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141.
在大肠杆菌中,利用新构建的含T7g-10L RBS以及λ-PR启动子的新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序列的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白p24的高效表达。克隆的gag-pol基因片段在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其表达的病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白的有效加工,产生成熟的核心蛋白p24及其它产物。重组p24以可溶形式存在,可以被抗p24的单克隆抗体特异识别。测定的N端8个氨基酸序列与从病毒纯化的p24完全一致。在使用硫酸铵沉淀后,采用两步离子柱层析,可将重组蛋白纯化到95%以上的纯度。结果表明,纯化的p24可以作为特异性很强的试剂而用于HIV感染的诊断及病情的预后,并可用于p24的生化及结构分析。 相似文献
142.
143.
几种茶树生理分析的比较郭金华,牛志电(安徽芜湖师范专科学院,241008)本文以福鼎大白茶、槠叶齐、水古、杨树林、祁门储叶种为代表,通过对它们生理分析的比较来寻找出高产优质与生理特性的相互关系,从而为丘陵地区大田生产应用提供理论依据。茶叶不仅是我国人... 相似文献
144.
将编码人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pEX31A中,在大肠杆菌中表达出MS2/MCP-1融合蛋0白,该表达产物约占菌体总蛋白的15%左右,Westernblot检测表明,表达产物可与MCP-1抗体特异反应。采用琼脂糖平板法进行活性测定表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性,说明N端融合一段细菌蛋白对MCP-1有无趋化活性可能没有影响。 相似文献
145.
蛋白质进化的几种机制袁红雨,孙毅(河南省信阳阳师范学院生物系,464000)随着分子生物学的迅速发展,越来越多的蛋白质的一级结构被测定,与此同对,电子计算机技术广泛地运用于生物科学,使人们可以运用电子计算机比较蛋白质的氨基酸排列顺序。这种比较已从对不... 相似文献
146.
t-PA cDNA在CHO细胞中的高效稳定表达 总被引:1,自引:0,他引:1
我们曾报道t-PA mRNA非翻译区序列对其表达有明显的抑制作用,在此基础上,通过对5′-UTR及3′-UTR的改造,使t-PA在COS-7细胞中的表达水平提高30倍左右。将t-PA表达质粒用电击法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-dhfr),经过混合加压及筛选,在CHO细胞中高效表达了t-PA,表达水平达到5000~6000 IU/10~6细胞/24hr。重组t-PA具有与天然t-PA相同的分子量及酶活性。经过8个月连续传代,表达水平未下降,表明细胞株是稳定的,其主要指标均符合工程细胞株的要求。 相似文献
147.
本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核苷酸定点突变法在PCNA 5′NTR形成SD顺序,再用PCR法在SD顺序左右两侧分别随机突变6个和7个碱基,使它们与结构基因5′端顺序自发地形成各种可能的翻译起始区(TIR)二级结构。重组质粒转化JM109(DE3),以T7 RNA聚合酶-T7启动子调控转录。对288个重组子的β-gal活性测定表明,不同重组的表达量可相差55倍,其中9个表达量不同的重组子的RNA dot blot证实它们在转录水平无明显表达差异。由此提示,该研究策略和方法能有效地改变目的基因的TIR二级结构和捕获具有高翻译起始效率的表达克隆。 相似文献
148.
用抗生素或臭氧的方法诱导出四种细菌和L型后,用图像分析技术定量检测L型多形性,表面积、最大直径、周长、等效圆直径和形状因子,并作比较分析。四种细菌L型及L型中的巨形体在上述5项形态学参数指标上除形状因子外均较细菌型明显增大,而形状因子参数明显小于细菌型。细菌L型之间在形态学指标上的差异有显著性(p<0.05)。形态定量分析能准确客观地反映形态定性观察的结果以及细菌L型的形态变异程度,为细菌L型的形态定量分析提供依据。 相似文献
149.
金钱松(属)的细胞分类学研究 总被引:2,自引:0,他引:2
我国特有植物金钱松Pseudolarixamabills的体细胞染色体数目为2n=44,不同于n=12(Miyake&Yasui,1911)和2n=24(Dunieu-Vabre,1961)的结果。核型公式为K(2n)=44=4sm+40t)4SC)属3B类型,与K(n)=22=2m+20t(Sax&Sax,1933)和K(2n)=44=4sm+40t(Hizume1988)有差异。染色体相对长度组成为=44=4L+12M_2+26M_1+2S。金钦松(属)不仅在染色体数目(2n=44)和核型(具20对端着丝粒染色体)而且它的一些形态、解剖学和植化性状与所有松科其它各属不同。另外,它的一系列形态、解剖、孢粉、生化、植化和古植物学特征显然表明把该属与落叶松属、雪松属一起组成落叶松亚科是不适宜的。因此似乎有理由把金钱松从该亚科分出并建立一个单型的金钱松新亚科。本文还对金钱松(属)核型可能由近缘的铁杉属起源和进化而来作了讨论。 相似文献
150.
旋毛虫肌幼虫ES抗原的基因克隆及高效表达 总被引:7,自引:0,他引:7
作者对编码旋毛虫肌幼虫ES抗原的部分结构基因进行了克隆、鉴定和表达。用RNA PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫总RNA中反转录并扩增出0.7kh的靶DNA,酶切分析后将其克隆到融合表达载体pEx3lC中。SDS—PAGE电泳表明,含重组子的大肠杆菌能够表达出一分子量为37kDa的融合蛋白(P37),后者占菌体总蛋白的22%以上,并以包含体形式存在于菌体中。经对纯化后表达蛋白的ELlSA检测,证明它能被猪旋毛虫病阳性血清和抗旋毛虫单克隆抗体识别。研究结果揭示,重组蛋白P37对于研制旋毛虫病诊断抗原和免疫抗原具有潜在的应用价值。 相似文献