfer, and the stable transgenic     

中药联合抗栓酶治疗糖尿病84例疗效观察

目前治疗糖尿病的药物疗效不持久 ,而且随病程延长药量还必须逐步增加。这样 ,不但药物剂量大 ,同时药物给机体带来的副作用也不断加大。为此 ,从 1 993年 8月至 2 0 0 0年 1 2月 ,我们采用中药联合抗栓酶治疗糖尿病 84例 ,提高了疗效的同时也缩短了疗程。现报道如下。1　临床资料1 .1　一般资料　本组 84例患者均按 1 996年 1 2月在英国召开的世界卫生组织 (WHO)关于糖尿病及其并发症诊断标准 ;也符合 1 997年美国糖尿病学会 (ADA)标准。空腹血糖 (FBG)≥ 7.0 mmol/L ,2 h糖耐量 (2 h OGTT)≥ 1 1 .1 mmol/L。 84例中男 73例 ,女 1 1…     

胃肠富集Kruppel样因子在食管癌的表达

胃肠富集Kruppel样因子（GKLF）是一个新近发现的真核锌指蛋白,它在胃肠道表达丰富,其表达与细胞生长停滞有关联.用半定量的RT-PCR的方法,比较了食管鳞癌病人癌组织和正常粘膜的GKLF表达.17例食管鳞癌病人均检测到GKLF mRNA的表达,其中14例癌组织中GKLF表达比临近正常组织减少.人原代培养成纤维细胞中GKLF的去血清诱导作用明显,而在一食管鳞癌细胞系EC9706中该诱导作用减弱.对EC9706细胞GKLF cDNA的序列分析表明,该基因的cDNA编码区未发生突变.结果证实,食管鳞癌中GKLF表达下调.     

钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶的结构和功能

钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase, CASK)属于膜相关鸟苷酸激酶(membrane associated guanylate kinase, MAGUK)家族.CASK具有多个不同蛋白质结合结构域,在细胞膜的特定区域,与其他蛋白质形成多种蛋白质复合体,参与组成细胞骨架.它通过衔接细胞外信号蛋白和细胞内骨架蛋白,协助功能蛋白质的转运和定位,以及细胞内的信号传递.此外CASK还可以进入细胞核影响基因转录调控,以及作用在神经突触膜上参与神经递质的释放.     

膜联蛋白Ⅰ的结构和功能

膜联蛋白Ⅰ(annexin Ⅰ)是annexins蛋白超家族中的一员,是结构相关钙离子依赖的磷脂结合蛋白.具有annexins超家族所共有的中心结构域和承担各自独特功能的N端结构域.通过调控细胞内磷脂囊泡的聚集、炎症反应和磷脂酶A2的活性而参与细胞信号传导、细胞分化和细胞凋亡等细胞重要的生命过程.     

优生学

优生学是研究如何改良人的遗传素质,繁衍优秀后代的学科。它的主要理论基础是人类遗传学和医学遗传学。但优生学不同于动植物育种,不能像动植物育种那样进行人工的选择、杂交……。在判断一个人是否优秀方面也存在着不同的标准和观点,远不象培育一个高产小麦品种或产蛋鸡那样容易作出决断和付诸实践。优生学不但要考虑到整个人类社会的近期利益,更要缜密地预测估算远期后果。优生的     

三氧化二砷诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及Bcl-2保护作用的机制研究

探讨三氧化二砷 (As₂ O₃)对人宫颈癌HeLa细胞的生物学效应和Bcl -2的高表达对这一效应的影响 .通过MTT ,克隆形成实验 ,形态观察 ,流式细胞仪 ,DNA凝胶电泳 ,细胞凋亡原位检测 (TUNEL) ,RT PCR ,Northernblot,Westernblot等方法发现As₂ O₃明显降低HeLa细胞存活率 ,并诱导其凋亡和细胞周期G2 /M期阻滞 ,分析显示As2 O3可能主要通过抑制c -myc基因和病毒致瘤基因的表达来诱导HeLa细胞凋亡 .Bcl -2的高表达也可能正是通过降低As₂ O₃对G2 /M期阻滞 ,逆转As₂ O₃对c -myc基因的降调节 ,减轻As₂ O₃对病毒致瘤基因的表达抑制作用 ,来部分阻止这种凋亡的发生 .我们还发现As₂ O₃能引起Bc1-2高表达HeLa细胞G2 /M期的弱阻滞 ,降调Bcl -2的表达以及略微抑制病毒致瘤基因的表达 ,这可能是As₂ O₃仍能诱导Bcl -2高表达HeLa细胞凋亡的原因 .     

p53蛋白多肽片段在大肠杆菌中的表达

在所有研究过的人体肿瘤组织或细胞中,ｐ５３似乎是突变频率最高的一个基因,研究和检测ｐ５３基因及其编码产物的变化将具有重要的意义。我们将野生型ｐ５３基因编码区３’端７０３ｂｐ的ｃＤ－ＮＡ片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中,得到了一个重组体表达质粒ｐＲＲ３３,经热诱导表达,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实ｐ５３蛋白多肽在大肠杆菌中得到了表达,它不仅可用于抗ｐ５３蛋白抗体的制备,而且也可用于对ｐ５３蛋白羧基端多肽功能的研究。     

RAI , one candidate gene associated with differentiation of human lung adenocarcinoma cells

From all-trans retinoic acid (ATRA)-treated human lung adenocarcinoma GLC-82 cells and control, subtractive cDNA library has been constructed using subtractive hybridization technique in our laboratory. The screening of the cDNA subtractive library resulted in identification of a clone containing cDNA fragment of one ATRA-induced gene (RAI) in GLC-82 cells. The positive clone with full-length cDNA of RAI was identified by screening fetal brain cDNA library using colony hybridization technique, and then sequenced. RT-PCR results showed that RAI was expressed in many different human fetal tissues. These results suggest that RAI may be involved in cell differentiation and play an important role in vital activities of cells.