孔雀绿定磷法测定植物NADP磷酸酶活性

AMethodofPhosphateDeterminationUsingMalachiteGreenFitfortheMeasurementofNADPPhosphataseActivityYANGWan-Nian,HEZhi－Chang（CollegeofLifeSciences,WuhanUniversity,Wuhan430072)NADP磷酸酶催化NADP水解生成NAD和磷酸：NADP＋H2O→NAD＋Pi。该酶与NAD激酶一起参与NAD和NADP水平的调节。其活性通过乙醇脱氢酶循环反应生成的NAD确定［1］。该方法虽然比较灵敏,但操作比较繁琐,反应条件不易控制。孔雀绿定磷法是一种灵敏度很高的测定无机磷的方法［2,3］已用于ATP酶［2,3,4］活性及钙调素含量[3]的…     

蚕豆叶肉原生质体电融合的研究

本文研究了蚕豆叶肉原生质体经透明质酸酶、核糖核酸酶、神经氨酸酶、碱性磷酸酶、胰蛋白酶、脂肪酶六种水解酶和SDS、Triton X-100、CTMAB三种表面活性剂以及秋水仙素、细胞松驰素B处理后的电融合过程。结果表明:胰蛋白酶处理后的原生质体融合率明显下降;碱性磷酸酶、脂肪酶以及核糖核酸酶、透明质酸酶、神经氨酸酶处理的原生质体电融合率均有不同程度的上升。Triton X-100和CTMAB促进原生质体的电融合,但较高浓度(0.01%)的SDS起抑制作用。秋水仙素和细胞松驰素B处理的原生质体其电融合率有较大幅度的增高。     

拟南芥中一种AtBAG4蛋白的抗体制备和特异性检测

以拟南芥AtBAG4的全长cDNA,构建pET-51780重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG可诱导融合蛋白高效表达,表达产物以可溶形式存在;经Ni-NTA层析柱分离纯化,可得到分子质量约为49kDa的PAGE纯蛋白。用纯化的融合蛋白pET-51780免疫家兔,可得到抗AtBAG4抗体。Western blot结果显示该抗体能特异识别原核系统内表达的抗原以及拟南芥自身的抗原。     

一种改进的烟草悬浮细胞继代方法

在植物细胞悬浮培养过程中,对影响细胞系均一性和质量的细胞团块形成的克服方式一般有2种。一是分级过滤继代,即用不同目数的细胞筛除去大的细胞团块和细胞碎片,将小细胞团和单细胞转移到新培养基中作继代培养。此方法操作     

香叶天竺葵的组织培养快速繁殖

以香叶天竺葵的叶片和叶柄切段为外植体诱导愈伤组织,经过芽诱导、生根诱导等过程成功获得了香叶天竺葵的再生植株。对香叶天竺葵芽的诱导、芽的继代增殖、根的诱导及再生植株移栽等环节进行了优化,在对比研究过的各种培养基中,MS+0.2mg·L-1NAA+0.75mg·L-1BA为最适宜的芽诱导和增殖培养基,芽诱导率达30%,不定芽增殖频率也高于其它培养基;1/2MS+0.2mg·L-1NAA最适于进行生根诱导,生根率高达92%,在该培养基中诱导生根,再生植株的根和芽均显示出较好的长势,移栽成活率也高。该项研究为香叶天竺葵的工厂化大规模育苗提供了依据。     

光敏胞质雄性不育小麦育性转换期叶片中NAD激酶和NADP磷酸酶的变化

由光敏感胞质雄性不育小麦育性转换敏感期叶片中NAD激酶和NAD磷酸酶的活性变化表明：在长光照（LD）处理下,光敏胞质雄性不育小麦（牡山羊草）白皮224在光敏感期,叶片中的NAD激酶总活性和钙调素非依赖性NAD激酶活性高于短日照处理。钙调素依赖NAD激酶则相反,在短日照（SD）条件下,其活性明显地高于LD处理。不育系在长日条件下钙调素依赖性和非依赖性NAD激酶活性的比例也发生了变化,其钙调素依赖性活性逐渐被钙调素非依赖性活性所取代。而可育系核供体白皮224在不同光照条件下,这类酶活性无明显的差异。至于NAD磷酸酶的活性变化,无论是光敏小麦成核供体白皮224在LD和SD下均呈下降趋势。     

光周期对穗花狐尾藻生长、开花与种子形成的影响

通过人工补光和遮光处理,初步研究了光周期对狐尾藻生长和开花的影响。研究发现:8h短日照条件不利于狐尾藻的生长和花序形成,导致狐尾藻不能正常开花和结实;与自然日照长度(平均日照14h)条件下相比,16h长光照条件可以增加植株的高度和分枝数,形成更大的生物量;但24h全光照条件对生长有抑制作用。长光照条件下,狐尾藻花序形成时间和开花时间均比自然条件下延迟,形成花序的数目也显著较自然条件下的少,但长光照条件下形成的种子比自然条件下形成的种子具有更高的萌发率。     

2,4-D和激动素对烟草愈伤组织IAA氧化酶和细胞分裂素氧化酶活性的影响

2,4-D和激动素(KT)均显著降低烟草愈伤组织中IAA氧化酶和细胞分裂素氧化酶的活性,KT的影响更显著.在MS中的愈伤组织IAA氧化酶活性最高,MS 2,4-D中的次之,MS KT和MS 2,4-D KT中的最低.愈伤组织在MS中继代6 d时,细胞分裂素氧化酶活性出现明显的高峰,在其它3种培养基中则没有.     

水稻光合日变化及光抑制的叶绿素荧光

研究了光敏核不育水稻(Oryza sativa L.)农垦58S(NK58S)的光合日变化和光抑制.06:00～09:00,NK58S的光抑制不明显,此时的光合功能下调以叶黄素循环为主;10:00～12:00,耗散比能流(DIo/RC)及光反应中心关闭净速率(dV/dto)增加,受体侧电子传递受阻(ψo下降),活性反应中心密度(Do)降低,NK58S光抑制加剧,PSⅡ反应中心发生失活.荧光暗弛豫分析与抑制剂处理结果表明,状态转换、叶黄素循环和PSⅡ反应中心失活均能有效保护NK58S免遭强光损伤.叶黄素循环相对于反应中心失活,前者是NK58S对强光胁迫的快速反应,在光强相对较弱时发挥主要作用,而后者在叶黄素循环达到饱和时对保护剩余活性反应中心起主要作用.     

钙调素激酶在玉米体内的免疫组织化学定位

应用免疫组织化学定位方法研究了玉米体内钙调素激酶(CaM kinase,CaMK)的表达模式。结果表明CaMK广泛分布于玉米体内,但表达水平存在着明显时空差异。在营养器官中钙调素激酶主要分布于叶的维管束鞘细胞、侧根原基和根尖等部位,而其它部位没有检测到明显的分布。在生殖器官中,有大量钙调素激酶分布于幼胚及花药小孢子母细胞、四分体及绒毡层细胞中;在成熟胚囊的卵细胞、中央细胞以及二者的分界面上也有少量分布。这些结果为进一步探索钙调素激酶在植物体内的生理功能提供了重要线索。