人骨髓间充质干细胞过表达白细胞介素-34对THP-1细胞的调节作用

构建人IL-34真核表达载体并将其转染到人骨髓间充质干细胞,观察高表达IL-34的骨髓间充质干细胞对THP-1细胞的影响。PCR扩增IL-34 DNA,并将其克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP;将构建成功的重组体转染到骨髓间充质干细胞,Western blotting和ELISA分析IL-34在细胞中的表达;用高表达IL-34的骨髓间充质干细胞培养上清液来培养THP-1细胞,Real-time PCR分析THP-1细胞中IL-10和TNFα的表达变化。经双酶切和测序鉴定,成功构建了pIRES2-EGFP-IL-34重组体;转染至骨髓间充质干细胞的IL-34可以促进THP-1细胞表达IL-10和TNFα。结果表明,骨髓间充质干细胞表达分泌的IL-34对THP-1有调节作用。     

FSHβsubunit gene is associated with major gene controlling litter size in commercial pig breeds

Ｌｉｔｔｅｒｓｉｚｅｉｓａｖｅｒｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｔｏｐｉｇｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｉｃｕｌｔｔｏｉｍｐｒｏｖｅｂｙｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｂｒｅｅｄｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｄｕｅｔｏｉｔｓｌｏｗｈｅｒｉｔａｂｉｌｉｔｙ.Ｍａｒｋｅｒａｓｓｉｓｔｅｄｓｅｌｅｃｔｉｏｎ(ＭＡＳ)ｉｓｔｈｏｕｇｈｔａｓａｎｅｗａｐｐｒｏａｃｈ,ｗｈｉｃｈｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｉｍｐｒｏｖｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｒａｉｔｓｏｆｌｏｗｈｅｒｉｔａｂｉｌｉｔｙｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌ…     

泼尼松灌胃与肌内注射对大鼠骨密度、骨生物力学性能及骨代谢的影响

目的观察泼尼松灌胃与肌内注射两种不同给药方法对大鼠骨密度、骨生物力学及骨代谢的影响。方法将45只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组（正常组15只、灌胃组15只、肌内注射组15只）,其中正常组大鼠作为阴性对照,予0.9%生理盐水灌胃2 m L/d;灌胃组大鼠给予泼尼松0.5 mg/（kg·d）灌胃;肌内注射组大鼠给予泼尼松0.5 mg/（kg·d）;12周后测定离体的大鼠椎体骨密度及血清β-CTX、PINP水平变化,采用三点弯曲试验测量股骨皮质骨最大载荷、弹性载荷、断裂载荷等生物力学指标。结果与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠椎骨骨密度值均显著性降低（P〈0.05）;与灌胃组相比,肌内注射组大鼠椎骨骨密度显著下降（P〈0.05）;与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠股骨的弹性载荷、最大载荷、断裂载荷均显著降低（P〈0.05）,肌内注射组与灌胃组大鼠的弹性载荷、最大载荷、断裂载荷相比差异无显著性（P〉0.05）。与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠中血清β-CTX水平均显著升高（P〈0.05）而PINP水平均显著降低（P〈0.05）,与灌胃组相比,肌内注射组大鼠血清β-CTX水平显著升高（P〈0.05）而PINP水平显著降低（P〈0.05）。骨组织切片HE染色显示：肌内注射组大鼠的骨小梁明显纤细疏松,造血组织明显减少,脂肪组织明显增多。结论泼尼松对大鼠的骨密度、骨生物力学及骨代谢指标都有影响,而肌内注射泼尼松比口服对骨密度、骨强度、骨代谢的影响更大,更易造成骨质疏松症。因此,建议临床使用泼尼松时选择口服作为给药方式更安全。     

葱属植物棱叶薤的形态性状与核型特征

对新疆不同地理位置分布的葱属植物棱叶薤的形态性状以及核型特征进行了研究,结果表明:鳞茎、株型、叶形等43个形态性状在3个棱叶薤居群之间不存在差异,而株芽、叶色、叶长、单株叶片数、小花数目、花序高度、花葶长度等19个性状在3个棱叶薤居群之间存在显著或极显著差异。采集自乌鲁木齐红旗水库居群的棱叶薤的核型公式是2n=2x=16=12m+4sm;塔城阿西尔乡巴尔鲁克山居群的棱叶薤的核型公式是2n=3x=24=18m+3sm+3st;裕民巴旦杏保护区居群的棱叶薤的核型公式是2n=4x=32=28m(4SAT)﹢4sm。棱叶薤居群内形态性状和倍性稳定,居群间存在形态性状分化,同时还存在二倍体、三倍体、四倍体的倍性分化。居群间染色体结构组成和相对长度组成也存在差异。核型类型均为2A型。     

测定胰腺癌组织微血管密度及淋巴管密度的临床意义

目的:研究胰腺癌组织中微血管密度(Microvessel density,MVD)和淋巴管密度(Lymphatic vessel density,LVD)的变化、与胰腺癌临床病理的联系。方法:采用免疫组织化学SABC法应用CD34及D2-40分别检测41例胰腺导管腺癌患者配对癌组织内、癌旁及正常胰腺组织中MVD及LVD的表达情况,分析其与肿瘤分化程度、分期和淋巴转移间的相关性;以及癌组织MVD与癌旁组织LVD表达之间的关系。结果:在41例胰腺癌组织配对癌组织及正常胰腺组织平均MVD值分别为46.585±16.935,11.100±4.036,两组之间差别有统计学意义(P=0.000<0.01)。配对癌组织内、癌旁及正常胰腺组织中平均LVD值分别为11.244±4.800,15.829±7.470和13.512±5.139;其中癌旁组织与正常胰腺组织LVD值差别无统计学意义(P=0.060>0.05),癌旁组织与胰腺癌组织的LVD值有显著性差异(P=0.000<0.01)。癌组织内MVD值与癌旁组织LVD值之间有相关性(P=0.025<0.05)。结论:胰腺导管腺癌组织中MVD及LVD与肿瘤分化程度、病理分期及淋巴转移存在关联。胰腺癌组织内MVD值与癌旁组织LVD之间存在相关性。     

无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失研究

目的：研究Y染色体微缺失与男性不育的关系。方法：采用多重PCR技术,研究正常男性、无精子症和严重少精子症男性不育患者Y染色体无精子因子（AZF）区域3个序列标志位点（STS）的缺失情况。结果：在93例无精子症或严重少精子症患者中,15例有Y染色体微缺失,缺失率为16%。其中,42例无精子症患者中,6例为AZFc区SY255位点缺失,2例为AZFb区SY134位点缺失;51例严重少精子症患者中,7例为AZFc区SY255位点缺失。40例正常男性无Y染色体微缺失。结论：多重PCR技术是简便而有效的对男性不育患者进行Y染色体微缺失筛查的方法;Y染色体微缺失是造成男性不育的一个重要原因,对男性不育患者进行辅助生育技术治疗前应常规进行Y染色体微缺失的检测。     

受精卵注射CRISPR/Cas9系统制备基因编辑子午岭黑山羊技术体系的建立

受精卵注射CRISPR/Cas9系统是制备基因编辑动物的有效方法,其中受精卵收集效率、显微注射胚胎存活率及胚胎移植受体妊娠率是关键影响因素.以子午岭黑山羊为研究对象探讨了情期内不同时间点放置CIDR对超数排卵的影响;分析了胚胎供体和受体发情停止时间差异对胚胎移植妊娠率的影响;设计了3个打靶肌肉生长抑制素基因(MSTN)的小向导RNA(sgRNA),并优化了CRISPR/Cas9系统显微注射参数.结果表明,胚胎供体发情停止后第4天放置阴道栓可有效提高黄体数(15.25±3.69)和受精卵数量(13.875±4.015);利用微量注射泵将Cas9mRNA(60 ng/μL)和打靶MSTN基因的sgRNAs(60 ng/μL)混合液注射到受精卵胞质内,注射参数Pi,Ti和Pc分别为300,0.5和60,注射24 h后胚胎分裂率为76.79%.胚胎移植时受体发情结束时间晚于供体发情结束时间12~16 h妊娠率最高(38.46%).本研究共得到19个存活的个体,经TA克隆测序分析,所有个体MSTN打靶位点上均发现碱基的插入或缺失.综上,本研究以子午岭黑山羊为例,建立了受精卵注射CRISPR/Cas9系统制备基因编辑山羊的技术体系,为利用CRISPR/Cas9技术进行山羊的遗传改造奠定了技术基础.     

猪FSHβ亚基基因结构区逆转座子插入突变及其与猪产仔数关系的研究

通过聚合酶链式反应 (Polymerasechainreaction ,PCR)对猪FSHβ亚基基因结构区的插入突变进行了精确定位 ,并对插入片段进行了克隆及序列测定 ,发现该插入片段位于猪FSHβ亚基基因已发表序列的 +80 9与 +810碱基中间 ,长度为 2 92bp ,两端具有相同序列并具有一个 polyA结构 ,为一典型的逆转座子结构 (retroposon) .在此基础上 ,成功地创建了PCR程序对几个猪种的个体进行了FSHβ亚基基因位点的基因分型 ,分析了FSHβ位点在不同猪种中的多态性分布情况 ,并把FSHβ亚基基因作为控制猪产仔数主效基因的候选基因与猪产仔数进行了连锁分析 ,首次证明FSHβ亚基基因座位在约克夏、长白、杜洛克等商业猪种中与控制猪产仔数的主效基因紧密连锁 .优势基因型AA纯合子比BB型纯合子母猪平均每胎多产仔 1.5头 .     

影响肝切除术后行TACE 患者预后因素的分析

目的:对原发性肝细胞肝癌(HCC)肝部分切除术后行经肝动脉化疗栓塞(TACE)的病人和未行TACE病人影响其预后的多种因素进行分析和评价,为肝切除术后是否行TACE治疗寻找筛选条件。方法:对我院2003～2008年期间在我院肝胆外科行原发性肝细胞肝癌手术治疗221例(术后介入治疗103例,术后非介入治疗118例)患者进行全面随访了解患者的预后情况,分别对术后接受介入治疗和非介入治疗两组通过Kaplan-Meier及COX回归分析影响预后的因素,包括:年龄、性别、血清HBsAg、肿瘤直径、肿瘤大体分型、有无癌栓形成,肿瘤分期(TNM)共7项指标。结果:在1年生存期内介入治疗组中的性别、年龄、血清HBsAg、肿瘤直径、肿瘤大体分型无统计学意义(p>0.05),有无癌栓形成及肿瘤分期有意义(p<0.05);非介入组内年龄、性别、血清HBsAg无统计学意义,肿瘤直径、肿瘤大体分型、有无癌栓形成,肿瘤分期有意义;在3年生存期内介入治疗组中的以上指标无统计学意义,而非介入组在肿瘤直径、有癌栓形成及肿瘤分期方面与统计学意义。结论:对于肿瘤直径>5cm及术后病理证实为低分化的患者给予积极TACE治疗可明显提高近期生存率。     

影响肝切除术后行TACE患者预后因素的分析

目的：对原发性肝细胞肝癌（HCC）肝部分切除术后行经肝动脉化疗栓塞（TACE）的病人和未行TACE病人影响其预后的多种因素进行分析和评价,为肝切除术后是否行TACE治疗寻找筛选条件。方法：对我院2003～2008年期间在我院肝胆外科行原发性肝细胞肝癌手术治疗221例（术后介入治疗103例,术后非介入治疗118例）患者进行全面随访了解患者的预后情况,分别对术后接受介入治疗和非介入治疗两组通过Kaplan-Meier及COX回归分析影响预后的因素,包括：年龄、性别、血清HBsAg、肿瘤直径、肿瘤大体分型、有无癌栓形成,肿瘤分期（TNM）共7项指标。结果：在1年生存期内介入治疗组中的性别、年龄、血清HBsAg、肿瘤直径、肿瘤大体分型无统计学意义（p〉0.05）,有无癌栓形成及肿瘤分期有意义（p〈0.05）;非介入组内年龄、性别、血清HBsAg无统计学意义,肿瘤直径、肿瘤大体分型、有无癌栓形成,肿瘤分期有意义;在3年生存期内介入治疗组中的以上指标无统计学意义,而非介入组在肿瘤直径、有癌栓形成及肿瘤分期方面与统计学意义。结论：对于肿瘤直径〉5cm及术后病理证实为低分化的患者给予积极TACE治疗可明显提高近期生存率。