水稻病毒的吸收光谱和荧光光谱

本文报导水稻簇矮病毒(RBSV),水稻矮缩病毒(RDV),水稻东格鲁病毒(RTV),水稻齿矮病毒(RRSV)和水稻草矮病毒(RGSV)等的吸收光谱和荧光光谱.结果表明:不同病毒有不同的吸收光谱带和荧光光谱带.它包括主峰,各次峰及其轮廓.通过不同相对强度的光谱,可以判断其浓度.这些光谱可以反映病毒的某些结构信息.同时通过光谱也可以鉴别水稻病毒的类型.     

利用转hpRNA基因水稻抗水稻矮缩病毒

具有发夹结构的双链RNA(hairpin RNA,hpRNA)能高效诱导转录后基因沉默的发生.以水稻(Oryza sativaL.)矮缩病毒(RDV)基因组中第八片段编码区128～754 bp的序列为臂构建hpRNA,并克隆到植物表达载体pROK-2上.通过农杆菌介导的方法转化水稻"中花11".Southern blot分析表明,共获得12株阳性转化体.用带有RDV的叶蝉(Nephotettix cincticeps)接种Tl代转hpRNA水稻,结果表明转基因水稻对RDV具有高抗性或表现为症状延迟.而相同序列的有义链的转基因水稻和空载体的转基因水稻表现为典型的RDV侵染症状.HpRNA在转基因水稻中对RDV高抗性发挥重要作用.     

水稻条纹病毒胁迫下的水稻全基因组表达谱

水稻条纹叶枯病由水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)引起,对我国水稻生产危害严重.为了明确RSV侵染对水稻基因表达谱的影响,采用Affymetrix水稻全基因组芯片对RSV接种后出现条纹症状第7天的武育粳3号水稻病叶和相应的健康叶片进行了全基因组表达谱分析,得到3 517个差异基因,其中2 002个表达上调,1 515个表达下调.根据TIGR数据库注释(http://www.tigr.org/tdb/e2k1/osa1/)和MIPS基因功能分类标准(http://mips.gsf.de/projects/funcat)将差异基因归类为15个功能类别,多数差异基因与植物防御、信号传导及蛋白质、碳水化合物的代谢相关,一些转录因子的表达也发生了明显的变化.代谢途径分析表明,RSV侵染后磷酸戊糖途径、类黄酮合成途径和芸苔素合成途径的相关基因表达明显增强,赤霉素合成途径相关基因的表达受到了抑制.     

水稻条纹病毒研究进展

水稻条纹病毒引起的水稻条纹叶枯病在水稻种植区造成巨大的经济损失,有关病毒本身及抗病基因一直是近年研究的热点。根据近年的研究成果,综述在病毒的核酸、蛋白质、抗病基因及应用基因工程控制病害等方面的研究进展,并对利用抗病基因工程策略控制病害的应用前景进行了展望。     

水稻病毒与其宿主miRNAs相互作用的研究进展

miRNAs(micro RNAs)是真核生物中一类大小约为21 nt,并具有调控功能的非编码小分子单链RNA。miRNAs能够调控水稻基因的表达,对水稻的发育和生理机能至关重要。miRNA沉默途径可以抵御水稻病毒的入侵,减小病毒侵染带来的危害。然而,一些病毒也会编码各种针对miRNA沉默途径的沉默抑制子来对抗这种机制。于是,miRNAs和水稻病毒之间就形成了一种抑制与反抑制的动态平衡体系。现对水稻病毒与其宿主miRNAs之间的相互作用进行了系统的阐述,以期深入理解水稻病毒与宿主相互作用的机制并为水稻病害的防治提供新的思路与方法。     

水稻条纹病毒分子生物学及抗病基因的研究进展

水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)是水稻条纹叶枯病的致病原。综述了国内外对水稻条纹病毒的基因组结构、复制、转录、功能特点及抗水稻条纹病毒基因研究等方面最新研究进展。     

水稻条纹病毒p2与本氏烟柯浩体蛋白互作

水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)编码的p2蛋白能与纤维蛋白互作并协助病毒系统运动.纤维蛋白定位在核仁和柯浩体上,作为柯浩体指示蛋白的coilin也参与病毒侵染过程.本文通过亚细胞共定位和双荧光互补实验证明p2与本氏烟柯浩体蛋白Nbcoilin互作;病毒诱导基因沉默技术瞬时沉默基因Nbcoilin后不影响植株的生长发育和水稻条纹病毒的侵染.所获结果表明,Nbcoilin虽然能与p2互作,但不影响水稻条纹病毒的侵染.     

水稻矮缩病毒昆明分离物抗血清制备及免疫捕捉PCR检测

由水稻矮缩病毒(Rice dwarf viru S,RDV)引起的水稻矮缩病害,最早由日本报道,随后在东南亚等国以及我国的福建、云南等南方稻区普遍发生,云南主要发生于中部及南部地区[1].水稻在苗期至分蘖期感病后,植株矮缩,分蘖增多,叶片浓绿,僵直,出现白斑,生长后期病稻不能抽穗结实,在暴发流行年份可以引起水稻的严重减产.     

克隆培养水稻矮化病病毒cDNA

日本农林水产省农业生物资源研究所分子育种部基因构选研究室美浓部修三、农业研究中心病虫防治部病毒病防治研究室大村敏博等克隆培养水稻矮化病病毒 cDNA 获得成功。本实验在克隆培养水稻病毒 cDNA 方面是首创。这项研究为水稻病毒感染,发现病征的机构的分子生物学解剖开辟道路。水稻矮化病毒(RDV)是属于植物呼肠孤病毒组的病毒。以分成12片段的双链 RNA为基因,具有 mRNA 转录时必需的转录酶群。植物呼肠孤病毒多数情况下具有肿瘤衍生性。相反,RDV 的病征仅能使水稻矮缩。另外,还能在作为媒介昆虫的浮尘子体内增殖,且有     

水稻矮缩病毒基因组数据库的构建

二级数据库的构建是生物信息学新的重要领域。目前部分生物的基因组序列测定完成后,正在进行广泛而深入的结构和功能研究,使二级数据库的重要性显得日益突出。水稻矮缩病毒是一种在日本、中国和东南亚感染水稻的病原微生物,给农业生产造成很大损失。根据国际和国内对水稻矮缩病毒基因组的研究,利用已有的基因序列和结构、功能等方面的数据,以计算机网络为载体,参考国际通用数据库的格式,尝试建立一个简洁的、友好的通用性好而且专用性强的二级数据库：水稻矮缩病毒基因组数据库。希望能够为研究普通水稻矮缩病毒的粒子结构、基因表达调控、致病机理和防治方法提供一个良好的工具,为从事水稻矮缩病理论和应用研究的工作者提供方便和帮助,并为探索二级数据库的构建积累经验。     

水稻草矮病毒的研究进展

水稻是世界上最主要的粮食作物之一,其产量的稳定性直接关系到粮食安全和社会稳定。然而,自20世纪中叶起,由介体昆虫飞虱、叶蝉等传播的各种水稻病毒病的爆发,严重威胁着水稻产量。水稻草矮病(Rice grassy stunt disease,RGSV)由介体昆虫褐飞虱(Nilarparvata lugens)以持久增殖型方式传播,被病毒感染的水稻呈现植株矮化,分蘖增多,叶片黄化且带有锈斑等典型病害症状。围绕近年国内外关于RGSV的研究进展,本文对病毒粒子特性、常用检测方法、基因组结构及功能、症状形成机制探索和防治策略等方面进行了综述,并提出了RGSV研究过程中所涉及到的一些问题,以期为开展RGSV相关研究提供参考。     

开发抗水稻萎缩病病毒的重组水稻

北海道绿色生物技术研究所与北海道大学共同宣布,使导入水稻萎缩病病毒外壳蛋白的水稻再生成个体获得成功,现在正在鉴定病毒抗性。因此该研究所确立了水稻的基因操作技术,将来准备应用于该研究所瞄准的耐冷性水稻开发等。该研究所在这周(5月26日～28日)在盛冈市召开的日本植物病理学会上发表了这项研究的详细报告。京都大学农学部教授古泽严男等小组也与住友化学公司一起育成了重组了水稻     

水稻矮缩病毒非结构蛋白基因S6的表达和抗血清的制备

经RT-PCR扩增出水稻矮缩病毒(RDV)中国分离物非结构蛋白基因S6,并克隆至 pGEM-Teasy 载体上.序列分析表明该基因与日本株具有高度同源性,并且含有较高比例的稀有密码子.将S6基因克隆到表达载体pGEX-6P-1,并转化大肠杆菌,该基因在大肠杆菌以包涵体形式大量表达.以表达的融合蛋白作抗原免疫家兔,制备抗S6蛋白的抗血清,ELISA 测定表明,该血清与抗原共价特异性反应,抗血清的效价为13000. Western blot印迹实验表明该抗血清能特异性检测RDV感染的水稻组织中的S6蛋白,因而可作为感染RDV的水稻植株的分子手段.     

双链核糖核酸病毒的研究 Ⅲ.水稻普通矮缩病毒与家蚕细胞质多角体病毒间的免疫交叉反应

水稻普通矮缩病毒(RDV)的兔抗血清能分别与家蚕细胞质多角体病毒(CPV)颗粒及其双链RNA在免疫对流电泳中产生沉淀线。用水稻普通矮缩病毒的抗血清中和后的家蚕CPV的感染力与对照相比降低二个数量级。     

稻纵卷叶螟幼虫颗粒体病毒

稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)是我国水稻重要害虫之一。1979年秋,我们在广东省恩平县的晚造水稻田里,发现稻纵卷叶螟幼虫的一种流行性病毒病,死亡率达30—40%,虫口密度大的田块尤多。罹病幼虫表皮常出现黄色斑点,继而体色     

水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6的表达及其单克隆抗体的特异性分析

水稻矮缩病毒（RDV）的基因组包含12条双链RNA,其中基因组片段S6编码的非结构蛋白Pns6为该病毒的运动蛋白.在本研究中,在大肠杆菌中表达了N端融合His-tag的重组Pns6蛋白.在低温和低IPTG浓度的诱导后,通过Ni螯合亲和层析进行纯化获得了HisPns6蛋白.稳定性分析表明,HisPns6是一个稳定的蛋白,可耐受37℃下长达24h的处理.纯化的蛋白后续用于单克隆抗体的制备并得到18个杂交瘤细胞株系.使用从感染RDV的水稻叶片中提取的Pns6为样品,以健康水稻总蛋白为对照,通过Western blot法对抗体进行特异性分析,获得了15个阳性抗体.对其进行抗原决定簇分析表明,最敏感的抗原决定簇位于Pns6的C端区域（296~509位氨基酸）.该结果与生物信息学预测分析相吻合.     

水稻病毒激光喇曼光谱的初步探讨

本文初步探讨水稻病毒激光喇曼光谱,分析了谱线与病毒中核酸蛋白质结构的关系。确信应用激光喇曼光谱研究水稻病毒是具有信息量大、高灵敏及高分辨本领的。     

水稻瘤矮病毒P8蛋白的结构分析及其表达

为揭示水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白P8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具,对RGDV P8蛋白结构特征进行了生物信息学分析;同时将通过RT-PCR扩增的P8基因克隆到pGEX-4T-1上,构建pGP8转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),在IPTG诱导下表达。利用表达的融合蛋白免疫家兔,制备了抗血清,并以RGDV、水稻矮缩病毒(RDV)、水稻条纹病毒（RSV）、水稻锯齿叶矮缩病毒(RRSV)4种病毒作为供试材料进行特异性检测。分析显示P8蛋白在C端位置有一个典型的跨膜螺旋区,整个蛋白也具有Phytoreo P8家族共有的典型结构域Phytoreo P8 domain。SDSPAGE和蛋白印记分析表明,RGDV P8融合蛋白分子量约为73kDa,以包涵体的形式获得了高效表达。获得的效价高、特异性强的抗血清,为水稻瘤矮病毒的快速检测及P8蛋白的功能研究奠定了基础。     

水稻草矮病毒在水稻原生质体中的表达

通过建立水稻原生质体培养体系,经多聚鸟氨酸（PLO）介导将提纯的水稻草矮病毒（Rice grassy stunt virus,RGSV）接种到水稻原生质体内,利用酶联免疫吸附法（ELISA）及蛋白免疫印迹法（Western blot）,研究RGSV在水稻原生质体内的生长周期及其编码蛋白的表达情况。结果表明： RGSV在接种后24h左右开始在原生质体内复制,36h左右达到最大值。NS6在15h左右开始表达,在30h左右达到最大值。     

南方水稻黑条矮缩病毒快速检测

南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)引起的新水稻矮缩病近年在越南北部和我国南方各省爆发,准确快速地检测病毒是病害预测的关键。本文针对该病毒的S10序列设计了一对新的引物S10F/S10R,利用一步法RT-PCR,对2010年5~8月间湖南省下属各县送来的疑似感染该病毒引起的水稻矮缩病样本进行了检测,结果显示,新引物能有效地区分阳性样品和非阳性样品。同时对PCR产物进行了序列测定,结果表明序列均与已发表的南方水稻黑条矮缩病毒序列(登录号:EU523360和EU784840)达约99%的同源性。还在此基础上构建了系统发育树,发现SRBSDV湖南、广东和海南分离物病毒位于一个相对独立的分支。研究发现相对以往的巢式RT-PCR,本文采用的新引物及一步法RT-PCR能快速检测南方水稻黑条矮缩病毒,简化了操作步骤,缩短了检测时间,适合在SRBSDV检测和病害预测中应用。