小鼠GITRL基因真核表达质粒的构建转染及其在Kupffer细胞中的表达

目的构建含小鼠GITRL基因的真核表达质粒pEGFP-N1-GITRL,体外转入小鼠Kupffer细胞。方法利用PCR方法扩增GITRL基因,克隆至pEGFP-N1载体,选择阳性克隆并进行序列测定。以脂质体化学法转染至Kupffer细胞中。结果构建了真核表达质粒pEGFP-N1-GITRL,基因测序与GenBank中发表的序列完全一致,体外瞬时转染Kupffer细胞,RT-PCR及WB检测该Kupffer细胞表达GITRL。结论成功构建了真核表达质粒pEGFP-N1-GITRL,并在小鼠Kupffer细胞成功表达,为进一步研究GITRL在Kupffer细胞中的的生物学功能提供研究基础。     

糖皮质激素与侵袭性真菌感染

糖皮质激素(激素)是诱发真菌感染、特别是机会性真菌感染重要的因素,可通过抑制免疫反应的多个环节而影响真菌感染的发生与进程.内源性激素相关的疾病如Chushing综合征的患者,以及医源性皮质激素使用的患者均可成为真菌感染的易患人群.正确理解糖皮质激素免疫抑制作用和真菌感染发生的相互关系,可以提高对相关真菌感染的认识并针对性开展防治策略,改善激素应用条件下发生真菌感染的预后.     

亲水性糖皮质激素衍生物对巨噬细胞呼吸爆发的影响

目的:观察糖皮质激素(GC)衍生物对巨噬细胞呼吸爆发的影响,并探讨GC对巨噬细胞呼吸爆发的非基因组作用机制.方法:合成亲水性和疏水性的系列GC衍生物,分离并培养腹腔巨噬细胞,应用细胞色素C还原法检测PMA刺激巨噬细胞生成超氧阴离子的能力.结果:获得了亲水性的GC衍生物氢化可的松-21-甘氨酸酯盐酸盐(HG)、氢化可的松-21-赖氨酸酯盐酸盐(HL)和疏水性的氢化可的松-21-苯丙氨酸酯盐酸盐(HP),HG和HL可显著促进PMA刺激巨噬细胞生成超氧阴离子,HP无显著作用.结论:GC快速增加PMA刺激的巨噬细胞超氧阴离子产生是通过非基因组机制实现的,这一作用与疏水性有关.     

脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗多发性硬化症30例临床观察

目的:研究脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗多发性硬化的临床效果.方法:将我院收治的60例MS患者随机分为观察组和对照组各30例.对照组患者应用糖皮质激素治疗,观察组患者应用脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗,观察比较两组患者疾病无进展生存率(PFS)、治疗前后总发作次数、年均发作次数、生活质量、病灶数目及总体积变化,同时注意不良反应发生情况.结果:观察组患者＜6个月、6～l2个月、13～24个月、25～36个月及＞36个月的PFS均显著高于对照组(P＜0.01);观察组患者治疗前后MS总发作次数、年均发作次数均显著减少,生活质量得到明显改善(P＜0.01);结束治疗后两组比较,观察组患者总发作次数、年均发作次数均显著少于对照组,生活质量明显好于对照组(P＜0.01);观察组患者治疗前后病灶数目无明显变化(P＞0.05)但病灶总体积显著减小(P＜0.01);治疗后组间比较,两组患者病灶数目无显著差异(P＞0.05)但观察组患者病灶总体积显著小于对照组(P＜0.01);两组患者接受治疗后不良反应发生率相近且无显著差异(P＞0.05).结论:脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗多发性硬化可延缓疾病进展、提高患者生活质量同时不增加不良反应发生率.     

信必可都保对稳定期非囊性纤维化支气管扩张的疗效研究

目的：观察信必可都保（布地奈德．福莫特罗）对稳定期非囊性纤维化支气管扩张患者的临床疗效。方法：将42例稳定期非囊性支扩患者随机分为对照组（20例,常规服用氨茶碱0．1g,tid）、观察组（22例,在常规基础上加用信必可都保吸入剂,160μg／4．5μg,tid）,疗程3个月,比较治疗前后两组肺功能指标（FEV1、FVC和PEF）72．SGRQ评分。结果：对照组试验前后肺功能、SGRQ评分无显著改变（P〉0．05）;观察组肺功能无显著改变（P〉0．05）,SGRQ评分显著降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：长期使用信必可都保吸入剂对稳定期非囊性纤维化支扩患者的生活质量有明显的改善作用,可有效控制气道炎症,但对改善肺功能无显著效果。     

吸入糖皮质激素治疗哮喘儿童5年后回顾性研究

目的 了解哮喘儿童吸入糖皮质激素(Inhaled corticosteroids ICS)治疗5年后的病情控制情况,探讨影响儿童哮喘病情控制水平的相关因素.方法 对2003年至2004年在哮喘门诊登记、当时均给予ICS治疗的186例儿童进行现场回顾性调查.现场调查包括填写调查表,进行肺功能检测和皮肤过敏原点刺试验(Skin-prick testing SPT).结果 186例完成了现场调查,完全控制率为42％,其中完成ICS治疗的145例的完全控制率为47.6％,明显高于未完成治疗组(22％).完全控制和部分/未控制两组的性别、年龄、家族过敏史和哮喘家族史差异无统计学意义(P＞0.05),而部分/未控制组的本人过敏明显高于完全控制组(P＜0.05).ICS起始治疗的年龄和病程对哮喘完全控制率无明显影响;部分/未控制组中ICS疗程＞2年和目前持续ICS治疗的比例明显高于完全控制组(P＜0.05).结论 儿童哮喘患者5年后,仅有42％达到并且维持完全控制,哮喘儿童的长期控制情况并不理想.ICS治疗能够明显提高哮喘儿童的完全控制率,其效果可能与起始治疗的年龄和病程无关,要达到并维持完全控制,可能需要长期、持续的ICS治疗.     

掌跖脓疱病患者皮损糖皮质激素受体α和β表达的研究

目的：为了解掌跖脓疱病患者皮损中GR表达情况,我们利用免疫组化方法检测患者皮损和正常皮肤标本中GR-α和GR—β的表达,从而探讨其表达在发病中的作用。方法：选择25例临床诊断为掌跖脓疱病患者皮损,26例外科手术切取的健康皮肤作为正常对照。用免疫组化SP法（链酶卵白素-过氧化物酶法）检测掌跖脓疱病患者皮损与正常对照组皮肤GR-α、GR—β的表达数量和强度。结果：两组GR-α表达无显著差异,患者组GR-β表达阳性率及强度明显高于对照组。结论：GR-β在掌跖脓疱病的发病过程中起重要作用。     

机化性肺炎患者的CT引导下经皮肺穿刺活检及其临床诊治分析

目的:探讨CT引导下经皮肺穿刺活检对机化性肺炎患者的诊断价值,并总结机化性肺炎的临床诊治经验。方法:回顾性分析2015年7月-2017年9月在南京医科大学附属常州第二人民医院住院行CT引导下经皮肺穿刺活检取得肺部病灶组织确诊为机化性肺炎的14例患者,所有患者行CT引导下经皮肺穿刺活检,总结机化性肺炎患者的临床诊治经验。结果:14例机化性肺炎患者平均年龄为59岁,平均起病时间为21天。主要临床症状以发热、咳嗽、咳痰为主。6例肺部听诊可闻及湿啰音。影像学检查主要表现为肺部斑片状不均匀密度增高影。所有患者初次就诊时均未首先诊断考虑机化性肺炎。所有患者入院后均行CT引导下经皮肺穿刺活检术,术后病理均确诊为机化性肺炎,术中3例出现少量气胸,4例出现少量出血,予吸氧止血等对症处理后好转。14例患者予糖皮质激素治疗后,主要临床症状改善,影像学检查均较前吸收好转。结论:对于持续性干咳、呼吸困难、发热病人,抗生素疗效差,影像学显示片状或块状影病灶,特别是游走性斑片阴影,需要高度警惕机化性肺炎。CT引导下经皮肺穿刺活检可作为明确机化性肺炎诊断的首选方法。机化性肺炎对糖皮质激素治疗敏感,可出现可逆性的好转,一旦确诊,建议及早使用糖皮质激素治疗。     

益肺汤联合糖皮质激素治疗小儿难治性支气管肺炎的临床疗效及对患儿免疫功能影响

目的:探究益肺汤联合糖皮质激素治疗小儿难治性支气管肺炎中的临床效果及对患儿免疫功能的影响。方法:选择2015年1月至2017年1月于我院进行治疗的288例难治性支气管肺炎患儿为研究对象,按照随机数字表法将其均分为实验组与对照组,每组各144例患儿。对照组患儿在常规治疗的基础上加用糖皮质激素吸入治疗,实验组患儿在对照组基础上增加益肺汤进行治疗,治疗时间均为7 d,对比两组患儿治疗有效率、临床指标(咳嗽、气喘、肺部湿罗音)改善时间、治疗前后外周血T淋巴细胞亚群指标及血清白介素-8(Interleukine-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的变化。结果:(1)治疗后,实验组患儿的治疗有效率为96.53%(139/144),显著高于对照组患儿(89.58%,P0.05);(2)实验组患儿止咳、止喘、肺部湿罗音消失时间均短于对照组(P0.05);(3)实验组患儿治疗后CD4+高于对照组,CD8+、血清IL-8、TNF-α水平均显著低于对照组(P0.05)。结论:益肺汤联合糖皮质激素能够显著改善小儿难治性支气管肺炎临床症状,同时加快其症状转归,增强其免疫功能。     

呼出气一氧化氮检测在哮喘-慢阻肺重叠综合征中的临床应用

目的:探讨哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征(asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap syndrome,ACOS)患者呼出气一氧化氮浓度(FENO)的变化情况及与一秒用力呼气容积(FEV1)、血嗜酸性粒细胞(eosnophil,EOS)及超敏C反应蛋白(high sensitivity C reactive protein,hs-CRP)的关系。方法:选取上海第九人民医院2016年1月~2016年12月呼吸内科病区收治的ACOS患者30例及无肺部疾病的健康的体检人群20例分别作为实验组和对照组。治疗前后分别检测和比较两组FENO、FEV1值、EOS及血清hs-CRP水平的变化。结果:治疗前,实验组FENO、hs-CRP及EOS水平显著高于对照组(P值分别为0.0081,0.0263及0.0078),FEV1%水平显著低于对照组(P=0.0047)。治疗后,两组间FENO、hs-CRP及EOS水平变化无显著差异(P值分别为0.2614,0.1347及0.2431),而实验组FEV1%水平仍显著低于对照组(P=0.0469)。实验组在治疗前后FENO、hs-CRP及EOS水平均显著下降(P值分别为0.0027,0.0427,0.0031),而FEV1%变化无显著差异(P=0.1427)。在治疗前后,FENO水平与hs-CRP水平呈正相关(γ=0.7392,P=0.0168;γ=0.7214,P=0.0248),与血EOS水平亦呈正相关(γ=0.8782,P=0.0072;γ=0.7642,P=0.0231)。而FENO水平与FEV1%在治疗前后无相关性(P0.05)。结论:ACOS患者气道内存在嗜酸性粒细胞相关性慢性炎症,短期静脉糖皮质激素治疗可缓解其气道内炎症。ACOS患者FENO水平与血EOS、血清hs-CRP水平有显著相关性,可用于辅助评估ACOS患者静脉糖皮质激素疗效。