葡萄糖对ICR小鼠胚胎体外发育的影响

研究葡萄糖在小鼠早期胚胎体外发育中的作用。实验1将6—8周龄的ICR雌鼠超数排卵后与公鼠交配,收集1-细胞放入含0(对照组)、0.5、1、3、5、10mmol/L葡萄糖的CZB中培养;实验2将从超排的ICR雌鼠输卵管内收集的1-细胞放入无糖CZB中培养,分别于1细胞、2细胞、4细胞、桑椹胚阶段移入含3.0mmol/L葡萄糖(最适浓度)的CZB中,培养24h后又移回到无糖CZB中(桑椹胚阶段除外)继续培养以及整个胚胎培养过程均在含糖CZB中,对照组胚胎培养全程均在无糖CZB中。每组胚胎于37℃、5%CO2培养箱中培养120h,每24h在倒置显微镜下观察胚胎发育情况,分别计算2-细胞率、4-细胞率、桑椹胚率、囊胚率和孵化率,并进行囊胚细胞计数。结果显示,小鼠胚胎在含糖CZB中与在无糖CZB中4-细胞发育率无差异;含糖CZB中囊胚率显著高于对照组;3.0mmol/L浓度组囊胚细胞数显著高于其余组;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖囊胚率显著高于对照组,1-细胞至2-细胞、桑椹胚及其以后阶段添加葡萄糖囊胚率与对照组无差异。实验证实,在ICR小鼠胚胎体外培养中加入葡萄糖不会导致2-细胞阻滞;葡萄糖浓度增至10mmol/L对ICR小鼠胚胎无毒性作用;ICR小鼠胚胎体外培养的最适葡萄糖浓度为3.0mmol/L;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖是必要的。     

白蚁取食行为多型及其机理

对白蚁取食行为的研究涉及5科18属38种白蚁。其取食行为多型可归纳为3类:(1)工蚁主导型:采食活动基本上由工蚁完成,兵蚁不参与或仅极少数个体参与,食物侦查或保护采食工蚁的职能不显著;(2)工蚁-兵蚁协同型:这是白蚁采食组织的常见类型,兵蚁成为采食队伍的固定成员,负责采食活动的安全侦查与防卫、食物源侦查等工作;(3)假工蚁主导型:由于尚未分化形成专职的工蚁,因而大龄幼蚁(广义的假工蚁)成为采食活动的主力,同时兼有巢内的保护职能。在食物加工和分配过程中,低等白蚁的幼蚁在未获得消化纤维素能力前主要通过肛交哺获得营养物质和共生物,且肛交哺是新蜕皮个体重新获得共生鞭毛虫的途径。高等白蚁幼龄工蚁负责食物加工、依赖型品级通过口交哺获得营养物质。白蚁采食活动中的行为多型受踪迹信息素控制,不同品级个体腹板腺有明显分化;不同品级和发育阶段个体食性分化与消化道结构、消化酶活性密切相关;保幼激素影响交哺行为以及消化酶基因表达。本文在评述研究进展的同时,对进一步研究提出了展望。     

PHD1通过下调NF-κB介导的cyclinD1的表达抑制肺癌细胞的生长和增殖

目的:探讨PHD1在肺癌中的功能,并进一步研究其分子机制,为肺癌的治疗寻找新的靶点。方法:选取人肺癌细胞A549,以脂质体为载体一方面过表达PHD1,另一方面合成设计靶向PHD1的siRNA沉默PHD1,利用荧光素酶检测NF-κB的活性,分别用western blot和real-time PCR检测cyclinD1的表达水平。在A549细胞中过量稳定表达带GFP标记的PHD1,流式细胞仪检测细胞周期变化,测量细胞的生长曲线,并将细胞注射到裸鼠皮下观察其成瘤情况。结果:过表达PHD1可明显抑制NF-κB的活性和IκBα的降解,降低cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平;而干扰PHD1的表达可显著增加NF-κB的活性,并上调cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平,而不影响cyclinE1。过表达IκBαSR可以阻止干扰PHD1引起的cyclinD1 mRNA水平的上调。过表达PHD1可引起细胞周期的停滞,显著抑制细胞的增殖和移植瘤的生长。结论:PHD1可能通过下调NF-κB介导的cyclinD1的表达抑制肺癌细胞的生长和增殖。     

胃肠富集Kruppel样因子在食管癌的表达

胃肠富集Kruppel样因子（GKLF）是一个新近发现的真核锌指蛋白,它在胃肠道表达丰富,其表达与细胞生长停滞有关联.用半定量的RT-PCR的方法,比较了食管鳞癌病人癌组织和正常粘膜的GKLF表达.17例食管鳞癌病人均检测到GKLF mRNA的表达,其中14例癌组织中GKLF表达比临近正常组织减少.人原代培养成纤维细胞中GKLF的去血清诱导作用明显,而在一食管鳞癌细胞系EC9706中该诱导作用减弱.对EC9706细胞GKLF cDNA的序列分析表明,该基因的cDNA编码区未发生突变.结果证实,食管鳞癌中GKLF表达下调.     

RAI , one candidate gene associated with differentiation of human lung adenocarcinoma cells

From all-trans retinoic acid (ATRA)-treated human lung adenocarcinoma GLC-82 cells and control, subtractive cDNA library has been constructed using subtractive hybridization technique in our laboratory. The screening of the cDNA subtractive library resulted in identification of a clone containing cDNA fragment of one ATRA-induced gene (RAI) in GLC-82 cells. The positive clone with full-length cDNA of RAI was identified by screening fetal brain cDNA library using colony hybridization technique, and then sequenced. RT-PCR results showed that RAI was expressed in many different human fetal tissues. These results suggest that RAI may be involved in cell differentiation and play an important role in vital activities of cells.     

小鼠孤雌胚、体外培养胚与体内胚H3K9乙酰化模式的比较

孤雌胚胎的发育率比体内体外生成胚胎的发育率要慢,为研究小鼠孤雌胚、体外培养胚H3K9乙酰化(H3K9ac)模式与体内自然胚之间的差异、曲古抑菌素A(Trichostatin,TSA)对孤雌胚H3K9乙酰化模式的影响及表观遗传模式对孤雌胚、体外培养胚发育的影响,文章采用间接免疫荧光法对小鼠植入前各时期孤雌胚、体外培养胚及体内自然胚基因组组蛋白的H3K9乙酰化水平进行检测。结果显示,植入前各时期孤雌胚H3K9乙酰化模式与体内组变化趋势基本一致,但平均荧光强度较体内组普遍偏高;经TSA处理后孤雌胚H3K9乙酰化水平有所提高,原核期至8-细胞期差异显著(P0.05)。体外培养胚H3K9乙酰化荧光强度与体内组变化趋势也基本一致,但平均荧光强度较体内组普遍偏低。以上结果表明,小鼠孤雌胚H3K9乙酰化水平高于体内胚,使植入前胚胎发育过程中本应沉默的基因启动子发生超乙酰化,进而抑制胚胎发育,这可能是造成孤雌胚胎发育能力较差的重要原因之一;TSA处理可以部分弥补体外培养环境对胚胎发育带来的伤害,但TSA提高孤雌胚的发育能力可能并不完全是通过改变H3K9乙酰化水平来实现的。     

密粘褶菌松木粉培养物对黑翅土白蚁的生物活性

【目的】研究密粘褶菌Gloeophyllum trabeum(Pers.:Fr.)Murr松木粉培养物对黑翅土白蚁Odontotermes formosanus(Shiraki)的生物活性。【方法】比较了密粘褶菌松木粉培养物不同溶剂提取液对采食工蚁的踪迹和引诱活性,研究不同浓度正己烷和乙酸乙酯提取液的引诱活性变化。【结果】正己烷提取液表现出高引诱活性和踪迹活性,乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮提取液具有高引诱活性和较低踪迹活性,甲醇、乙醇提取液表现出较高踪迹活性和较低引诱活性。正己烷提取液浓度与趋性反应率的回归方程为y=12.561ln(x)+50.11;乙酸乙酯提取液浓度与趋性反应率的回归方程为y=12.161ln(x)+51.411。【结论】密粘褶菌松木粉培养物对黑翅土白蚁采食工蚁具有明显的踪迹和引诱活性。正己烷和甲醇提取液的踪迹活性最强,乙酸乙酯和正己烷提取液的引诱活性最强。正己烷和乙酸乙酯提取液对采食工蚁的引诱活性具有很好的浓度相关性。     

葡萄糖对小鼠胚胎体外发育的影响

通过在CZB培养液中添加不同浓度葡萄糖及在胚胎发育的不同阶段加入葡萄糖,对小鼠胚胎进行体外培养,以探讨葡萄糖在小鼠早期胚胎体外发育中的作用。其结果表明,小鼠胚胎在含糖CZB与在无糖CZB中培养比较,4-细胞发育率无差异;各浓度葡萄糖组囊胚率显著高于无糖组,其中3.0mmol/L浓度组囊胚细胞数显著高于其余组;实验二：2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖囊胚率显著提高。上述结果证明,在小鼠胚胎体外培养中加入葡萄糖不会导致2-细胞阻滞;葡萄糖浓度增加至10mmol/L对小鼠胚胎无毒性作用,其最适浓度为3.0mmol/L;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖是必要的。关键词 葡萄糖;小鼠;2-细胞阻滞;胚胎;体外发育     

RAI——一候选的人肺腺癌分化相关基因

通过进一步分析采用全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)诱导人肺腺癌GLC-82细胞,经cDNA文库消减杂交构建的cDNA消减文库,得到一在ATRA诱导GLC-82细胞分化过程中激活表达(retinoic acid induced,RAI)的基因的cDNA片段,应用菌落原位杂交技术在胎脑cDNA文库中进行筛选,克隆RAI的全长cDNA序列并测序.RT-PCR分析表明,RAI在多种胎儿组织中表达.结果表明,RAI可能与细胞分化有关,并在细胞基本生命活动中发挥重要作用.     

航天中心医院住院患者营养状况调查

目的：了解我院妇科、肝胆外科、神经内科、消化科、粘液瘤科住院患者营养不良、营养风险、营养医嘱及营养支持情况。方法：患者入院后第2天进行营养风险筛查（NRS 2002）判断是否需要营养支持;病历系统中收集患者职业、婚姻、年龄、住院日、白蛋白、饮食医嘱及营养支持相关数据。结果：住院患者以退休、已婚、摄食量不变、体重无变化者居多;平均住院日粘液瘤科最长（13.77±10.51d）,妇科最短（6.00±3.79d）;平均年龄神经内科最大（63.38±16.57岁）,妇科最小（39.18±11.94岁）。营养不良比例最高的是消化科（76.92%）,最低的是妇科（8.16%）。住院患者总营养风险发生率为40.32%,其中粘液瘤科最高（59.09%）,妇科最低（10.2%）。各科饮食医嘱差异有统计学意义（P=0.000<0.05）,177例（40.78 %）根据病情变化调整膳食医嘱。肠内营养制剂使用比例最高的是神经内科（38.71%）,其他科室均未使用;肠外营养制剂各科室使用比例均较高。有营养风险者平均营养支持率为57.14%,其中最高的是肝胆外科（85.46%）,最低的是妇科（20%）。结论：住院患者营养不良及营养风险发生率较高;肠内营养使用率过低,肠外营养使用率过高,急需推广肠内营养治疗;有营养风险者营养支持率有待提高。