Lpa-miR-nov-66拮抗IGF1促羊驼黑色素细胞黑色素生成及细胞迁移作用

胰岛素样生长因子1（IGF1）能够促进细胞迁移。我们最近的研究发现,一种新发现的miRNA（lpa-miR-nov-66）可通过靶向抑制可溶性腺苷酸环化酶（soluble guanylate cyclase,sGC）抑制黑色素细胞产生黑色素。然而,当二者联合作用于黑色素细胞时,究竟如何影响黑色素细胞的黑色素产生及细胞迁移尚未见报道。本研究证明,lpa-miR-nov-66可拮抗IGF1的促黑色素细胞的黑色素生成及促细胞迁移作用。ELISA法检测结果揭示,与单纯IGF1处理比较,过表达lpa-miR-nov-66或过表达lpa-miR-nov-66联合IGF1处理可明显降低IGF1诱导羊驼黑色素细胞的cAMP生成水平。实时定量PCR和Western印迹证明,与单纯IGF1处理比较,过表达lpa-miR-nov-66或联合处理可明显降低毛色生成相关基因--MITF、TYR、和TYRP1在黑色素细胞的表达。此外,细胞增殖和细胞划痕实验显示,与单纯IGF1处理比较,过表达lpa-miR-nov-66或联合处理可显著抑制黑色素细胞的迁移。上述结果表明,lpa-miR-nov-66可以减少cAMP产生,抑制IGF1的促黑色素细胞产生黑色素的作用,并抑制IGF1对黑色素细胞增殖和迁移的促进作用。     

人类细胞培养和染色体标本制作中几个值得注意的问题

目前,国内大多数开展人类细胞培养和染色体标本制作的实验室已有了一套比较固定的方法,但是少数刚开始工作的实验室常常会碰到这样或那样的问题。本文就有关问题作些分析,并提出一些解决问题的措施。 1.染色体分裂相少这种情况是大多数刚开展这项工作的实验室最常见的问题,是由于培养基的质量所引起的。在人血细胞培养中所用的培养基通常由三种主要成分组成:一种是血清;一种是综合人工营养液;另一种是PHA(植物凝血素)。PHA可在配制培养基时加入其内,也可临时按比例     

产前经腹灰阶联合彩色血流超声多参数对胎盘植入性疾病的诊断效能研究

摘要 目的：探究产前经腹灰阶联合彩色血流超声多参数对胎盘植入性疾病的诊断效能。方法：2019年11月-2021年12月于我院收治的产前超声诊断为前置胎盘的孕妇共计62例,其中44例超声诊断合并了胎盘植入的孕妇。所有孕妇产前均进行经腹灰阶检查、经腹彩色超声检查和二者联合检查胎盘植入性疾病,通过分析胎盘植入性疾病筛查结果,评价产前超声经腹灰阶联合彩色血流超声多参数对胎盘植入性疾病的筛查效能。结果：（1）通过灰阶超声诊断检出胎盘植入的灵敏度为73.42 %,特异度为86.54 %;（2）通过彩色超声诊断检出胎盘植入的灵敏度为76.89%,特异度为89.07 %;（3）经腹灰阶联合彩色血流超声多参数诊断检出胎盘植入的灵敏度为87.79 %,特异度为90.36 %;（4）经腹灰阶检查、经腹彩色超声检查和二者联合检查对胎盘植入性疾病筛查阳性率分别为56.45 %、62.90 %和67.74 %,二者联合检查对产前胎盘植入性疾病筛查阳性率显著高于经腹灰阶检查和经腹彩色超声检查（P<0.05）。（5）二者联合检查的敏感度为72.26 %,特异度为90.54 %,阳性比为95.55 %,诊断比值比为78.89 %。结论：产前经腹灰阶联合彩色血流超声多参数对胎盘植入性疾病的诊断有较高的灵敏度和特异度,值得临床推广应用。     

超声多参数在预测妊娠期糖尿病巨大儿分娩方式中的临床价值

摘要 目的：探究超声多参数在预测妊娠期糖尿病巨大儿分娩方式中的应用价值。方法：选择2016年2月至2020年9月于中国人民解放军联勤保障部队第九○一医院（我院）分娩的156例妊娠期糖尿病产妇为研究对象,回顾性分析其一般临床指标及多普勒超声检测参数,按照新生儿是否为巨大儿区分为巨大儿组（52例）和非巨大儿组（104例）,对比两组胎儿超声参数差异,评估胎儿双顶径（biparietal diameter,BPD）、头围（head circumference,HC）、腹围（abdominal circumference,AC）及股骨长度（femur length,FL）与新生儿体重的相关性,纳入年龄、宫高、孕妇腹围、孕妇体重、BPD、HC、AC、FL等指标评估巨大儿单因素影响因素,最后多因素Logistic回归分析探究巨大儿独立危险因素。结果：（1）比较显示巨大儿组胎儿BPD、HC、AC和HL均大于非巨大儿组（P<0.05）;（2）Spearman相关性分析显示BPD、HC、AC和HL均与新生儿体重呈正相关（P<0.05）;（3）分析显示产妇宫高、产妇腹围、孕期增重、BPD、HC、AC和HL均为巨大儿单因素影响因素（P<0.05）;（4）Logistic多因素回归分析显示孕妇宫高、BPD、HC、AC为巨大儿独立危险因素。结论：孕期使用超声多参数对妊娠期糖尿病产妇巨大儿发生情况具有较好的预测价值,可协助医师了解胎儿相关指标,并据此选择合适的分娩方式,值得临床推广应用。     

IGF1和IGF1R在小鼠第一个毛囊生长周期皮肤的表达

毛囊生长周期中,真皮乳头和毛基质间的基质 上皮信号调控细胞的增殖和分化。多功能细胞调控因子胰岛素样生长因子1（IGF1)是该信号路径的成员之一。第1个毛囊生长周期决定着毛囊的正常生长和发育,但IGF1在此期的作用未见报道。实时荧光定量PCR结果显示,IGF1在生长期皮肤中的相对表达量最低,在退化期表达量最高,在静止期表达量又降低。与生长初期相比,IGF1在退化期和静止期的表达量呈差异极显著（P＜0.01）;胰岛素样生长因子1受体（IGF1R）在生长期皮肤中的相对表达量最高,在退化期表达量最低,而在静止期表达量又升高。与生长初期相比,IGF1R在退化期和静止期的表达量呈差异极显著（P＜0.01）。Western 印迹结果显示,IGF1和IGF1R蛋白在小鼠皮肤第1个毛囊生长周期各阶段的表达趋势分别与其mRNA的表达趋势一致;免疫组织化学结果表明,IGF1主要分布在小鼠表皮,而IGF1R免疫阳性在小鼠毛囊毛球部、内外根鞘和毛乳头均有分布。以上实验结果揭示,IGF1和IGF1R在小鼠皮肤第1个毛囊生长周期的各阶段的差异性表达,可能在毛囊生长周期各阶段的转化过程中参与了黑色素的形成。然而,IGF1和IGF1R表达趋势不一致,提示IGF1在小鼠皮肤中发挥作用时,并非只与IGF1R结合才能发挥作用。     

干旱胁迫下转ClNAC9基因露地菊品种‘纽9717’叶片光合及叶绿素荧光特性的比较

对干旱胁迫0~15 d露地菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)品种‘纽9717’(‘Niu 9717’)野生型和3个转ClNAC9基因株系(ClNAC9-5、ClNAC9-6和ClNAC9-13株系)叶片的叶绿素含量、光合参数和叶绿素荧光参数进行了比较和分析。结果表明:干旱胁迫0~15 d,野生型和3个转ClNAC9基因株系叶片中叶绿素含量总体上呈先升高后降低的变化趋势。与干旱胁迫0 d相比较,除初始荧光(F_o)和非光化学淬灭系数(qN)外,干旱胁迫15 d时3个转ClNAC9基因株系叶片的叶绿素含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)、最大荧光(F_m)、可变荧光(F_v)、PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)、PSⅡ潜在光化学活性(F_v/F_o)和光化学淬灭系数(qP)的降幅均小于野生型。总体上看,干旱胁迫15 d,3个转ClNAC9基因株系叶片的叶绿素含量、Pn、Gs、Tr、WUE、F_m、F_v、F_v/F_m、F_v/F_o、qP和qN值显著高于野生型,而F_o值显著低于野生型。研究结果显示:将ClNAC9基因转入露地菊品种‘纽9717’可以增强该品种对干旱胁迫的耐受性,其中,ClNAC9-5和ClNAC9-6株系对干旱胁迫的耐受性较强,ClNAC9-13株系对干旱胁迫的耐受性较弱,但均强于野生型。     

动物骨髓细胞染色体标本制片法

本文介绍一种染色体制片方法,是把秋水仙素直接加入到骨髓冲液中,不需要注入动物腹腔,可节省时间,获得良好的效果。 1.取材实验课时将家兔或小白鼠处死,取出剥净肌肉的股骨,剪去两端,用带6号针头的5ml注射器吸取0.85%NaCl溶液3ml,冲洗骨髓腔数次,将骨髓细胞冲至10ml刻度离心管内,再加1ml0.1%的秋水仙素溶液,用吸管混均置37℃温箱或水浴锅内温浴05-1小时。     

lpa-miR-nov-66通过调控cAMP路径抑制α-MSH介导的羊驼黑色素生成

α-黑素细胞刺激素(α-MSH)和lpa-miR-nov-66在羊驼黑色素细胞产生黑色素过程中均起重要的调控作用,但二者之间的关系尚未报道.本研究在体外培养的羊驼黑色素细胞中通过转染lpamiR-nov-66和添加α-MSH处理,用实时定量PCR和Western印迹检测黑色素细胞内基因表达水平,ELISA法检测c AMP和cGMP的产量,RTCA实时无标记细胞功能分析黑色素细胞增殖以及紫外分光光度法检测黑色素产量,证实二者在调控羊驼黑色素细胞产生黑色素颗粒过程中的关系.结果显示,与单纯α-MSH处理相比,lpa-miR-nov-66转染结合α-MSH处理组中,小眼转录因子(MITF)和酪氨酸酶(TYR)在转录水平和翻译水平的表达均降低,而酪氨酸酶相关蛋白2(TYRP2)在转录和翻译水平的表达均升高;cGMP的产量升高,cAMP的产量下降;黑色素细胞增殖没有显著变化;黑色素细胞内黑色素产量下降.与单纯转染lpa-miR-nov-66相比,lpa-miR-nov-66转染结合α-MSH处理组中,MITF、TYR和TYRP2在转录水平和翻译水平的表达均升高;cGMP的产量下降,cAMP的产量升高;黑色素细胞增殖没有显著变化;黑色素细胞内黑色素产量升高.上述结果证明,lpa-miR-nov-66通过调控羊驼黑色素细胞中毛色形成的c AMP路径,抑制α-MSH对黑色素细胞产生黑色素的促进作用.     

蚊子有丝分裂染色体标本快速制片法

蚊子的染色体标本以往多采用组织培养方法制得.这种方法虽然效果较好,但是一般实验室,尤其是中学实验室难巳做到.本文介绍一种简便、快速的制作蚊子染色体标本的方法,同样能获得令人满意、分散良好的染色标本.方法:1、采卵:采集自然产或实验室喂养产的卵均可(库蚊属至少5块,伊蚊或按蚊属至少50粒).2、将采集的卵于室温下静置8-10小时后放入一支10ml锥形离心管内,加1毫升0.1%的秋水仙素溶液(秋水仙素溶液用0.60%生理盐水配制).