膜荚黄芪毛状根培养系统的建立和外界因子对其生长的影响

建立了由发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）感染膜荚黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．）叶片外植体形成的毛状根培养系统并研究了外界因子对其生长的影响。ＭＳ基本培养基（无激素）适合于黄芪毛状根的生长,但是由于ＮＨ４ＮＯ３具有抑制作用而被省略。３％的蔗糖和培养基ｐＨ６适宜毛状根生长。光抑制毛状根生长。每天１２ｈ的１５℃处理对黄芪毛状根生长的影响不明显。与黄芪药用根生物活性成分比较表明,毛状根组织含有较多的粗皂甙和可溶性多糖。讨论了毛状根培养技术在中药材生产中的应用和潜力。     

露水草毛状根的诱导和培养

发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇ６ｎｅｓ）ｐＲｉ１５８３４菌株感染露水草（Ｃｙａｎｏｔｉｓａｒａｃｈｎｏｉｄｅａ）的茎和根的外植体及小苗,均诱导出毛状根。毛状很能在不含激素的ＭＳ培养基上生长。用纸电泳和高效薄层层析法,在毛状根中检测到甘露碱。用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交,在植物ＤＮＡ中检测到ｒｏｌｅ基因。表明Ｒｉ质粒的Ｔ—ＤＮＡ部分已转移到毛状根细胞的ＤＮＡ中。该毛状根能产生β－蜕皮激素。露水草毛状根的诱导培养在单子叶植物中是一个成功的先例。     

发根农杆菌对短叶红豆杉的转化及毛状根中紫杉醇的产生

发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ａ４（ＡＴＣＣ３１７８９）感染短叶红豆杉（Ｔａｘｕｓｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）芽外植株,３０～３５ｄ后可诱导出毛状根,４０ｄ后转化率可达３０％,毛状根经农杆碱单克隆抗体酶联免疫分析,证明已被转化,毛状根生长速度较快,５株毛状根在无激素的Ｂ５液体培养基中悬浮培养２ｄ生物量平均增加约９倍,是同等条件下短叶红豆杉愈伤组织液体悬浮培养的２．９倍。经紫     

发根土壤杆菌对葛属药用植物的遗传转化

葛根是传统中药。利用发根土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ （Ｒｉｋｅｒ ｅｔ ａｌ．）Ｃｏｎｎ）Ｒ１６０１转化野葛（Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ）、山葛（Ｐ．ｌｏｂａｔａ ｖａｒ．ｍｏｎｔａｎａ）和三裂叶野葛（Ｐ．ｐｈａｓｅｏｌｏｉｄｅｓ（Ｒｏｘｂ．）Ｂｅｎｔｈ．）离体叶片,在叶片表面直接形成毛状根。毛状根的诱导频率分别为１６．６％、１６．２％和     

毛喉鞘蕊花毛状根培养及二萜化合物的形成

发根农杆菌ｐＲｉ１５８３４菌株感染毛喉鞘蕊花的根、茎、叶及小苗,均诱导出毛状根。通过纸电泳,在毛状根中检测到甘露碱。该毛状根不仅具有典型的形态特征,并能合成二萜化合物,对其中３个主要成分ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ,１,９－ｄｉｄｅｏｘｙｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和ｃｏｌｅｏｌ分别进行了定量测定。ＭＳ培养基有利于ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和ｃｏｌｅｏｌ的合成,而Ｂ５培养基促进１,９－ｄｉｄｅｏｘｙｆｏｒｓｋｏｌｉｎ的合成。     

黄芪毛状根GBSSI基因cDNA克隆及其结构分析

根据多种已发表的淀粉粒结构淀粉合成酶（ＧＢＳＳ）基因的比对分析,以它们保守区的核酸顺序为基础,设计一对简并引物。从膜荚黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ）Ｂｕｎｇｅ）毛状根提取ｍＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ的方法扩增出５６０ｂｐ的ｃＤＮＡ片段。序列测定表明,此片段与发表的豌豆和马铃薯ＧＢＳＳＩ基因相应序列同源性分别达８９．６％和７３．０％,通过５′／３′ＲＡＣＥ（ｒａｐｉｄ     

地不容毛状根的培养

以Ｒ１０００,１５８３４,１８５５,８１９６等４种发根农杆菌菌株,在不同条件下,感染地不溶,结果在光照条件下,Ｒ１０００诱导植物幼嫩组织产生毛状根。毛状根在ＭＳ液体培养基中生长４２ｄ后,趋于稳定;异喹吉林生物碱含量在第２８ｄ时达到峰值１１０４μｇ／ｇＦＷ。６种培养基中,毛状根生长及异喹啉生物碱含量的差异很大,在在Ｂ５２基中毛状根生长最快,Ｎｉｔｓｃｈ培养基中毛状根异喹啉生物碱含量最讥。Ｂ５培养基中     

四棱草属比较形态及其分类系统位置的研究Ⅰ．四棱草属及近缘属叶片毛状体微形态

采用“外类群对比准则”（ＯｕｔｇｒｏｕｐＣｏｍｐａｒｉｓｏｎＣｒｉｔｅｒｉａ,Ｃａｒｃａｒｆｔ１９８３）的性状分析方法,对我国特有植物四棱草属Ｓｏｈｎａｂｅｌｉａ及其近缘属筋骨草属Ａｊｕｇａ,香科科属Ｔｅｕｃｒｉｕｍ（唇形科）和莸属Ｃａｒｙｏｐｔｅｒｉａ大青属Ｃｌｅｒｄｅｎｄｒｏｎ（马鞭草科）等５属６种主要植物比较研究,首次发现在这些植物叶片上,具有一种新的毛状体,其形状呈箭形,故定名为箭形毛（Ａｒｒｏｗ—ｓｈａｐｅｄ—ｈａｉｒ）,在扫描电子显微镜下观察是由头部、柄部和基部组成,在光学显微镜下,确认这类毛状体属于多细胞单列毛,由细胞变形而成形。此外,尚有长柔毛（Ｓｈａｇ－ｈａｉｒ）,盾状毛（Ｐｅｌｔａｔｅ—ｈａｉｒ）和鳞片毛（Ｓｃａｌｅｓ—ｈａｉｒ）等四种类型。从以上毛状体的微形态特征及其演化规律,作者认为四棱草属和近缘属在唇形科与马鞭草科系统演化框架里,可能是处于中间过渡类型。     

发根农杆菌Ri质粒在药用植物生物工程中的应用

发根农杆菌(Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ)与根癌农杆菌(Ａ.ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ)属于根瘤菌科,均为革兰氏阴性菌[1]。它们在侵染植物后引起的症状不同,含有Ｔｉ质粒的根癌农杆菌在侵染植物后形成冠瘿瘤(ｃｒｏｗｎｇａｌｌ),而含有Ｒｉ质粒的发根农杆菌表现与其不同,它在感染植物后在植物的伤口部位诱发产生毛状根(ｈａｉｒｙｒｏｏｔ)。由发根农杆菌侵染植物诱导产生的毛状根具有生长快、分枝多、根毛多等特点。发根农杆菌Ｒｉ质粒与根癌农杆菌Ｔｉ质粒结构相似,都具有高效率转移的Ｔ-ＤＮＡ区和致病的Ｖｉｒ区…     

Ri T-DNA转化对黄瓜毛状根内源激素水平的影响

利用酶联免疫法和气相色谱法分别测定发根农杆菌Ｒ１０００转化黄瓜子叶产生的三种毛状根内源ＩＡＡ、ＡＢＡ、ｉＰＡｓ、ＺＲｓ、ＧＡ１＋３、ＧＡ４＋７和乙稀含量的变化。结果表明：内源ＩＡＡ、ＡＢＡ和ＧＡ１＋３含量都以Ⅲ型毛状根最高,Ⅱ型毛状根次之,Ｉ型毛状根最低;但ＧＡ４＋７含量顺序恰好与之相反,Ⅲ型毛状根ＧＡ４＋７含量低检测不出。黄瓜对照根和毛状根的ＧＡ１＋３和ｉＰＡｓ含量都分别比ＧＡ４＋７和ＺＲｓ高得     

根癌土壤杆菌介导的水稻高效转化和转基因植株的高频再生

利用根襄封杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）介导的转化方法对４个粳稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．ｓｓｐ．ｊａｐｏｎｉｃａ）品种和２个灿稻（Ｏ．ｓａｔｉｖａ ｓｓｐ．ｉｎｄｉｃａ）品种进行了转化。在对影响根癌土壤杆菌转化水稻效率的多种因素进行比较研究后,建立了根癌土壤杆菌介导的水稻高效转化和再生系统。将水稻成熟胚和未成熟胚来源的     

四棱草属比较形态及其分类系统位置的研究：Ⅳ.四棱草属及其近…

四棱草属及其近缘属筋骨草属Ａｊｕｇａ,香科科属Ｔｅｕｃｒｉｕｍ（唇形科Ｌａｂｉａｔａｅ）,莸属Ｃａｒｙｏｐｔｅｒｉｓ,大青属Ｃｌｅｒｏｄｅｎｄｒｕｍ（马鞭草科Ｖｅｒｂｅｒｎａｃｅａｅ）５属,６种代表植物的叶表皮细胞形状、气孔类型和毛状体类型的比较研究结果是：（１）叶上表皮细胞形养 深小纹状不规则形,浅波纹状不规则形和浅波纹状四边形;（２）气孔类型是不规则型,平列型,横列型和等位模列型。（３）毛状体     

抑制根癌土壤杆菌生长和转移的水稻信号分子的鉴定

从水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．ｃｖ．ＩＲ７２）根中分离出一种高效抑制根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｎｅｆａｃｉｅｎｓ（ＳｍｉｔｈｅｔＴｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）生长及抑制根癌土壤杆菌在水稻细胞表面附着的水稻信号分子：乙基４－（邻硝基苯基）－３－硫代脲酸酯（Ｔ）,该化合物是一种新发现的天然的硫脲化合物,对根癌土壤杆菌生长和根癌土壤杆菌在水稻细胞表面附着具有较强抑制作用,水稻对根癌土     

水稻内生联合固氮细菌的筛选,鉴定及其分布特性

利用乙炔还原法和固定１５Ｎ２ 活性测定法对分离自水稻（ Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）“越富”种子、根、茎和叶的内生细菌进行了筛选,获得２９ 株具有体外固氮能力的水稻内生联合固氮细菌。鉴定结果表明它们分属于根癌土壤杆菌（ Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ （Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ） Ｃｏｎｎ） ,放射土壤杆菌（ Ａ． ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ （Ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ ｅｔ ｖａｎ Ｄｅｌｄｅｎ） Ｃｏｎｎ） ;阴沟肠杆菌（ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ （Ｊｏｒｄａｎ） Ｈｏｒｍａｅｃｈｅ ｅｔ Ｅｄｗａｒｄｓ） ,成团肠杆菌（ Ｅ． ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ （Ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ） Ｅｗｉｎｇ ｅｔ Ｆｉｆｅ） ,坂崎肠杆菌（ Ｅ． ｓａｋａｚａｋｉｉ Ｆａｍｅｒ ｅｔ ａｌ．） ;皮氏产碱菌（ Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｐｉｅｃｈａｕｄｉｉ Ｋｉｒｅｄｊｉａｎ ｅｔ ａｌ．） ,反硝化产碱菌（ Ａ． ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ （Ｌｅｉｆｓｏｎ ｅｔ Ｈｕｇｈ） Ｒｕｇｅｒ ｅｔ Ｔａｎ） ;类产碱假单胞菌（ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｓｔａｎｉｅｒ） ,产碱假单胞菌（ Ｐ． ａｌｃａｌ     

四棱草属比较形态及其分类系统位置的研究──Ⅳ．四棱草属及其近缘属叶表皮结构特征

四棱草属Ｓｃｈｎａｂｅｌｉａ及其近缘属筋骨草属Ａｊｕｇａ,香科科属Ｔｅｕｃｒｉｕｍ（唇形科Ｌａｂｉａｔａｅ）,获属Ｃａｒｙｏｐｔｅｒｉｓ,大青属Ｃｌｅｒｏｄｅｎｄｒｕｍ（马鞭草科Ｖｅｒｂｅｒｎａｃｅａｅ）５属,６种代表植物的叶表皮细胞形状、气孔类型和毛状体类型的比较研究结果是：（１）叶上表皮细胞形状是深波纹状不规则形,浅波纹状不规则形和浅波纹状四边形;（２）气孔类型是不规则型,平列型,横列型和等位横列型。（３）毛状体类型属单毛和鳞片毛二种类型。根据上述特征及其分布规律,作者认为四棱草属在唇形科与马鞭草科系统演化的框架里,是处于中间过渡类型的位置。     

酚类化合物促进含双元载体农杆菌对胡萝卜悬浮细胞的转化和植株再生

含双元载体的非致瘤根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍ ｅｆａｃｉｅｎｓ） ＬＢＡ４４０４经乙酰丁香酮和复合酚类化合物活化预处理后,感染胡萝卜（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ）悬浮培养细胞,在含５０ ｍ ｇ／ＬＫｍ 的选择培养基上筛选Ｋｍ ｒ 克隆。实验表明：酚类化合物活化预处理组的转化率分别为０．２４％ 和０．１７％ ,而未经酚类化合物活化处理组的转化率仅为０．０２％ 。Ｋｍ ｒ 克隆在含５０ ｍ ｇ／Ｌ Ｋｍ 的无激素培养基上通过体细胞胚胎发生形成完整植株。组织化学分析表明：报告基因ＧＵＳ的活性可出现于Ｋｍ ｒ 克隆细胞、再生植株的根、茎、叶、叶柄维管束薄壁细胞、叶片的气孔保卫细胞、皮层细胞、叶肉细胞和毛状体、叶柄的表皮细胞和表皮下薄壁细胞     

南川前胡化学成分的研究

从伞形科前胡属南川前胡的根中分离得到７个化合物,通过理化常数和波这方法确定了其结构,分别是ｄｅｌｔｏｉｎ,佛手相内酯（ｂｅｒｇａｒｐｔｅｎ）,丁二酸（ｓｕｃｃｉｎｉｃ ａｃｉｄ）,甘露醇（ｄ－ｍａｎｎｉｔｏｌ）,二十五烷酸（ｐｅｎｔａｃｏｓａｎｏｉｃ ａｃｉｄ）,β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）和胡萝卜甙（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｅｌ）。以上化合物均为从本植物中首次分得。     

烟草毛状根诱导及其茄尼醇含量初探

茄尼醇是合成泛醌类药物的重要中间体.以发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）W.T15834感染烟草叶片诱导产生毛状根,探讨其茄尼醇含量变化.结果显示,获得的毛状根能在无外源生长调节剂的MS固体和液体培养基上自主生长,但在液体培养基中培养的毛状根生长更迅速,也不会形成愈伤组织.甘露碱检测及PCR结果证实,发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已在烟草（Nicotiana tabacum）毛状根基因组中整合并得到表达.用改进的HPLC法测定烟草毛状根中的茄尼醇含量,其结果为对照根（种子萌发产生的幼苗根）的1.12倍,但仍比废弃烟叶中茄尼醇含量低43.2%.     

干旱诱导性启动子驱动的海藻糖—6—磷酸合酶基因载体的构建及转？…

通过ＰＣＲ程序克隆拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ（Ｌ．）Ｈｅｙｎｈ．）的干旱诱导性启动子Ｐｒｄ２９Ａ及来自酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ Ｈａｎｓｅｎ）的海藻糖－６－磷酸合酶基因（ＴＰＳ）,并将它们组成可在植物中表达的载体ＲＴ。通过根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｎｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）ＬＢＡ４４０     

白喉乌头中的新二萜生物碱

通过柱层析和高效液相层析从白喉乌头（Ａｃｏｎｉｔｕｍ ｌｅｕｃｏｓｔｏｍ ｕｍ Ｗｏｒｏｓｃｈ．）的根中分离得到４种二萜生物碱,通过各种光谱数据的解析鉴定了它们的结构,其中一种是新化合物,命名为喉乌碱（ｌｅｕ－ｃｏｓｔｉｎｅ,Ⅱ）;其它为已知化合物ｌｅｕｃｏｎｉｎｅ （Ⅰ）、ｄｅｈｙｄｒｏａｃｏｓａｎｉｎｅ （Ⅲ）和ｓｅｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ （Ⅳ）。