促肾上腺皮质激素引起大鼠肾上腺c—fos原癌基因表达的免疫…

采用冰冻切片免疫组化法观察了注射促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ,７５Ｕ／ｋｇ）,胰岛素及正常对照大鼠中肾上腺务部分ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达产物Ｆｏｓ蛋白的出现和分布特点。结果表明注射ＡＣＴＨ后９０ｍｉｎ,大鼠肾上腺皮质网状带出现Ｆｏｓ蛋白染色阳性细胞,阳性染色物集中于细胞核,肾上腺皮质束状带仅见少数Ｆｏｓ蛋白染色阳性细胞,肾上腺髓质则未见Ｆｏｓ蛋白染色阳性细胞。与注射ＡＣＴＨ相反,注射胰岛素引起肾上腺髓     

癫痫模型大鼠海马原癌基因c-fos mRNA和蛋白质表达时程的研究

为了探讨癫痫发病机理与原癌基因的关系,将马桑内酯注入侧脑室,于大鼠癫痫发作后不同时间点取材海马,用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析技术对海马ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ和Ｆｏｓ蛋白表达的动力学进行了定量研究,激光扫描仪定量分析表明：（１）ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ在０．５ｈ表达最高,依次渐减,至４ｈ几无表达;（２）Ｆｏｓ蛋白在１ｈ开始表达,２ｈ最多,以后渐少。以上结果表明：ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ和Ｆｏｓ蛋白的表达随癫痫的发生发展出现规律性变化,ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ是快速,一过性表达,Ｆｏｓ蛋白的表达滞后且延长。提示：ｃ－ｆｏｓ在癫痫发病的基因机制中发挥作用,本文对此进行了讨论。本实验为深入研究癫痫发病的分子机制奠定了基础。     

血管紧张素II和阿片肽对Fos蛋白表达的影响

利用抗体免疫沉淀技术研究了血管紧张素ＩＩ,δ受体激动剂和ｋ受体激动剂对大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达的影响,结果表明,０．１μｍｏｌ／Ｌ ＡⅡ可显著刺激脑组织中Ｆｏｓ蛋白的表达,０．１μｍｏｌ／ＬＤＰＤＰＥ和０．１μｍｏｌ／Ｌ ＮＤＡＰ对Ｆｏｓ蛋白的表达亦有一定的诱导作用。ＡＩＩ与ＤＰＤＰＥ或ＮＤＡＰ共同处理组织,Ｆｏｓ蛋白表达水平低于ＡＩＩ单独诱导的水平,结果表明阿片肽可抑制ＡＩＩ对Ｆｏｓ蛋白     

四氯化碳损伤成年大鼠肝细胞后原癌基因（c－fos／c－jun）表达的观察

用四氯化碳（ＣＣｌ４）损伤正常大鼠后,采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法和免疫组化法观察肝细胞原癌基因（ｃ－ｆｏｓ／ｃ－ｊｕｎ）的表达。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法表明,当成年大鼠的静息期肝细胞受到ＣＣｌ４损伤性刺激后,ｃ－ｆｏｓ／ｃ－ｊｕｎ产物（Ｆｏｓ和Ｊｕｎ）水平升高,在ＣＣｌ４处理后３０ｍｉｎ开始升高,在４ｈ时消失。８ｈ后Ｆｏｓ／Ｊｕｎ再度出现,并持续２４ｈ以上。ＩＣＣ法表明,Ｊｕｎ阳性细胞为靠近肝中央静脉区的肝实质细胞。根据上述资料推测,肝受ＣＣｌ４损伤后肝细胞的原癌基因ｃ－ｆｏｓ／ｃ－ｊｕｎ出现即时的与滞后的两次表达,这与肝细胞进入细胞周期有关,这种基因表达也许可作为肝再生过程中识别特殊体液因子的标志。     

四氯化碳损伤成年大鼠肝细胞后原癌基因（c—fos／c—jun）表…

用四氯化碳（ＣＣｌ４）损伤正常大鼠后,采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法和免疫组化法观察肝细胞原癌基因（ｃ－ｆｏｓ／ｃ－ｊｕｎ）的表达。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法表明,当成年大鼠的静息期肝细胞受到ＣＣｌ４损伤性刺激后,ｃ－ｆｏｓ／ｃ－ｊｕｎ产物（Ｆｏｓ和Ｊｕｎ）水平升高,在ＣＣｌ４处理后３０ｍｉｎ开始升高,在４ｈ时消失。８ｈ后Ｆｏｓ／Ｊｕｎ再度出现,并持续２４ｈ以上。ＩＣＣ法表明,Ｊｕｎ阳性细胞为靠近肝中央静脉区     

胃肠道伤害性刺激诱导中缝背核触液神经元Fos表达

本文以ＣＢ－ＨＲＰ逆行追踪和原癌基因ｃ－ｆｏｓ表达技术相结合,观察胃肠道伤害性刺激后中缝背核触液神经元Ｆｏｓ的表达。在中缝背核发现三种标记神经元,包括ＣＢ－ＨＲＰ逆行标记神经元（３０８）、Ｆｏｓ阳性神经元（４２）和ＣＢ－ＨＲＰ／Ｆｏｓ双重标记神经元（５）。本研究提示中缝背核含有一些具有双重功能的神经元,它们既在脑－脑脊液神经体液回路中传递信息,又在胃肠道伤害性刺激的中枢传递和功能调控中起一定的作用     

对与缺失铁钼辅基的固氮酶钼铁蛋白重组的原子簇的结构要求

棕色固氮菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）钼铁蛋白与邻菲口罗啉和Ｏ２ 保温并经凝胶柱层析后,成为部分缺失Ｐ－ｃｌｕｓｔｅｒ和ＦｅＭｏｃｏ 的失活蛋白。由３ 个－ ＯＣＨ３－ 连结于Ｍｏ原子间的２ 个１Ｍｏ∶３Ｆｅ∶４Ｓ结构单位组成的原子簇与４Ｆｅ∶４Ｓ原子簇的混合液,以及由ＫＭｎＯ４、高柠檬酸铁、Ｎａ２Ｓ和二硫苏糖醇组成的重组液均可使这种失活蛋白明显恢复Ｃ２Ｈ２ 还原活性,但都不能使可被ＦｅＭｏｃｏ 激活的ｎｉｆＥ和ｎｉｆＨ 基因缺失突变种及ＵＷ ４５的Ａｐｏ－ＭｏＦｅ 蛋白得到激活。表明,不能合成ＦｅＭｏｃｏ 的固氮菌突变种蛋白只能与具有ＦｅＭｏｃｏ相似或基本相似结构的原子簇进行体外重组,而部分缺失金属原子簇的钼铁蛋白能与具有一定结构和组成的原子簇进行体外重组,变为具有催化氮还原能力的各种固氮酶组分蛋白。     

动脉平滑肌细胞sis／PDGF—B链的表达和调控

介绍平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链表达和调控的进展。ｃ－ｓｉｓ原癌基因是ＰＤＧＦ－Ｂ的同源基因,将外源的ＰＤＧＦ基因导入哺乳类细胞是研究ＰＤＧＦ功能和调控的重要手段。内皮素ＩＬ、ＴＮＦ、血管紧张素Ⅱ和蛋白激酶Ｃ可调节ｓｉｓ基因的表达。ｓｕｒａｍｉｎ和新霉素的人工合成为拮抗ＰＤＧＦ效应提供广阔的前景。ｃ－ｓｉｓ可通过激活ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｆｏｓ等原癌基因而促进细胞增殖。     

动脉平滑肌细胞sis／PDGF－B链的表达和调控

介绍平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链表达和调控的进展。ｃ－ｓｉｓ原癌基因是ＰＤＧＦ－Ｂ的同源基因,将外源的ＰＤＧＦ基因导入哺乳类细胞是研究ＰＤＧＦ功能和调控的重要手段。内皮素、ＩＬ、ＴＮＦ、血管紧张素Ⅱ和蛋白激酶Ｃ可调节ｓｉｓ基因的表达。ｓｕｒａｍｉｎ和新霉素（ｎｅｏｍｙｃｉｎ）的人工合成为拮抗ＰＤＧＦ效应提供广阔的前景。ｃ－ｓｉｓ可通过激活ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ等原癌基因而促进细胞增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠肾小球系膜细胞原癌基因c-fos和c-myc表达的影响

在建立大鼠肾小球系膜细胞（ＭＣ）体外培养方法的基础上,通过３Ｈ－ＴｄＲ参入实验,ＲＮＡ印迹分析和斑点杂交观察ｂＦＧＦ对ＭＣＤＮＡ合成及原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的影响．结果表明,ｂＦＧＦ作用于ＭＣ１８ｈ,ＭＣ的３Ｈ－ＴｄＲ参入率明显增加（Ｐ＜０．０５）,２４ｈ达到高峰（Ｐ＜０．０１）;ｂＦＧＦ显著诱导原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达,其表达活性分别于３０ｍｉｎ和１ｈ达到高峰．提示ｂＦＧＦ是ＭＣ的强效丝裂原,其对ＭＣＤＮＡ合成的促进作用与诱导原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达有关．     

钒铁蛋白的体外组装研究

棕色固氮菌固氮酶ＭｏＦｅ蛋白经邻菲罗啉在厌氧和有氧条件下处理后,成为部分缺失ＦｅＭｏｃｏ和Ｐ－ｃｌｕｓｔｅｒ的失活蛋白,用由钒酸钠,高柠檬酸铁、Ｎａ２Ｓ和二硫硫苏糖醇组成的溶液保温后,可使这失活蛋白变为重组蛋白。重组蛋白的ＣＤ谱除５５０－６５０ｎｍ与ＭｏＦｅ蛋白存在差异外,也能与其吸收光谱和对质子还原活性一样得到基本恢复,但对Ｃ２Ｈ２的还原活性却未得到明显恢复。表明,这种重组蛋白与ＭｏＦｅ蛋白有所     

缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元c-fos的表达及人重组白细胞介素-1β的影响

采用免疫组化方法,观察缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元ｃ－ｆｏｓ的表达及人重组白细胞介素－１β（ｒｈＩＬ－１β）的影响。结果显示,缺氧后海马神经元中Ｆｏｓ染色阳性胞核的百分率随缺氧时间的延长而显著增加。图像分析的结果显示,缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度亦随缺氧时间的延长而显著增加。经ｒｈＩＬ－１β孵育的神经元缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的百分率和Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度均明显低于对照组。本结果表明,缺氧能诱导体外培养海马神经元ｃ－ｆｏｓ表达,ｒｈＩＬ－１β能抑制缺氧神经元ｃ－ｆｏｓ表达。提示ｒｈＩＬ－１β对海马神经元缺氧损伤具有一定调控作用。     

神经激肽-1(NK-1)受体介导福尔马林诱发的大鼠脊髓c-fos表达

本文用Ｆｏｓ作为背角伤害性反应神经元活动的一个标志物,结合免疫细胞化学和神经药理学方法,观察了速激肽受体拮抗剂对福尔马林诱发的脊髓ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达的影响。一侧大鼠后肢跖部皮下注射福尔马林,仅在同侧脊髓背角有ｃ－ｆｏｓ表达。Ｆｏｓ阳性神经元最密集分布于Ｉ层和Ⅱ层背侧的内侧部,中等量分布于Ⅳ层和Ｖ型,少量定位于Ⅱ层腹侧部、Ⅲ、Ⅵ和Ⅹ层。若预先在一侧大鼠后肢跖部皮下注射福尔马林前,鞘内给予神经激肽     

c－met原癌基因编码蛋白与HGF生物学作用的多态性

ｃ－ｍｅｔ原癌基因编码蛋白与ＨＧＦ生物学作用的多态性郭树华,贺福初（军事医学科学院放射医学研究所,北京１００８５０）关键词ｃ－ｍｅｔ原癌基因蛋白,肝细胞生长因子受体,肝细胞生长因子肝细胞生长因子（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃ－ｔｏｒ,ＨＧＦ...     

棕色固氮菌钼铁蛋白的金属原子簇与其构象的关系

棕色固氮菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）固氮酶钼铁蛋白的紫外ＣＤ谱在２０５—２３５ ｎｍ 出现由峰位分别为２０８ 和２２２ ｎｍ 的双负峰组成的负槽;经邻菲口罗啉在厌氧或有氧环境中处理后,在２２２ ｎｍ 的负峰随该蛋白中Ｐ－ｃｌｕｓｔｅｒ 和ＦｅＭｏｃｏ 含量的降低而减少。在分别由Ｎａ２ＭｏＯ４、Ｎａ２Ｓ、二硫苏糖醇和高柠檬酸铁或柠檬酸铁组成的重组液重组后,上述两种处理蛋白在２２２ ｎｍ 的负峰又随其Ｐ－ｃｌｕｓｔｅｒ和ＦｅＭｏｃｏ含量的恢复而恢复。表明,钼铁蛋白的金属原子簇与蛋白质构象间存在明显的相关性     

CCK－8和NDAP对大鼠脑和脊髓组织c－fos表达的影响

为探讨八肽胆囊收缩素（ＣＣｋ－８）和阿片肽相互作用的分子机理,利用抗体免疫沉淀技术研究了ＣＣＫ－８与ＮＤＡＰ（ｋ阿片受体激动剂）对大鼠脑（去皮层和小脑）和脊髓背柱组织Ｆｏｓ蛋白的影响。结果表明,０．１μｍｏｌ／ＬＣＣＫ－８可显著刺激脑和脊髓组织中Ｆｏｓ蛋白增加（分别是对照组的３．８倍和３．６倍）。相同浓度的ＮＤＡＰ对Ｆｏｓ蛋白的生成亦有一定的诱导作用,分别是对照组的２．７倍和２．６倍。ＣＣＫ－８和ＮＤＡＰ共同处理组织,Ｆｏｓ蛋白生成水平相似（脑）或高于（脊髓）ＣＣＫ~－８单独诱导的水平。结果表明,ＣＣＫ－８和ＮＤＡＰ均可直接诱导大鼠脑和脊髓组织ｃ－ｆｏｓ的表达,它们对ｃ－ｆｏｓ表达的相互作用在脑和脊髓中呈现不同的模式。     

原癌基因抑或原瘤基因

原癌基因抑或原瘤基因姚开泰（湖南医科大学病理生理学教研室）Ｐｒｏｔｏ－ｏｎｃｏｇｅｎ应译为原瘤基因,而不是原癌基因。其理由是：Ｏｎｃｏ是肿瘤,而不是专指癌,癌是恶性肿瘤之一种。例如,在以往的译名中,ｔｕｍｏｒ－ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｆａｃｔｏｒ译为抑...     

自发性高血压大鼠原癌基因表达和限制性内切酶片段长度多态性分析

观察自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）的生长曲线、ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达和ｃ－ｆｏｓ基因酶切图谱的情况,与对照组京都维斯特大鼠（ＷＫＹ）进行对比。结果显示,在小牛血清作用下ＳＨＲ的ＶＳＭＣｓ生长速率和ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达明显大于ＷＫＹ;ｃ－ｆｏｓ原癌基因限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析表明,经ＢａｍＨ Ｉ或ＥｃｏＲ Ｉ酶切后的ＳＨＲ－ＷＫＹ的酶切图谱一致,同时也未发     

吗啡耐受增加福尔马林致痛大鼠脊髓Fos和NADPH-d阳性神经元的表达

运用Ｆｏｓ免疫组织化学、ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学及Ｆｏｓ／ＮＡＤＰＨ－ｄ双标技术,研究了吗啡耐受对福尔马林致痛大鼠脊髓Ｆｏｓ、ＮＡＤＰＨ－ｄ阳性及Ｆｏｓ／ＮＡＤＰＨ－ｄ双标神经元表达的影响。结果观察到：在非吗啡耐受大鼠,福尔马林诱发的Ｆｏｓ－ｌｉｋｅ ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ（Ｆｏｓ－ＬＩ）主要分布在同侧脊髓背角浅层和颈部,急性静注吗啡可减少Ｆｏｓ－ＬＩ表达;长时间应用吗啡导致福尔马林诱发的     

自发性高血压大鼠原癌基因表达和限制性内切酶片段长度多态性分析

观察自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）的生长曲线、ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达和ｃ－ｆｏｓ基因酶切图谱的情况,与对照组京都维斯特大鼠（ＷＫＹ）进行对比．结果显示,在小牛血清作用下ＳＨＲ的ＶＳＭＣｓ生长速率和ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达明显大于ＷＫＹ;ｃ－ｆｏｓ原癌基因限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析表明,经ＢａｍＨⅠ或ＥｃｏＲⅠ酶切后的ＳＨＲ和ＷＫＹ的酶切图谱一致,同时也未发现ＳＨＲ的ｆｏｓ基因扩增现象．提示,ＶＳＭＣｓ的异常增殖和ｃ－ｆｏｓ原癌基因的表达异常与高血压的形成有关,而ｃ－ｆｏｓ原癌基因的过度表达可能是由于某些与基因转录调控有关的因素异常所致．