Identification of rice (Oryza sativa L.) signal factors capable of inducing Agrobacterium vir gene expression

Two kinds of signal factors capable of inducing Agrobaorerium vir gene expression were purified and identified from leaf extracts of panicle-differentiating to flowering stage of rice (Oryza saliva L. cv. IR 72) detected by Agrobacterium vir(?) lacZ. fusion genes. The induction was similar to that observed with 5 μm actosyringone (AS). Based on the comprehensive analysis of the data by UV, IR, NMR, MS, HMQC and HMBC, the structures of these two signal factors are identified as 5, 7, 4'-trihydroxy-3', 5'-dimethoxy-flavone (named tricin) and 5, 4' -dihydroxy-3', 5' -dimethoxy-7- (β-D-glucosyloxy) -flavone, respectively. These results demonstrate that monocotyledonous plants do contain highly efficient vir gene inducing factors of Agrobacterium, and the reason why monocotyledonous plants are difficult to transform by Ayrobacterium is not due to absence of vir gene inducing factors, but due to the signal factors only produced in specific stage and tissue of monocotyledonous plants     

抑制根癌土壤杆菌生长和转移的水稻信号分子的鉴定

从水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．ｃｖ．ＩＲ７２）根中分离出一种高效抑制根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｎｅｆａｃｉｅｎｓ（ＳｍｉｔｈｅｔＴｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）生长及抑制根癌土壤杆菌在水稻细胞表面附着的水稻信号分子：乙基４－（邻硝基苯基）－３－硫代脲酸酯（Ｔ）,该化合物是一种新发现的天然的硫脲化合物,对根癌土壤杆菌生长和根癌土壤杆菌在水稻细胞表面附着具有较强抑制作用,水稻对根癌土     

心律失常相关基因在蟾蜍卵母细胞上听表达及用于Ⅲ抗心律失常海洋 …

采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Ｋｖ１．５和Ｋｖ４．２ｃＤＮＡ转录为ｍＲＮＡ,然后将其分别注入蟾蜍卵母细胞（Ｘｅｎｏｐｕｓ Ｏｏｃｙｔｅｓ）上：在蟾蜍卵母细胞上分别获得纯净、单一的超速延迟性整流钾电流（Ｉｋｕｒ,ｕｌｔｒａｒａｐｉｄ ｄｅｌａｙｅｄ ｒｅｃｔｉｆｉｅｒ Ｋ＾＋ ｃｕｒｒｅｎｔ）和瞬间外向钾电流（Ｉｔｏ,ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｏｕｔｗａｒｄ Ｋ＾＋ ｃｕｒｒ     

诱导根癌土壤杆菌vir区基因表达信号分子的构效研究

以根癌土壤杆菌为介导的外源基因转化系统是目前应用最为广泛和有效的植物基因转化系统。根癌土壤杆菌D质粒毒性区。irA、virB、。irC、。irD。。irE、。irG6个基因位点,在外源诱导性信号分子的作用下,表达出转移DNA（T－DNA）复合物,整合人植物细胞核基因组中。利用根癌土壤杆菌这种天然的转化机制,已获得双子叶转基因植株。但单子叶植物难以被根癌土壤杆菌转化,某些研究者认为这是由于单子叶植物缺乏促使根癌土壤杆菌产生趋化运动以及诱导。ir区基因表达的信号分子［‘」。我们从幼穗分化期至抽穗扬花期水稻中分离获得2种高效…     

心律失常相关基因在蟾蜍卵母细胞上的表达及用于Ⅲ抗心律失常海洋活性物质的评价

采用基因克隆、膜片钳和微注射技术,分别将人的心律失常相关基因Ｋｖ１．５和Ｋｖ４．２ｃＤＮＡ转录为ｍＲＮＡ,然后将其分别注入蟾蜍卵母细胞（Ｘｅｎｏｐｕｓ Ｏｏｃｙｔｅｓ）上：在蟾蜍卵母细胞上分别获得纯净、单一的超速延迟性整流钾电流（Ｉｋｕｒ, ｕｌｔｒａｒａｐｉｄ ｄｅｌａｙｅｄ ｒｅｃｔｉｆｉｅｒ Ｋ＋ｃｕｒｒｅｎｔ）和瞬间外向钾电流（Ｉｔｏ,ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｏｕｔｗａｒｄ　Ｋ＋ ｃｕｒｒｅｎｔ）表达,克服以往在筛选评价抗心律失常药物时,人新鲜心肌细胞取材困难、多种电流在细胞膜表面共同表达等缺点,从而建立评价Ⅲ类抗心律失常药物的先进药理模型,并筛选具有Ⅲ类抗心律失常药理作用的新化合物Ａ１９９８。     

对根癌农杆菌vir区基因具诱导作用的水稻信号分子的分离和确定

以农杆菌vir::lacZ融合基因系统作为检测手段,确定在水稻(Oryza sati-va L.cv.IR72)幼穗分化期至抽穗扬花期的叶片抽提液中含有2种高效诱导农杆菌vir区基因表达的信号分子.这2种信号分子与乙酸丁香酮(AS)的诱导作用极为相似.经过红外光谱、紫外光谱、质谱、核磁共振、异核多量子相干相关谱,异核多键相关谱等波谱分析,确定这2种信号分子的化学结构分别为:5,7,4′-三羟基-3′,5′-二甲氧基黄酮(俗称小麦黄素),和5,4′-二羟基-3′,5′-二甲氧基-7-(β-D葡萄糖基)黄酮.研究结果证明:单子叶植物中确实含有高效诱导农杆菌vir区基因表达的信号分子,单子叶植物难以被农杆菌转化不是由于单子叶植物中缺乏诱导vir区基因表达的信号分子,而由于这类信号分子仅在单子叶植物中特定时期和特定部位中产生.