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A组轮状病毒VP6与霍乱毒素B亚基融合蛋白在大肠杆菌中的表达及生物活性分析 总被引:4,自引:0,他引:4
利用霍乱毒素B亚基 (CholeratoxinBsubunit,CTB)的免疫载体作用 ,将轮状病毒相关抗原引入口服免疫体系 ,可激起有效的粘膜免疫反应 ,这里报道了CTB基因与A组轮状病毒地方株T114VP6全基因的融合 ,并在大肠杆菌BL21(DE3 )中进行了融合蛋白的表达。在IPTG诱导下得到分子量为 5 6kD的融合蛋白 ,表达量占菌体蛋白的15 %。分别用抗CT的抗体和抗A组轮状病毒的高价免疫血清进行WesternBlot检测 ,结果证明融合蛋白CTB VP6保留了天然霍乱毒素B亚基及轮状病毒VP6的抗原性。GM1-ELISA检测表明 ,复性后的融合蛋白具有与神经节苷脂GM1 结合的能力。 相似文献
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为了解巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)栽培种质的变异情况,以53份在云南植胶区综合性状表现较好的巴西橡胶树栽培种质为材料,采用流式细胞术测定了基因组C值,并进行了变异分析。结果表明,浅绿色嫩叶是巴西橡胶树流式细胞术测定的最适样品。53份巴西橡胶树栽培种质的细胞核DNA含量和基因组C值存在一定差异,基因组的平均C值是1.531 696×109 bp,最小的是CRTG-272种质(1.465 908×10~9 bp),最大的是CRTG-83种质(1.600 381×10~9 bp),变异系数较小(CV=0.035 5)。53份巴西橡胶树栽培种质中有47份为二倍体,6份为三倍体。在已测定基因组大小的40种大戟科(Euphorbiaceae)植物中,基因组大小变异较大(CV=1.248 6),与"C值悖论"观点相一致。因此,应用流式细胞术能快速、准确地测定巴西橡胶树细胞核DNA含量、基因组C值和染色体倍性。 相似文献
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子宫内膜蜕膜化过程伴随着活跃的血管生成是妊娠时新血管形成的关键步骤. 本研究旨在明确子宫自然杀伤细胞(uNK, CD56+细胞)在人类早期妊娠蜕膜组织中的分布, 并观察这类细胞是否表达血管内皮生长因子(VEGF-A)和促血管生成素2(Ang2). 免疫组化研究发现, uNK细胞(CD56+)大量存在于子宫蜕膜间质中, 主要集中在血管和腺体周围的间质组织, 蛋白水平的VEGF-A和Ang2表达于蜕膜间质细胞、微血管内皮细胞和腺上皮细胞中, uNK细胞在子宫蜕膜间质中的阳性率与平均微血管密度(MVD)、uNK细胞的阳性率与VEGF-A蛋白阳性表达率呈正相关关系, 而与Ang2无相关性. 另外, 在激光微切获得的单个uNK细胞进行巢式PCR的研究结果显示, 人类蜕膜的uNK细胞能够表达VEGF mRNA, 未测得Ang2 mRNA在单个uNK细胞表达. 表明人类早孕子宫蜕膜中的uNK细胞通过表达VEGF-A, 在蜕膜化过程和胎盘早期形成时的血管生成中发挥重要作用. 相似文献
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T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域\[T-cell immunoglobulin and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif (ITIM) domain,TIGIT\]是一种新型的免疫抑制性受体,在机体的免疫调节网络中扮演着重要角色。为了进一步探究TIGIT对自然杀伤(natural killer,NK)细胞的免疫调节功能,构建了融合蛋白TIGIT胞外段(即TIGIT第1~135位氨基酸,以保留功能结构域IgV区,此胞外段简称为TIG)-人免疫球蛋白G3(immunoglobulin G3,IgG3)Fc段的真核表达载体,并对TIG-Fc融合蛋白的表达及其对NK-92细胞功能的影响进行了初步研究。利用分子生物学方法,将携带人TIG与人IgG3 Fc段的基因融合,然后插入真核表达载体pcDNA3.1(-)中,以构建重组质粒pcDNA3.1(-)-TIG-Fc。随后将重组质粒转染至人胚肾细胞HEK-293T中,通过流式细胞仪和Western blot检测TIG-Fc融合蛋白在293T细胞中的表达;再将重组质粒转染至NK-92细胞中,通过WST-1检测TIG-Fc融合蛋白对NK-92细胞增殖的影响,并利用ELISA法检测TIG-Fc融合蛋白对NK-92细胞分泌IFN-γ的水平的影响。结果成功构建了人TIG与人IgG3 Fc融合表达的真核表达载体,且TIG-Fc融合蛋白的表达能够显著抑制NK-92细胞的增殖和分泌IFN-γ的能力(P<0.05),为后期TIGIT的功能研究奠定了重要基础。 相似文献
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本文筛选了培养材料和确定了粉碎的玉米芯培养基。该培养基组成:粉碎的玉米芯90%,麦麸8%,过磷酸钙1.5%,生石灰0.5%和0.2%的多菌灵含水达65—70%左右。将这个培养基制成一个堆,该堆高1.2—1.3m,宽1.5—1.7m,用塑料膜复盖,当堆中间达56℃以上时,翻堆3至4次每次间隔24~48小时。 当玉米秸杆能遮荫时(约7月5日),在玉米地垄沟栽培Pleurotus sapidus,通过实践证明在秋天可收获鲜菇10kg/m_2左右。 相似文献
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目的:评价机用ProTaper镍钛根管器械进行恒磨牙根管预备的临床疗效。方法:2007年7月至2010年12月期间就诊的需进行根管治疗的109患者,共计128颗磨牙,包括牙髓炎54颗牙,慢性根尖周炎74颗牙。按随机配对原则分入实验组和对照组,每组64颗牙。实验组用机用ProTaper镍钛根管锉预备根管,对照组用不锈钢K型锉预备根管。两组均采用侧向加压法充填根管,记录每颗患牙的单个根管预备所用时间、根管充填效果、术后不良反应及随访到的远期疗效。结果:机用ProTaper镍钛器械预备单根管所耗时间明显少于对照组,根管预备后疼痛发生率明显低于对照组,根管适充率实验组明显优于对照组,根管治疗术后1年疗效比较也优于对照组。结论:使用机用ProTaper器械进行恒磨牙根管预备快速有效,根充效果好,并发症发生率低,远期疗效确切,值得临床推广。 相似文献