腾冲嗜热杆菌热稳定海藻糖磷酸化酶的基因表达与酶的分子生物学性质研究

分离克隆了腾冲嗜热杆菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)海藻糖磷酸化酶(TreP)的编码基因(treP), 该酶可催化以葡萄糖和α-1-磷酸葡萄糖为底物的海藻糖合成反应及其逆向的分解反应. 反向mRNA点杂交实验表明, 腾冲嗜热杆菌中treP基因在高盐胁迫条件下表达量增加, 而在海藻糖诱导条件下表达量降低. 将该基因导入不含TreP的大肠杆菌中进行诱导表达, SDS-PAGE表明, 异源表达的TreP分子量约为90 kD, 与预期值相同. 通过葡萄糖氧化酶法测定分解产物葡萄糖的产率表明: TreP催化海藻糖分解反应的最适温度是70℃, 最适pH值为7.0; 通过HPLC检测合成产物海藻糖的产率表明: TreP催化合成反应的最适温度为70℃, 最适pH值为6.0. 在最适反应条件下, 50 μg的TreP粗酶可催化25 mmol/L α-1-磷酸葡萄糖与葡萄糖在30 min合成11.6 mmol/L海藻糖; 而同量的酶在同样时间内仅能将250 mmol/L海藻糖分解生成1.5 mmol/L葡萄糖. 以上体内胁迫和诱导表达分析及体外酶学性质分析均证明该酶的主要功能是催化海藻糖的合成反应. 热稳定性实验表明, 该酶性质比较稳定, 在50℃下温育7 h还能保持77%以上的活性, 是一个有潜在工业用途的新的热稳定海藻糖合成酶.     

高CO2浓度对百合某些生理生化物质的影响

本试验以生产花卉的温棚为设施,采用半封闭式CO2供气系统,研究不同CO2浓度对切花百合(Liliumdauricum)叶片光合速率和某些物质含量及开花期的影响.结果表明对于群体Pn、叶绿素(a+b)、叶绿素a、蔗糖、葡萄糖、氨基酸总量、脯氨酸含量等指标,600μmol*mol-1的CO2比对照依次提高54.3%、20%、38%、23%、22%、8.9%、31.2%;800μmol*mol-1的CO2比对照依次提高25%、20%、36%、10.8%、8.7%、10.6%、17.8%;1000μmol*mol-1的CO2比对照依次提高3.4%、14.0%、32%、7.6%、7.4%、-0.5%、7.1%.其中600μmol*mol-1的CO2更有利于百合叶片群体Pn和所测有机物含量的提高,也有利于花蕾的形成和生长,提前花期,提高切花瓶插期间的保鲜效果.     

蔗糖对水稻幼苗叶片谷氨酰胺合成酶和1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶的影响

报道了在光照和暗处培养下,不同的浓度的蔗水稻幼苗叶片GS及其同工酶、1,5－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶（Rubisco）的影响。无论是在光照或在暗处,蔗糖对GS活性均有抑制作用,尤其是在较高蔗糖下作用更为明显;虽然Rubisco及可溶性蛋白的水平在光照和暗处有显著的差别,但蔗糖对其未见明显影响。NativePAGE与活性染色表明,在光照下或在暗处,蔗糖对GS2的抑制蔗糖浓度升同而加强,但对GS1未有明显影响。这些结果提示,在水稻幼苗生长中,蔗糖不能象不光一样诱导叶水GS活性及其同工酶表达。     

对"探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用"实验的一些尝试

新版高中《生物》教材中 ,实验 6 :“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用”中用的淀粉酶是α-淀粉酶。α-淀粉酶因一般的小城镇购买有一定的困难 ,我们尝试用唾液中的淀粉酶和多酶片中的胰淀粉酶做该实验 ,其效果相当明显。1　用唾液中的淀粉酶替代 ︿-淀粉酶 ,增设一支对照实验试管基本方法是 :1)收集唾液后 ,取 1m L唾液注入小烧杯中 ,加入 2 m L蒸馏水 ,振荡小烧杯使之混合均匀 ,制成稀释的唾液。唾液稀释量少些 ,含唾液淀粉酶量就多 ,酶促反应速度就快。 2 )取 3支洁净的试管 ,编号为1、2、3。 3)在 1号、2号试管中各注入 2 m L质量分…     

转化酶在高等植物蔗糖代谢中的作用研究进展

蔗糖转化酶在高等植物蔗糖代谢中起着关键的作用。研究表明,转化酶参与植物的生长、器官建成、糖分运输、韧皮部卸载及调节库组织糖分构成及水平。近年来关于该酶的生化特性、基因表达与调控以及结构与功能等的研究取得了重要进展。本文介绍了转化酶在植物体内的种类、分布、分子结构特点、生理作用及分子生物学研究进展。     

管藻目绿藻刺松藻LHCII复合物的分离

采用TritonX 10 0增溶刺松藻类囊体膜 ,经初离心、蔗糖密度梯度离心和Mg2 聚集作用后再离心 ,纯化到一种只含有分子质量为 2 80 0 0u脱辅基蛋白的LHCII复合物。证实此种多肽为同时结合有Chla、Chlb和管藻黄素及管藻素的色素蛋白复合物 ,Chla/b =0 .91。吸收和荧光光谱显示分离物中各种色素之间保持着良好的能量传递关系 ,其中管藻黄素及管藻素吸收的光能可直接传递给Chla ,而无需Chlb作为中介     

管藻目绿藻刺松藻LHCII复合物的分离

采用TritoX-100增溶刺松藻类囊体膜,经初离心,蔗糖密度梯度离心和Mg^2 聚集作用后再离心,纯化到一种只含有分子质量为28000u脱辅基蛋白的LHCⅡ复合物,证实此种多肽为同时结合有Chla、Chlb和管藻黄素及管藻素的色素蛋白复合物,Chla/b=0.91。吸收和荧光光谱显示分离物中各种色素之间保持着良好的能量传递关系。其中管藻黄素及管藻素吸收的光能可直接传递给Chla,而无需Chlb作为中介。     

转化酶在高等植物蔗糖代谢中的作用研究进展

蔗糖转化酶在高等植物蔗糖代谢中起着关键的作用。研究表明 ,转化酶参与植物的生长、器官建成、糖分运输、韧皮部卸载及调节库组织糖分构成及水平。近年来关于该酶的生化特性、基因表达与调控以及结构与功能等的研究取得了重要进展。本文介绍了转化酶在植物体内的种类、分布、分子结构特点、生理作用及分子生物学研究进展。     

抗人肝癌单抗片段抗体HAb18F(ab')_2的冻干工艺研究

选择适合于HAb18F(ab')2片段抗体的冻干保护剂及其冻干工艺,是确保该生物制品的质量关键之一,对不同种类和不同浓度的保护剂进行了研究,结果表明10%蔗糖对HAb18F(ab')2片段抗体冻干样品的剂型、外观、残水量(<3%)、复溶时间(<10s)、纯度(>95%)及稳定性没有影响。研究优化与保护剂相结合的适用于HAb18F(ab')2片段抗体的最佳冻干工艺,为抗体片段扩大生产提供依据。     

飞蝗不同地理种群抗寒性研究

新疆和硕、哈密和天津北大港飞蝗种群的过冷却点随发育阶段而升高,在胚胎发育的各期都具有较低的过冷却点。飞蝗卵的过冷却点在这3个地理种群间无明显差异。雄性蝻和成虫双雌性的过冷却能力强,和硕飞蝗的成虫过冷点比北大港的飞蝗成虫要低。低温胁迫可诱导蝗卵以糖元为朱料合成抗冻保护剂,和硕飞蝗种群的卵主要合成甘油和山梨醇,北大港飞蝗种群的卵主要合成海藻糖,而哈密飞蝗种群的卵却可以合成甘油、山梨醇和海藻糖等抗冻保护剂。糖元磷酸化酶的总量随发育阶段而下降,但热休克和冷休克并不改变其总量,冷休克在胚胎发育的各阶段可以使其活性升高10%-40%,北大港飞蝗种群和哈密飞蝗种群的蝗卵经热休克2h处理后,糖元磷酸化酶的变化与在冷休克下的情况相似,而和硕飞蝗处群胚胎发育的Ⅱ期,热休克诱导糖元磷酸化酶活性的升高程度较低。