隔区和第Ⅲ脑室注射精氨酸加压素对家兔视前区—下丘脑前部温敏神经元放电的影响

为了研究精氨酸加压素（ＡＶＰ）的抗热机理,本研究观察了家兔隔区和第Ⅲ脑室微量注射ＡＶＰ对视前区一下丘脑前部（ＰＯ－ＡＮ）温度敏感神经元放电的影响。结果如下：（１）隔区注射ＡｖＰ能使ＰＯ－ＡＨ热敏神经元放电明显增加,冷敏神经元放电明显减少。（２）第Ⅲ脑室注射ＡＶＰ只能使部分ＰＯ－ＡＨ热敏神经元放电增加,冷敏神经元放电减少;而另外一部分热敏神经元和冷敏神经元则出现相反的效应。实验结果表明,隔区注射ＡＶＰ的抗热作用,可能是由于注射到隔区的ＡＶＰ使该区的神经元活动发生改变,而影响了ＰＯ—ＡＨ温度敏感神经元的活动所致。也提示隔区在体温调节中可能起重要作用。     

新生大鼠下丘脑培养细胞LH—RH免疫组化观察

用新生大鼠下丘脑细胞进行全外细胞培养,观察下丘脑神经元的生长分化,并对细胞培养,观察了下丘脑神经元的生长分化,并对培养的下丘脑细胞作了ＬＨ－ＲＨ和ＮＳＥ免疫组化观察。结果显示：新生大鼠下丘脑神经细胞可在体外生长发育,对ＬＨ－ＲＨ和ＮＳＥ均呈阳性免疫反应。ＬＨ－ＲＨ免疫组化阳性细胞的图像分析表明,细胞平均光密度和积分光密度在培养早期较低。至第７天时明显增加,以后随培养时间延长又逐渐下降。提示体外培养     

神经肽Y可减轻大鼠血管α1肾上腺素受体亚型的脱敏作用

以离体大鼠主动脉与肾动脉对去甲肾上腺素（ＮＥ）的收缩反应分别代表α１Ｂ与α１Ａ亚型肾上腺素受体（ＡＲ）激动时的生物学效应。血管经ＮＥ１０μｍｏｌ／Ｌ温育２ｈ后,α１－ＡＲ介导收缩效应的敏感性显著降低,其中α１Ｂ亚型ＡＲ的脱敏程度显著大于α１Ａ亚型ＡＲ。上述经ＮＥ温育的血管,在神经肽Ｙ（ＮＰＹ）０．５μｍｏｌ／Ｌ存在时,α１Ｂ亚型ＡＲ的脱敏程度显著减轻。ＮＥ收缩主动脉的两时相分析表明,脱敏时主要表现为相性收缩时间延长,收缩幅度降低,而紧张性收缩并无显著改变;在ＮＰＹ存在时上述相性收缩改变消失。提示α１Ｂ亚型ＡＲ脱敏的机制主要与细胞内Ｃａ２＋动员减慢减少有关。     

VIP和SP在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达与意义

目的通过研究两种神经肽VIP(血管活性肠肽)、SP(P物质)在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达,探讨VIP、SP在高血压性内耳疾病中的作用.方法采用免疫组织化学SABC法,观察VIP、SP在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达,并利用图象分析系统测量阳性表达区域平均光密度值,进行定量分析.结果基底转螺旋神经节细胞数目高血压组明显少于正常组(P<0.01).螺旋神经节细胞胞浆中和血管纹处均有VIP和SP表达.在螺旋神经节细胞胞浆中,VIP和SP的含量两组间差异无显著性意义(P>0.05);在血管纹中,VIP的表达高血压组高于正常组(P<0.05),而SP的含量差异无显著性意义(P>0.05).结论VIP和SP都是听觉传导通路的神经递质,而且VIP还参与耳蜗微循环的神经体液调节.     

中脑导水管周围灰质内微量注射神经肽Y减弱慢性神经痛大鼠对伤害性刺激的反应

探讨神经肽Y(neruopride Y, NPY) 在SD大鼠中脑导水管周围灰质 (periaqueductal grey, PAG) 对伤害性刺激反应的作用.应用热板和机械压力实验法,以大鼠后爪缩爪瓜潜伏期(paw withdrawal latency, PWL) 为痕阈指标, 观察PAG 内微量注射NPY对PWLs的影响.PAG内注射 0.05、0.1、 0.2 nmol NPY 均显著地增加慢性神经痛大鼠的双侧PWLs, 且呈量效关系.NPY引起的PWLs增加可被Y1受体拮抗剂和阿片剂所阻断.结果提示,在大鼠PAG 微量注射NPY可产生明显的镇痛作用.     

生长激素促释放剂受体配体的研究进展

生长激素促释放剂是一种合成的小分子化合物,它通过生长激素促释放剂受体而起作用,该受体是一种新的G蛋白偶联受体。以前曾认为生长激素促释放剂受体是一种孤儿受体,直到近年来从人和鼠的胃中鉴定到Ghrelin的存在,而改变了这种看法。Ghrelin是包含28个氨基酸残基的肽,在3号位的丝氨酸位点有辛酰化基团。该肽是在X／A样细胞分泌颗粒中发现的,Ghrelin的发现表明促垂体分泌生长激素可能不止受到来自下丘脑的生长激素释放激素的调节,同时还可能受到来自胃和下丘脑的Ghrelin的调节。     

从分子水平探索旋转恒定磁场对机体作用之机理

用RCMF旋磁治疗装置研究磁场对信息物质的影响,放射免疫测定发现磁场促使血浆内啡肽显著升高;荧光分光光度法和ELISA法测定发现磁场可以显著抑制5-HT及顺铂等中枢性致呕药物引起的呕吐反应,并同步伴有脑组织、小肠组织5-HT水平的可逆性下降.磁场处理对小鼠5-HT水平的影响表现出明显的窗口效应和滞后效应,磁场对药物致呕的抑制效应与其对5-HT的下调水平有平行相关关系.提示磁场对体内5-HT水平的降低,可能是其抑制细胞毒性化疗药物致呕的内在基础.应用硝酸还原酶反应-分光光度法和NADPH-d组织化学技术,发现磁场可促使丘脑下部一氧化氮(NO)含量显著升高,并具有显著滞后效应. NADPH-d阳性神经细胞及NADPH-d和血管加压素(AVP)双染阳性神经细胞集中分布在丘脑下部室旁核、室周核和视上核,但不存在于视交叉上核,提示室旁核、室周核和视上核一氧化氮肽能神经细胞是丘脑下部的一氧化氮的主要来源.磁场处理后大鼠丘脑下部一氧化氮含量较正常对照组显著升高应归因于这些神经细胞受磁场作用表达增强.一氧化氮和血管加压素的共存可能对磁场调节内分泌具有一定意义.发现磁场可促使肾上腺一氧化氮量显著升高,并维持一定时间,神经肽Y免疫细胞化学染色强度增强,进而对其相关机制和意义进行了讨论.     

PTD-NPY融合基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达

应用重叠延伸PCR方法扩增HIV-1 TAT蛋白转导结构域(PTD)与鼠源神经肽Y(NPY)的融合基因,克隆目的片段并插入酵母表达载体pPICZαA,构建成重组表达质粒pPICZα-PTD-NPY.PCR和酶切鉴定及测序正确后,经限制性内切酶Sac Ⅰ线性化重组表达质粒并通过电转化整合到巴斯德毕赤酵母菌GS115的染色体基因组中.阳性重组酵母菌用含1%甲醇的培养基诱导其分泌表达.经过120 h的诱导,取上清浓缩除盐后进行SDS-PAGE电泳,表明该系统成功表达了PTD-NPY融合蛋白,Western blotting实验证实表达产物具有特异性.获得真核表达的PTD-NPY融合蛋白,为下一步的应用研究提供了物质基础.