全文获取类型
收费全文 | 2180篇 |
免费 | 85篇 |
国内免费 | 593篇 |
出版年
2024年 | 11篇 |
2023年 | 49篇 |
2022年 | 57篇 |
2021年 | 47篇 |
2020年 | 53篇 |
2019年 | 63篇 |
2018年 | 50篇 |
2017年 | 55篇 |
2016年 | 51篇 |
2015年 | 64篇 |
2014年 | 125篇 |
2013年 | 85篇 |
2012年 | 109篇 |
2011年 | 143篇 |
2010年 | 130篇 |
2009年 | 123篇 |
2008年 | 150篇 |
2007年 | 95篇 |
2006年 | 114篇 |
2005年 | 115篇 |
2004年 | 156篇 |
2003年 | 107篇 |
2002年 | 102篇 |
2001年 | 104篇 |
2000年 | 72篇 |
1999年 | 78篇 |
1998年 | 46篇 |
1997年 | 67篇 |
1996年 | 61篇 |
1995年 | 29篇 |
1994年 | 38篇 |
1993年 | 44篇 |
1992年 | 64篇 |
1991年 | 53篇 |
1990年 | 32篇 |
1989年 | 45篇 |
1988年 | 12篇 |
1987年 | 15篇 |
1986年 | 9篇 |
1985年 | 16篇 |
1984年 | 5篇 |
1983年 | 5篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 4篇 |
1980年 | 1篇 |
1966年 | 1篇 |
1963年 | 2篇 |
排序方式: 共有2858条查询结果,搜索用时 171 毫秒
141.
除草剂2,4-D特异性多克隆抗体的制备及鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的是制备特异性的2,4-D多克隆抗体.用活性酯和混合酸酐法将半抗原2,4-D分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共价偶联;以2,4-D-BSA作免疫原免疫两只新西兰白兔;以2,4-D-OVA包被96孔酶标板,用间接酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测抗血清效价和竞争性ELISA法检测2,4-D.结果显示2,4-D与BSA和OVA的偶联比率分别为32∶1和18∶1,抗血清效价>6.4×105,在优化条件下2,4-D的最低检测限达37ng/mL.实验成功地制备了2,4-D特异性多克隆抗体,为其ELISA方法的建立提供了条件. 相似文献
142.
亲和力是影响改型单链抗体应用于临床的重要因素之一.利用巨型引物PCR定点诱变方法,设计并化学合成出两组含多个突变位点的简并引物,在第一轮PCR中使用简并引物分别扩增出含突变碱基的两条特异性的DNA片段,即巨型引物,将其经琼脂糖凝胶电泳分离纯化后,作为3′和5′的两端引物应用于第二轮PCR反应中.通过改变标准PCR反应条件,调整引物与模板的浓度,扩增出特异性较强的目的DNA条带.PCR产物经回收后,进行DNA测序.测序结果表明利用该方法扩增得到特异的抗CD3改型单链抗体的突变体库. 相似文献
143.
144.
用固相化甲肝抗原,对所构建的噬菌体抗体库进行了3轮淘筛。第3轮淘筛后洗脱下来的噬菌体,较第l轮增加了近100倍。含有抗体重链基因和轻链基因的重组克隆.也由淘筛前的25%增至100%。说明甲肝抗原对抗体库的淘筛,富集了表面呈现甲肝人单抗的噬菌体。经夹心ELISA法筛选到抗甲肝病毒噬菌体抗体,并以竞争抑制实验进一步证实了这些抗体的特异性。 相似文献
145.
植物表达抗体的研究与发展 总被引:4,自引:0,他引:4
利用植物表达抗体是近年来兴起的植物基因工程的一个新领域.它将编码抗体或抗体片段的基因导入植物,从而在植物中产生全长抗体或抗体片段.利用植物表达抗体最诱人的潜在用途是可以大规模廉价生产治疗和诊断用抗体.此外,植物抗体还能够通过调控植物代谢改良植物性状并赋予植物对病虫害的抗性.目前植物抗体的商品化还存在一些问题. 相似文献
146.
高新 《国外医学:分子生物学分册》1998,20(3):133-136
双价、双特异性单链抗体是最近几年才出现的一类新的基因工程抗体分子,它在临床诊断和治疗上有着广泛的应用前景,尤其是在肿瘤和病毒的诊治方面更具突出优势。本对其性质,制备方法及应用前景作了系统的综述。 相似文献
147.
用DIGFA单盲检测各类胃病患者血清HP特异性抗体,结果表明其敏感性为979%,特异性为915%,诊断效率达947%,youden’s指数为089。通过本法与常规ELISA比较,发现两法前四种诊断指标均无明显差异,但DIGFA简易、快速,无需任何设备,数分钟内即可得出正确结论,因此适合于基层医院查病、胃镜检查前过筛及流行病学调查应用 相似文献
148.
噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选 总被引:7,自引:0,他引:7
构建人源噬菌体抗体文库如下:HIV感染者脾细胞中提取mRNA,经反转录再以人IgG重链Fd两端及轻链“通用”引物分别扩增Fab基因片段,依次插入到噬菌粒载体pComb3中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,经辅助噬菌体救助,重组噬菌体得以溶源裂解,Fab表达于噬菌体包膜蛋白Ⅲ的N端.此噬菌体抗体库的容量为5×105.筛选抗HIV-1同时又具有能被抗独特型抗体“IF7”所识别的独特型的阳性抗体:以重组包膜糖蛋白gp160及gp41多肽对噬菌体抗体文库进行三次淘选,使抗gp160的特异性抗体得到100倍的富集.然后通过直接ELISA和竞争性ELISA实验筛选出两株结合性较好的特异性抗gp160抗体-3B株与1D株.直接ELISA实验表明这两株克隆均能被“1F7”所识别,为抗独特型多肽的筛选奠定了基础. 相似文献
149.
本文评述了工程抗体酶的研究现状和抗体酶在防化医学研究中的应用。抗体库技术的出现使抗体酶的研究呈现了新的生机。不仅使不具备细胞工程实验条件的实验室能够制备抗体酶,而且实验周期大大缩短,比杂交瘤技术提供多20倍的结合性抗体作为潜在的抗体酶,使抗体酶更易获得。抗体库技术能够容易地评价编码抗体酶的基因,因而可以在分子水平上认识和改造抗体酶。噬菌体抗体库可以不经免疫即可制备抗体的特点,使通过人源性噬菌体抗体库生产的抗体酶能够直接用于临床治疗。随着工程抗体酶研究的不断深入,新颖实用的抗体酶将会被应用于包括军事医学在内的多种领域中。 相似文献
150.
为探讨肝癌特异性鼠源及其人源化单链抗体基因的表达策略并比较二者的结合能力,在3种载体中分别以融合、分泌及胞内表达的方式进行了研究;对复性后的单链抗体以抗原捕获ELISA法进行检测。结果表明,在3种载体中表达的鼠源及人源化单链抗体都是包含体,诱导物浓度及培养温度不影响表达形式;抗原捕获细胞ELISA表明人源化的单链抗体和鼠源单链抗体有相近的抗原结合能力。结论是:在大肠杆菌中表达的基因工程单链抗体的可溶性可能主要由自身氨基酸一级序列决定;先前的设计所采取的人源化方案没有影响到鼠源抗体的CDRs的天然构象,表达的人源化单链抗体提供了免疫原性评价及临床应用的基础。 相似文献