蝴蝶兰无菌萌发技术的研究

研究了蝴蝶兰的种子无菌萌发技术。结果表明120d的蒴果已达生理上的成熟,在KC、1/2MS、花宝1号基本培养基上分别附加香蕉汁、苹果汁、胰蛋白胨能较好地萌发,萌芽率为85%。9g·L-1琼脂、pH5.2～5.4、不添加植物生长调节剂有利于种子萌发。附加1mg·L-1KT+0.1mg·L-12,4-D有利于类原球茎状体PLB的诱导,附加1mg·L-1NAA+1～3mg·L-1KT或3～5mg·L-1BA有利于PLB的增殖。1/2MS、花宝1号基本培养基上附加香蕉汁、苹果酸、胰蛋白胨和活性炭有利于生根和幼苗生长。     

圆瓣姜花种子胚的组织培养与快速繁殖

采用广西百色地区野生圆瓣姜花的种子胚作外植体,成功地进行了离体组织培养与快速繁殖,建立了高频率的丛芽繁殖体系。实验结果表明:诱导种子胚萌芽的最适培养基为MS附加1.0mg·L16BA和0.2mg·L1NAA;在MS+6BA4.0mg·L1+NAA0.2mg·L1的培养基上最有利于诱导丛芽及增殖,芽的增殖系数达到5.28;1/2MS+IBA0.5mg·L1培养基最易诱导生根,生根率达97.7%。     

铁皮石斛快速繁殖和离体种质保存的研究

对铁皮石斛种子发芽、原球茎增殖、丛芽分化和壮苗培育进行了试验、观察和分析,研究了培养基、植物激素、光强和添加剂等对其分化和生长的影响。结果显示种子在1/2MS+蔗糖2%的培养基上,30d萌发95%以上。原球茎在1/2MS+椰子汁25%+蔗糖3%的培养基上,45~60d原球茎增殖速度可达1∶10。丛芽分化较适宜的培养基为1/2MS+BA2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+蔗糖3%,45~60d芽丛增殖速度为1∶4~5。试管苗在MS+香蕉泥20%+蔗糖2%培养基上,大约60d苗快速长高,茎粗壮且根系发达。离体保存材料可采用试管丛芽和原球茎两种方式,以保持其遗传多样性。保存方法是在15℃左右条件下,保存离体材料,继代间隔期为12~18个月;也可以采用室温保存,在1/2MS+蔗糖1%培养基上,继代间隔期可延长至10~12个月。     

金线兰种子萌发及其原球茎的增殖培养

研究了影响金线兰种子非共生萌发的因素,并应用正交试验研究基本培养基、6-BA、ZT、NAA四种因素对原球茎增殖的作用。结果表明:授粉类型对金线兰种子非共生萌发影响较大,异株异花、同株异花以及同株同花授粉所得的种子的萌发率分别为78.53%、69.62%、39.87%;蒴果成熟度以生长150d为宜,采收后萌发率可达78.59%;冷藏影响种子的活力,种子的萌发率随冷藏时间的延长而降低;使用次氯酸钠浸泡后的种子与对照相比,其萌发率无明显差异;NAA对原球茎增殖作用显著,适宜于原球茎增殖的培养基为1/2MS+ZT0.5mg/L+NAA1.0mg/L。     

土人参茎尖培养和植株再生

1　植物名称　土人参 (Talinumpaniculatum)。2　材料类别　实生苗之茎尖 ,种子取自本校花圃。3　培养条件　种子萌发培养基 :( 1 ) 1 /2MS +0 .7%琼脂 + 2 %蔗糖。丛生芽诱导培养基 :( 2 )MS + 6 BA 0 .5mg·L- 1 (单位下同 ) ;( 3)MS +NAA0 .5 + 6 BA 2 .0 ;( 4 )MS +NAA 0 .5 +KT 2 .0 ;( 5 )MS+NAA 0 .5 + 6 BA 3.0。丛生芽增殖培养基 :( 6)MS + 6 BA 2 .0 ;( 7)MS +NAA 0 .0 5 + 6 BA 3.0。生根培养基 :( 8) 1 /2MS +NAA 2 .0。上述 ( 2 )～ ( 8)培养基均附加 30 g·L- 1 蔗糖、7g·L- 1 琼脂 ,pH 5 .8。培养室温…     

墨兰的组织培养和快速繁殖

1植物名称墨兰品种企黑（Cymbidiumsinensecv．Qihei）和白墨（C。sinensecv．Baimo）。2材料类别墨兰种子于培养基中萌发后产生的原球茎。3培养条件（1）种子萌发培养基：1／2MS十适量琼脂;（2）芽分化培养基：1／2MS＋6－BA5．0mg·L－1（单位下同）＋NAA0．5十椰汁50ml·L－1;（3）转瓶培养基：1／2MS＋6－BA2．0＋NAA1.0＋5％活性炭。培养基中加3％蔗糖,0．8％琼脂,PH5．5。培养温度25±2℃,光照强度2W·m－2,每天光照10h。4生长与分化情况4．1种子萌发形成原球茎墨兰葫果以70％酒精消毒15min,在无菌条件下取出种子置…     

香叶天竺葵的组织培养和快速繁殖

1　植物名称　香叶天竺葵 (Pelargonium grave olens)。2　材料类别　无菌萌发的种子苗。3　培养条件　种子萌发培养基 :( 1 )MS。分化培养基 :( 2 )MS + 6 BA 0 .5mg·L- 1 (单位下同 ) ;( 3)MS + 6 BA 0 .5 +NAA 0 .1 ;( 4 )MS + 6 BA 1 .0 ;( 5 )MS + 6 BA 1 .0 +NAA 0 .1。壮苗培养基 :( 6)MS + 6 BA 0 .5 +GA 1 .0。生根培养基 :( 7)1 /2MS +IBA 1 .0 ;( 8) 1 /2MS +IBA 0 .5 +NAA0 .1 ;( 9) 1 /2MS +IBA 0 .2 5。以上除生根培养基外均加入蔗糖 30 g·L- 1 ,生根培养基加蔗糖 1 0 g·L- 1 ,琼脂 6g·L- 1 ,pH 5 …     

沙枣组织脱分化培养与快繁体系建立的研究

研究了以沙枣的种子为外植体诱导形成愈伤组织以及植株再生的过程,对培养中出现的愈伤组织和不定芽的类型进行了探讨。通过正交试验及单因素试验方法,确定了沙枣快繁体系的最适培养方案：①诱导材料：苗期为10 d的沙枣无菌苗子叶;②有效愈伤组织诱导培养基：MS+NAA 0.5 mg·L^-1+BA 2.0 mg·L^-1+3%蔗糖;③有效芽的分化培养基：MS+NAA 0.1 mg·L^-1+BA1.0 mg·L^-1+3% 蔗糖;④壮苗培养基：MS+NAA 0.1mg·L^-1+BA 1.0 mg·L^-1+GA 30.2 mg·L^-1+3%蔗糖;⑤生根培养基：1/2MS+ABT生根粉（1号）1.0 mg·L^-1+1.5%蔗糖。     

大花斑叶兰种子无菌萌发及快繁技术研究

对大花斑叶兰（Goodyera biflora）成熟种子无菌萌发、原球茎分化及根诱导进行了研究。结果表明：黑暗或弱光照培养有利于大花斑叶兰种子萌发,而较强的光照对形成健壮的原球茎有利;1/2MS＋NAA0.2mg/L培养基较为适合大花斑叶兰种子的萌发;MS＋KT1.0mg/L＋NAA0.5mg/L＋活性炭2.0g/L对原球茎增殖形成类原球茎有较好效果;1/2MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.5mg/L＋2.0g/L活性炭对根诱导效果较为理想。     

橙黄玉凤花种子萌发培养及小苗组培快繁研究

对橙黄玉凤花Habenaria rhodocheila种子进行无菌萌发培养以获得大量原球茎,并对原球茎组培,建立其快繁体系。结果表明,橙黄玉凤花种子以0.1%升汞消毒15 min为最佳处理。种子萌发培养基中,添加0.2%活性碳(AC)有利于种子萌发。种子萌发的最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.5 mg·L-1＋AC 0.2%,原球茎增殖分化最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.2 mg·L-1＋ZT 3.0 mg·L-1＋AC 0.2%;生根最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.1 mg·L-1＋6-BA 2.0 mg·L-1＋AC 0.2%。     

矮晚柚的组织培养与快速繁殖

以矮晚柚种子萌发的无菌苗为实验材料,利用茎尖和上胚轴诱导丛生芽的发生,利用丛生芽获得再生植株。实验表明:矮晚柚成熟和未成熟种子在1/2MS、MS上均能萌发,萌发率最高可达96%,成熟种子萌发的无菌苗更利于后期的分化。最适外植体为无菌苗的上胚轴,筛选出丛生芽最佳增殖培养方案为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+靠近茎尖上胚轴,最高增殖系数达8.4,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+活性炭0.2 g·L~(-1),生根率达90%以上。移栽至蛭石+珍珠岩+营养土(1:1:2)的营养砵上,成活率可达80%。     

香叶天竺葵的组织培养快速繁殖

以香叶天竺葵的叶片和叶柄切段为外植体诱导愈伤组织,经过芽诱导、生根诱导等过程成功获得了香叶天竺葵的再生植株。对香叶天竺葵芽的诱导、芽的继代增殖、根的诱导及再生植株移栽等环节进行了优化,在对比研究过的各种培养基中,MS+0.2mg·L-1NAA+0.75mg·L-1BA为最适宜的芽诱导和增殖培养基,芽诱导率达30%,不定芽增殖频率也高于其它培养基;1/2MS+0.2mg·L-1NAA最适于进行生根诱导,生根率高达92%,在该培养基中诱导生根,再生植株的根和芽均显示出较好的长势,移栽成活率也高。该项研究为香叶天竺葵的工厂化大规模育苗提供了依据。     

多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究

以多花兰种子为材料,研究了无机盐浓度、植物生长调节剂和光照条件对多花兰种子非共生萌发的影响,在此基础上,通过研究原球茎增殖和分化、芽苗壮苗和生根的培养基配方及培养条件,建立多花兰组培快繁技术体系.结果表明:多花兰种子萌发培养基为1/6 MS十NAA0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg· L-1+马铃薯泥50g·L-1+AC 1.0g·L-1,光照度为1.25μmol·m-2·s-1,萌发率63.6％;原球茎增殖继代培养基为1/4 MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg· L1+AC 1 g·L-1+PE 200 g·L-1,繁殖倍数6.5倍/60 d,芽分化率60.2％;再生芽分化培养基为1/4 MS十6-BA2.0mg·L-1+NAA 0.2 mg· L-1+AC 1 g·L-1+PE 200g· L-1,繁殖倍数4.0倍/60 d,芽分化率85.0％;芽苗壮苗和生根培养基为1/6 MS+6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+AC 1 g·L-1+蔗糖20g·L-1 +PE 200 g·L-1和1/4 MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA1.2 mg·L-1+AC1 g·L-1十蔗糖20g·L-1+PE200g· L-1,生根率达100％,生根苗移栽成活率90％.此技术可用于多花兰种苗繁育和种质资源保护.     

刺五加组培快繁的研究

以刺五加腋芽为外植体,通过比较不同的基本培养基（WPM、MS、1/2MS、White）和植物生长调节物质（6-BA、NAA、IAA、IBA）的组合对腋芽诱导、增殖及生根的影响,来建立一套高效的离体芽再生体系。试验结果表明,最佳芽再生培养基为WPM+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,芽萌发率可达90%;最佳芽增殖培养基为WPM+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1,增殖倍数为4.8;最佳生根培养基为White+IBA 0.5 mg·L^-1+IAA 1.5 mg·L^-1,生根率可达85.2%。     

濒危植物紫斑牡丹胚离体培养

以MS为基本培养基 ,添加不同浓度的BA、NAA及其组合 ,对濒危植物紫斑牡丹的胚进行体外培养。实验结果显示在没有添加任何激素的培养基上 ,离体胚生长类似种子萌发时胚的生长模式 ,子叶扩大伸长 ,达到约种子大小时停顿 ,根伸长生长极其显著 ;BA促进子叶膨大生长 ,当BA浓度增大时根生长受到抑制 ;NAA促进愈伤组织形成 ,抑制根生长。 0 .1mg·L- 1BA促进紫斑牡丹胚的胚轴、根生长 ,有利于幼苗形成。     

Expression of phenylalanine ammonia-lyase gene during tracheary-element differentiation from cultured mesophyll cells ofZinnia elegans L.

Expression of the phenylalanine ammonialyase (PAL) gene during tracheary-element differentiation was studied in mesophyll cell-suspension cultures ofZinnia elegans. Dose-response curves of benzyladenine (BA) and α-naphthaleneacetic acid (NAA) were obtained for the cultures in order to achieve the highest percentage of differentiation. The optimal concentrations of BA and NAA were 0.1 mg·l^-1 and 0.06 mg·l^-1, respectively, which normally stimulated about 40% differentiation by 96 h of culture. The effects of the same ratio but different amounts of BA and NAA on tracheary-element formation have been tested and the results indicate that the absolute amounts of BA and NAA rather than the ratio of them were important for tracheary-element formation in theZinnia cultures. The cells when cultured in the presence of 0.001 mg·l^-1 of BA and 0.06 mg·l^-1 of NAA expanded and divided but did not differentiate. The level of PAL activity, synthesis of PAL protein and the level of PAL mRNA peaked during 72 to 96 h when lignin was actively deposited. This indicated that the PAL gene was temporally and preferentially expressed in association with the lignification during tracheary-element differentiation and thus it can be regarded as a molecular marker for the process. We thank Bejing Agricultural University, the Lundgren Research fund (University of Cambridge) and an ORS award for financial support.     

龙脑樟(Cinnamomum camphora)组培快繁与苗木工厂化生产技术研究

选取龙脑含量高的优良单株,以其树干基部的幼嫩萌条为外植体开展龙脑樟组培快繁技术研究。结果表明：以改良MS+BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1为芽诱导培养基,诱导率为93%;最佳增殖培养基为改良MS+BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.05 mg·L^-1,增殖系数为5.57,生长周期为30 d;适宜的增殖培养条件为温度25℃,光照强度3 000 lx,光照时间11 h,不定芽长势良好;最佳生根培养基为1/2改良MS+IBA 0.5 mg·L^-1+IAA 0.4 mg·L^-1+蔗糖20 g·L^-1,生根率可达97.3%,生根条数为3～5条,生根时间为12 d;以草炭+珍珠岩(3∶1)为移栽基质,成活率可达86.2%。通过试验总结出一套组培快繁技术体系,可应用于龙脑樟组培苗工厂化生产。     

防风种子发芽特性及促进发芽的试验研究

防风种子发芽率和发芽势均较低,其主要原因包括个体之间的差异及物种特性。种子发芽率较低首先表现在个体发芽率上的差异,试验所用15株防风发芽率从28.0%到92.0%,从整体 上表现发芽率较低。防风本身发芽率低,由于物种因素,种子刚刚采收后的休眠,个体之间解除休眠时间和进入衰老的时间不一致,致使所有的种子不能全部在同一时间进入发芽高峰,同时,防风发芽的启动日有所差异,15株防风启动日和发芽持续时间相差均为两周以上。采用5~50 mg·kg^-1 GA、1~10 mg·kg^-1 6-BA、1%KNO₃和3%H₂O₂可提高休眠防风种子的发芽率,GA、6-BA可除防风种子的休眠,而1% KNO₃和3% H₂O₂对解除休眠的种子无明显影响。采用多种微量元素,即10~100 mg·kg^-1 Mn²⁺、10 mg·kg^-1 Cu²⁺和1 mg·kg^-1 Mo对种子进行处理可显著提高防风种子的发芽率,提示在植株绿果期喷施该类元素也可提高防风种子的发芽率。采用GA、NAA处理幼果,也可以提高种子的发芽率。