蚊子有丝分裂染色体标本快速制片法

蚊子的染色体标本以往多采用组织培养方法制得.这种方法虽然效果较好,但是一般实验室,尤其是中学实验室难巳做到.本文介绍一种简便、快速的制作蚊子染色体标本的方法,同样能获得令人满意、分散良好的染色标本.方法:1、采卵:采集自然产或实验室喂养产的卵均可(库蚊属至少5块,伊蚊或按蚊属至少50粒).2、将采集的卵于室温下静置8-10小时后放入一支10ml锥形离心管内,加1毫升0.1%的秋水仙素溶液(秋水仙素溶液用0.60%生理盐水配制).     

染色体分析用于鉴定大熊猫幼仔性别

我们应用人类外周血微量短期培养技术,对出生2个半月的大熊猫染色体组型进行了分析,并确定了性别。 材料来自福州动物园初生大熊猫“榕榕”,培养基组合:RPMI—1640 4ml,小牛血清1ml,植物血凝素0.2ml混合,pH调至7.4左右。加静脉血0.2ml,37℃下培养72小时。终止培养前6小时,加入秋水仙素,浓度为0.08～0.15微克/ml。将收获的细胞用0.075M氯化钾溶液低渗处理20分钟,低速离心沉淀,用甲醇:冰醋酸(3:1)混合液固定30分钟,重复二次。最后用空气干燥法常规制作标本片。选择30个中期核分裂象计数,观察染色体的数目和形态。     

蛛形动物染色体标本快速制片法

制备蛛形动物染色体标本,以往的方法多需经过离心和细胞重悬浮等步骤,虽能获得较好的效果,但一般实验室。尤其是中学实验室难以进行。本文介绍一种简便、快速的制备蛛形动物染色体标本的方法,同样能获得令人满意、分散良好的染色体标本。本法还适应野外操作。方法与步骤1、取材:亚成体或成体蛛形动物的睾丸和卵巢;卵或卵囊均可。2、用100mg/ml 秋水仙素溶液(生理盐水配制)处理活标本(采自细胞分裂活跃的亚成体时期的材料.可不用秋水仙素处理),处理时间长短依动物的龄期和组织类型而定。软体蛛形动物可处理50—60分钟。     

大足蝠和长胫鼠耳蝠的染色体分析

本文所用大足蝠系1984年11月在安徽省繁昌县神仙洞内捕获,所用长胫鼠耳蝠系1982年秋在休宁县十八间房洞获得。染色体标本采用秋水仙素-低渗-空气干燥直接制片法。秋水仙素量按1μg/g体重计,实验材料取臂骨骨髓,经0.4%KCl低渗30分钟。标本用1/10Giemsa液染色20-30分钟。光镜下选取10个分散好的中期分裂相进行摄影、剪贴、测量,根据Levan等(1964)按臂比指数进行染色体分类,依着丝粒位置和相对长度排列编号。     

澳洲大蠊的减数分裂与核型研究

蜚蠊的种类繁多,现世界上已定名的约有3500多种。开展蜚蠊的细胞遗传学研究,对其种属鉴定、遗传防制以及遗传与变异机理的探讨都有一定的意义。本文对广州地区澳洲大蠊的减数分裂及染色体组型进行了研究,现报告如下。虫体来源由广州市微生物研究所昆虫室提供末龄雌、雄若虫及成虫。方法一、先日下午在实验虫体的腹腔内注入0.01%秋水仙素0.02～0.03ml,置入放有食物与水的烧杯内过夜。二、翌日上午在预冷的0.85%NaCl溶液中解剖虫体,取出生殖腺。三、将生殖腺置入预冷的1%枸椽酸钠溶液中低渗处理一小时。四、将低渗处理过的生殖腺置入新配制的…     

秋水仙素对洋葱根尖细胞染色体结构变异的影响

用0.05%和0.1%秋水仙素溶液对洋葱Allium cepa根尖进行控时处理,研究不同秋水仙素浓度和不同处理时间对洋葱根尖细胞有丝分裂畸变的影响。结果显示,秋水仙素有促进细胞有丝分裂染色体停滞在中期的能力;不同固定时间对洋葱根尖细胞有丝分裂有影响;秋水仙素对洋葱根尖细胞染色体有畸变效应,诱导产生畸变的能力受溶液浓度和处理时间的影响。     

用绿豆芽根做根对矿质离子交换吸附实验效果好

1　促使绿豆生根　在实验前的三四天 ,将绿豆用温水浸泡 1夜 ,再用布料包裹住放入花盆内 ,置于温暖处并早晚各用温水冲 1次。经三四天的时间 ,根长可达 3cm以上 ,可供实验之用。2　将绿豆根染色　剪取 6条绿豆根 ,浸入亚甲基蓝溶液中 ,约 2 min左右 ,根被染成蓝色。然后将根取出用蒸馏水反复冲洗 ,去掉浮色备用。3　对比实验　取两个小烧杯 ,贴上标签。烧杯 1中加入约 5 m L的 Ca Cl2 溶液 ,烧杯 2中加入约 5 m L的蒸馏水。用镊子夹取 3条根放入烧杯 1中 ,夹取另 3条根放入烧杯2中。4　实验结果　小烧杯 1中的溶液在几秒钟内便由无色变成…     

植物原色浸制标本的保存

不同植物、不同器官其颜色种类各有不同 ,制成标本如采用一般方法想长久保存原先颜色也很困难。笔者通过查资料 ,长期实践、摸索 ,终于找到较满意的制作方法。现介绍如下 :1　保存绿色　将标本浸入 30 % Cu SO4 溶液中 ,5～ 10天取出 ,用清水冲洗 ,再放入 0 .2 %～ 0 .3%的 H2 SO3溶液标本瓶中 ,密闭瓶盖。2　保存红色　用 2 2 0 g硼酸、150 ml福尔马林、10 0 ml75%～ 90 %酒精、2 0 0 ml蒸馏水制成保存溶液 ,将红色标本 ,如红枣、枸杞子或番茄等洗净浸入 ,然后密封容器口。3　保存紫色　将饱和精盐水 50 0 ml,福尔马林 2 50 ml、蒸馏水 …     

核微管组织中心的研究

本文利用间接免疫荧光手段对间期核微管组织中心的性质进行了初步探讨。当分离核与6S微管蛋白保温后,用抗管蛋白抗体进行间接免疫荧光染色,在群体中只有极少数核上有微管生长。Triton X-100或溶血卵磷脂去膜核的实验证实能长微管的核是核膜缺失或破损核。用秋水仙素解聚核上长出的微管,可见核内荧光亮点数多于染色体数,说明核内微管组织中心数目多于着丝粒数,很可能包括着丝粒和一部分染色质颗粒。将秋水仙素和6S微管蛋白混合后与去膜核保温,结果6S微管蛋白与核内微管组织中心有亲和力。本文就这些结果进行了讨论。     

酒精发酵实验

目的要求:用干酵母研究酒精发酵与温度之间的关系。材料用具:干酵母加热器具试管注射器(10ml)烧杯温度计胶塞(打孔,将注射器插入)葡萄糖溶液(10％) 方法步骤:1.把50ml葡萄糖溶液加热煮沸后,冷却至室温,然后加入2g干酵母,搅均,成发酵液。 2.用注射器抽取4ml发酵液,注意不要吸入空气,然后将注射器插在胶塞上。     

黑胡鞘尾蝠和大蹄蝠的染色体分析

1.材料与方法本文所用黑胡鞘尾蝠(Taphozous melanopogon)和大蹄幅(Hipposidaros armiger)系1990年3月在海南省坝王岺石灰岩洞中捕取。染色体标本采用秋水仙素—低渗—空气干燥直接制片法。秋水仙素量按1微克/克体重计算,实验材料取臂骨骨髓,经0.4％KCl低渗30分钟。标本用1/10 Giemsa液染色20分钟。光镜下选取10个分散好的中期分裂相进行摄影、剪贴、测量,根据Levan等(1964)按臂比指数进行染色体分类,依着丝粒位置和相对长度排列编号。     

秋水仙素诱导七里香多倍体

以不同浓度（0．02％、0．04％、0．08％、0．16％）秋水仙素溶液与二甲基亚砜和丙草胺的体积混合比为2000：10：1的溶液诱导七里香种子萌发苗1-3d的结果表明,所有处理均得到七里香多倍体,其中以秋水仙素浓度为0．08％的混合液处理3d的诱导效果最好,多倍体诱导率迭36．7％。     

中国人体细胞G式显带染色体的鉴别及模式图

本文提出“中国人体细胞G式显带染色体的鉴别及模式图”。 (一)显带方法 1.湖南医学院医学遗传研究室所用的方法(1973):用外周血和骨髓标本按常规方法培养和滴制染色体玻片标本后,立即置70一80℃烤箱内烤2一3小时,关闭烤箱,让其自然冷却后,按下列程序进行显带:(1)在无菌条件下,用0.8,%NaCI溶液配制0.25多胰蛋白酶溶液,玻璃滤菌器过滤,冰箱保存。(2)将上述0.25铸胰蛋白酶溶液倒人染色缸中,用1 MNaOH调pH至7.0左右,用水浴加温至37℃。(3)将玻片标本投人胰蛋白酶溶液中,不断轻轻地摆动2一3分钟左右。(D取出玻片标本,直立于吸水纸上数秒钟,…     

胞松素B对黑麦花粉母细胞减数分裂后期染色体运动的影响

De la Pena and Puertas(1978)发现早、中和晚偶线期接种的黑麦花药,在含有抗微管试剂秋水仙素(1mg/ml)的培养基上培养16—24小时以后,部分花粉母细胞显示出秋水仙素效应的有丝分裂(C-mitosis)特征,他们称之为秋水仙素效应减数分裂(C-meiosis)。我们在研究抗微丝试剂胞松素B(cytochatasin B)对黑麦花粉母细胞发育的影响时,也观察     

植物细胞多倍体诱导实验方法的改进

从植物多倍体诱导实验材料处理的方法上,介绍了改进植物多倍体诱导实验的技术,提高了多倍体细胞的分裂指数。实验用0．1％和0．01％浓度的秋水仙素溶液分别处理大蒜根尖24h、36h、48h、72h,进行多倍体诱导,再在清水中分别培养0h、12h、24h、36h,结果表明经清水培养的多倍体细胞分裂指数高于对照：0．01％浓度的秋水仙素处理的多倍体细胞分裂指数高于0．1％多倍体细胞分裂指数。     

化学辅助去核法对绵羊卵母细胞去核率和重构胚发育率的影响

为提高绵羊体细胞核移植的效率,本研究采用一种新的去核方法—化学辅助去核法,对绵羊体外成熟的卵母细胞进行去核,研究了化学诱导剂秋水仙素的处理浓度、作用时间、卵母细胞的成熟时间对去核效果及重构胚发育的影响。结果表明:1)卵母细胞在0.4μg/mL的秋水仙素溶液中分别孵育0.5h和1h,胞质突起率和去核率没有显著的差异,突起率可高达85.4%,去核率达到100%;2)0.2μg/mL或0.4μg/mL秋水仙素溶液将卵母细胞处理0.5h,对去核效果没有显著影响;3)对于体外成熟18～23h的卵母细胞,随着成熟时间的延长,盲吸法的去核率降低,但没有影响秋水仙素诱导胞质突起的比率和去核率;4)两种去核方法对重构胚的发育没有产生显著影响,但成熟21～23h卵母细胞重构胚囊胚的发育率显著高于成熟18～20h卵母细胞重构胚囊胚的发育率。综上所述,本试验优化了绵羊卵母细胞化学辅助的去核程序,利用化学辅助去核法对高卵龄的绵羊卵母细胞进行去核,提高了去核率和重构胚的体外发育率。     

小鼠骨髓细胞的染色体制备

在实验教学中,我们借鉴有关方法,经过多次实践,证明用小鼠骨髓细胞作动物染色体的制备实验,方法简便可靠,结果明显.现介绍如下,供高等院校或中学生物学实验参考. 1.前处理实验用小白鼠(重25克左右),腹腔注射0.1毫升0.1％的秋水仙素溶液. 2.取材注射后2.5—3小时,用乙醚将小鼠麻醉(或直接处死小鼠),立即取出股骨,剔净肌肉. 3.低渗用剪刀将股骨两端剪开,用注射器吸入1毫升0.05M氯化钾低渗液,插入一端,冲洗出骨髓细胞,滴于培养皿中的载玻片上(载玻片置于二根玻棒之上).再加入适量的低渗液,并用滴管展开.盖上培养皿,在37℃下低渗处理20分钟. 4.固定低渗后,往培养皿中缓缓注入甲醇、冰醋酸固定液(3:1),盖上培养皿,固定100分钟.换入无     

何首乌同源四倍体的诱导及生理指标的测定

用秋水仙素诱导何首乌(Polygonum multiflorumThunb.)同源多倍体的最佳条件为用0.2%秋水仙素溶液处理其试管苗幼嫩顶芽36 h,并接种于含2.0 mg.L-16-BA和0.2 mg.L-1IAA的MS启动培养基上。对诱导出的多倍体株系进行染色体计数分析,结果表明,诱导产生的多倍体均为四倍体,染色体基数2n=4x=44。生理指标测定结果表明,何首乌同源四倍体株系试管苗的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和黄嘌呤氧化酶(APX)活性及叶绿素含量等指标均高于二倍体株系。     

野生南荻与芒杂种多倍体诱导研究

用不同浓度秋水仙素处理野生南荻×芒(Miscanthus lutarioriparia×Miscanthus sinensis)远缘杂交后代以诱导产生多倍体,并对变异株进行形态学和细胞学鉴定,以期获得稳定的四倍体植株并分析其生理特性。结果表明:(1)采用秋水仙素加入培养基处理法和秋水仙素溶液浸泡处理法都可获得一定频率的多倍体植株;胚性愈伤组织以0.2%秋水仙素浸泡处理48h的诱变效果较好,四倍体诱导率达8.7%;芽在0.05%秋水仙素培养基中处理15d较好,四倍体诱导率达10.6%;生根苗在0.1%秋水仙素培养基中处理10d较好,四倍体诱导率达11.1%。(2)经体细胞染色体计数,加倍植株染色体数为2n=4x=76,对照植株的染色体数目为2n=2x=38。(3)生长2年的多倍体植株形态、叶片大小、茎粗、茎壁厚、节间等性状表现出巨大性和超亲优势。     

秋水仙素诱发的产普鲁兰出芽短梗霉的变异性

基础培养基中添加秋水仙素可提高出芽短梗霉的变异频率。将０．３％的秋水仙素溶液作用时间从５天延长到９天时,所产生的活性变异株数目相对减少。某些变异林有较高的合成普鲁兰（ｐμｌ）的能力,但与出芽短梗霉倍数性的提高无关。