| 噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选 |
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| 引用本文： | 赵云峰,王海涛,王全立,杜芝燕,杨景庚,孙红琰,马立人,殷震.噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选[J].中国生物化学与分子生物学报,1998,14(1):20-24. |
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| 作者姓名： | 赵云峰 王海涛 王全立 杜芝燕 杨景庚 孙红琰 马立人 殷震 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院放射医学研究所，军事医学科学院微生物与流行病研究所，中国人民解放军农牧大学 |
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| 摘 要： | 构建人源噬菌体抗体文库如下：ＨＩＶ感染者脾细胞中提取ｍＲＮＡ，经反转录再以人ＩｇＧ重链Ｆｄ两端及轻链“通用”引物分别扩增Ｆａｂ基因片段，依次插入到噬菌粒载体ｐＣｏｍｂ３中，电转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，经辅助噬菌体救助，重组噬菌体得以溶源裂解，Ｆａｂ表达于噬菌体包膜蛋白Ⅲ的Ｎ端．此噬菌体抗体库的容量为５×１０５．筛选抗ＨＩＶ－１同时又具有能被抗独特型抗体“ＩＦ７”所识别的独特型的阳性抗体：以重组包膜糖蛋白ｇｐ１６０及ｇｐ４１多肽对噬菌体抗体文库进行三次淘选，使抗ｇｐ１６０的特异性抗体得到１００倍的富集．然后通过直接ＥＬＩＳＡ和竞争性ＥＬＩＳＡ实验筛选出两株结合性较好的特异性抗ｇｐ１６０抗体－３Ｂ株与１Ｄ株．直接ＥＬＩＳＡ实验表明这两株克隆均能被“１Ｆ７”所识别，为抗独特型多肽的筛选奠定了基础．
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| 关 键 词： | 噬菌体抗体 HIV 独特型抗体 |
| 收稿时间： | 1998-02-20 |
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