槲皮素对过氧化氢所致PC-12细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究槲皮素(quercetin)是否对过氧化氢所致PC-12细胞氧化损伤具有保护作用,以及可能的保护机制。方法:用PC-12细胞建立H2O2氧化损伤模型;测定SOD、T-AOC生化指标判断细胞抗氧化能力;半定量RT-PCR法检测糖皮质激素受体(GR)基因转录水平。结果:①MTT结果:H2O2能使细胞活力显著降低(P0.01),槲皮素的预孵处理能够明显减轻H2O2对PC-12细胞的氧化损伤(P0.050.01)。②SOD活性结果:H2O2作为氧化损伤因素使得细胞SOD活性应激上升(P0.01),Qu组细胞SOD活性维持在较低水平(P0.01)。③T-AOC结果:槲皮素能够显著提高PC-12细胞的总抗氧化能力(P0.01)。④半定量RT-PCR结果:H2O2使PC-12细胞GR基因转录水平显著降低,槲皮素能够减轻其转录所受影响(P0.01)。结论:槲皮素与PC-12细胞的共孵育,提高了细胞整体的抗氧化能力,维持了GR基因的转录水平,继而保护细胞免受后续H2O2的氧化损伤和炎症反应,维持细胞生化环境的稳态。     

糖皮质激素受体的生物学功能及其在骨代谢中作用的研究进展

骨质疏松(ostceporosis)是最常见的骨骼代谢性疾病,其特征包括正常骨密度的减少、骨质脆弱以及骨折的风险性增加。糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)治疗的病人容易并发糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoids-induced osteoporosis,GCOP)。糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)基因多态性能可改变其受体对糖皮质激素的敏感性,而激素高敏感病人极容易被临床医生所忽视而使用常规剂量糖皮质激素,所以存在更高的糖皮质激素性骨质疏松症风险,甚至出现病理性骨折。糖皮质激素性骨质疏松症最明显的表现为体内的骨代谢水平升高,体内骨代谢敏感性变化能反映骨质疏松的进展情况。然而,近来对糖皮质激素受体基因多态性与骨代谢敏感性的研究缺乏统一的认识。作者对文献进行检索分析发现,糖皮质激素受体基因的多态性可能增强或者减弱其对糖皮质激素敏感性,进而促进或抑制骨代谢,其作用结果和基因多态性位点、受体作用通路等有关。     

肿瘤坏死因子通过诱导局部糖皮质激素合成抑制急性肠道炎症

虽然肿瘤坏死因子α（TNF-α）在多种疾病包括炎症性肠炎中具有促炎症作用,但越来越多的证据表明其也有抗炎作用。糖皮质激素（GC）是一种可抑制炎症的类固醇激素,至少部分能通过调节TNF-α的表达和功能而发挥作用。     

哺乳类动物妊娠晚期孕激素撤退的三种机制

内分泌激素是维持妊娠和启动分娩的重要因素。孕激素是静息子宫、维持妊娠的主要激素,而糖皮质激素、前列腺素和雌激素等激素则与分娩启动密切相关。孕激素水平的下降是很多哺乳类动物分娩启动的前提条件,然而有些哺乳类动物包括灵长类在整个妊娠过程包括分娩中均维持着高水平的孕激素,此现象令人费解。越来越多的证据表明,人类分娩启动时孕激素同样出现了撤退,但是发生在孕激素的受体水平,主要表现为孕激素受体亚型表达比值和孕激素受体转录辅助因子表达的改变。本文比较了人类和其它哺乳类动物分娩启动时孕激素撤退的三种模式,即黄体溶解、胎盘P450c17羟化酶上调和孕激素受体功能改变,旨在进一步阐明人类分娩启动机制,从而为防治早产提供新的思路。     

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶2α过表达通过Wnt/β-Catenin信号通路抑制肝癌细胞株BEL7402增殖

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶(SGK)家族参与调节生长因子和激素的信号转导.为了研究SGK家族成员SGK2α在细胞中的功能,构建了真核表达质粒pEGFP-N1-SGK2α并瞬时转染HEK293细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现融合蛋白SGK2α-GFP主要定位于细胞浆,免疫共沉淀实验发现SGK2α与糖原合成激酶3β(GSK3β)存在相互作用.利用PCDNA6-V5-HisB-SGK2α质粒转染肝癌BEL7402细胞,建立稳定表达SGK2α蛋白的细胞系,通过细胞增殖实验发现,SGK2α的过表达使BEL7402细胞生长速度减慢、细胞倍增时间延长.裸鼠成瘤实验发现,与对照组细胞相比表达SGK2α的BEL7402细胞在裸鼠中的成瘤能力明显降低.免疫印迹实验证实,SGK2α的过表达不影响GSK3β的表达,但却使β-catenin和Cyclin D1的表达下调.提示影响Wnt/β-catenin信号通路关键分子的表达可能是外源性SGK2α蛋白过表达抑制BEL7402细胞增殖的分子机制.     

低聚果糖对慢性应激小鼠抑郁样行为及 肠道菌群的影响

目的探讨低聚果糖(FOS)对慢性应激小鼠的抑郁样行为及肠道菌群的影响。方法选取8周龄健康雄性ICR小鼠随机分成3组,C组小鼠每天给予正常护理,S组和SF组小鼠每天随机给予1～2种应激源,持续8周,SF组小鼠在应激造模的同时经食物补充FOS。在造模4周和8周后,分别通过强迫游泳、蔗糖偏好试验评估各组小鼠抑郁样行为。造模结束后通过Western blot试验检测小鼠大脑皮层内糖皮质激素受体(GR)的表达,并收集结肠内容物进行16SrDNA扩增子测序分析。结果应激造模8周后,C、S和SF三组小鼠的肠道菌群组成存在明显差异;与C组相比,S组小鼠强迫游泳的不动时间显著增加(t=3.970,P=0.0009),蔗糖偏好率显著降低(t=3.890,P=0.0011),脑内GR的表达显著降低(t=4.311,P=0.0125);与S组相比,SF组小鼠强迫游泳的不动时间显著缩短(t=3.495,P=0.0026),蔗糖偏好率和脑内GR表达有增加趋势。结论益生元FOS可调节肠道菌群,改善慢性应激诱发的精神情绪异常。     

圈养普氏野马对夏季高温生理应答的非损伤性研究

为研究圈养普氏野马Equus przewalskii对夏季高温刺激的生理应答,采用非损伤性取样法和放射性免疫法,随机选取5个圈养家族群中的成年雄马、成年雌马和成年带驹雌马各5匹,对其夏季高温期粪便内糖皮质激素和三碘甲腺原氨酸(T3)代谢产物的水平进行了测定。结果表明:(1)普氏野马在夏季高温期间一直维持在较高的激素水平;(2)不同类群的糖皮质激素代谢产物水平之间的差异有统计学意义(F_2,_(60)=22.885,P0.001),成年雄马成年雌马成年带驹雌马;(3)不同类群的T3代谢产物水平之间的差异有统计学意义(F_2,_(60)=37.780,P0.001),成年雌马成年雄马成年带驹雌马;(4)3组组内不同应激程度(THI28.9 vs.THI≤28.9)下的激素水平差异无统计学意义,且组别与应激程度不存在交互作用。鉴于圈养普氏野马在夏季高温期不同类群的生理应答水平不同,建议对野马分组、分圈进行管护,防止高温造成意外损失;同时,建议利用非损伤性取样法对圈养普氏野马生理状况进行监测,为管理者进行有效的生存管理提供基础资料。     

糖皮质激素快速抑制气道平滑肌游离钙升高与磷脂酶C活性的关系

目的:本实验通过对平滑肌细胞行GCs快速预处理,拟证实糖皮质激素对平滑肌细胞内[Ca2+]i浓度升高有快速抑制作用,并初步探讨该现象的可能分子机制。方法:原代培养的大鼠平滑肌细胞,应用Fura-2/AM显微荧光检测技术,检测肌细胞内[Ca2+]i在受到激动剂刺激后的浓度变化;比较不同浓度地塞米松预处理后10min与对照组之间游离钙上升情况的区别。用Western blot方法,分析气道平滑肌细胞内抑制型磷脂酶C(phospho-PLCβ-ser1105)含量的变化。设立RU486及CHX对照组,排除基因组作用在该反应中的影响。结果:GCs温浴10min,能够明显降低乙酰胆碱引起的ASMCs细胞内[Ca2+]i峰值。并能够明显上调ASMCs内抑制型PLC含量。这些反应不受RU486和CHX影响。结论:GCs能够通过非基因组作用快速抑制刺激物引起的气道平滑肌的收缩反应,这一效应的实现可能是通过抑制PLC分子活性,使其下游的[Ca2+]i浓度降低实现的。     

吸入糖皮质激素对大鼠肺纤维化的干预作用及bFGF表达的影响

目的:研究吸入糖皮质激素对大鼠肺纤维化模型的干预作用及可能的机制。方法:雌性Wistar大鼠40只,体重180～250g,按照随机数字表法将大鼠随机分为4组(n=10):①对照组(C组);②模型组(M组);③布地奈德组(B组);④地塞米松组(D组)。M组、B组、D组给大鼠气管内吸入博莱霉素(5mg/kgbw,8mg)复制肺纤维化模型,C组气管内吸入同等剂量的生理盐水作对照,B组于次日给予雾化吸入等效剂量布地奈德,D组于次日腹腔内注射地塞米松。上述各组均于注药后第1、4周各宰杀5只。通过苏木素-伊红染色观察肺泡炎、Masson胶原染色观察肺纤维化、用免疫组化及酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测bFGF蛋白在大鼠肺组织,血清及肺泡灌洗液(BALF)的表达。结果:1、4周时M组表现为肺泡炎及肺间质炎症,B组、D组肺泡炎及肺纤维化程度较M组减轻。1、4周时血清、肺组织、BALF中M组的bFGF表达高于C组(P0.01),B、D组低于M组(P0.01)。结论:吸入糖皮质激素可减轻博莱霉素诱导的肺纤维化,其抗纤维化作用的机制与抑制bFGF表达有关。     

预防性应用抗生素对糖皮质激素治疗老年ITP并发感染的影响

目的:探讨预防性应用抗生素对糖皮质激素治疗老年特发性血小板减少性紫癜并发感染的影响。方法:将哈尔滨医科大学附属第二医院血液科2012年3月~2015年3月的收治的72例老年特发性血小板减少性紫癜患者随机分为两组,自应用糖皮质激素第一天开始观察15天,观察组自应用糖皮质激素开始即使用抗生素,对照组不常规应用抗生素,以出现感染症状即开始应用抗生素,同时定为观察终止。比较两组患者感染发生率的差异。结果:观察组感染发生率为38.89%,对照组为69.44%,较观察组显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者感染发生部分的分布情况比较无统计学差异(P0.05),以呼吸系统感染发生率最高,其次是尿路感染。结论:预防性的使用抗生素可以降低糖皮质激素治疗老年特发性血小板减少性紫癜患者过程中感染的发生率。