生物活性肽蛋白质组分分离与鉴定方法的建立

目的:评估大规模蛋白质组分离与鉴定技术策略在生物活性肽研究中的应用价值。方法:采用全溶液酶解及胶内分离与酶解方法分离生物活性肽;肽段离子阱串联质谱鉴定时,采用碰撞诱导解离与电子转移解离2种互补的肽段碎裂模式。结果:几种方法联用,鉴定到复杂生物活性肽样品中236个多肽大分子;不同分离和鉴定策略显示出良好的互补性,基于凝胶电泳分离的策略提供了最好的鉴定效果。结论:大规模的蛋白质组学分离与鉴定技术策略可以有效应用于生物活性肽组分的表征。     

肿瘤干细胞分离纯化及鉴定的研究策略

随着白血病、乳腺癌、脑肿瘤干细胞的分离鉴定成功,肿瘤干细胞（tumor stem cell,TSC）学说逐渐成熟起来。分离纯化和鉴定是TSC研究的首要工作和前提,TSC的分离纯化主要有根据细胞表型特征和生物学特性而建立的两大类方法,TSC的鉴定分为体外实验和动物致瘤实验。TSC的分离、纯化及其成功鉴定将为肿瘤临床诊断、治疗、预后及其基础研究带来新的理念。     

鱼粉中沙门氏菌的分离与鉴定

采用传统生化鉴定及血清学方法,联合半自动细菌鉴定仪、miniVIDAS和VITEK COMPACT 2全自动微生物分析仪方法,从CNAS测试样品鱼粉中成功分离鉴定沙门氏菌,并结合食品微生物学检验实践,对分离鉴定过程进行了总结分析。     

基于16S rRNA和rpoB基因的分子系统发育分析在铜绿假单胞菌鉴定中的应用

为对比16S rRNA和rpo B基因分子系统发育分析与传统表型分类法对铜绿假单胞菌的鉴定,评估16S rRNA和rpo B基因序列分析在铜绿假单胞菌鉴定中的应用,用表型分类方法对临床自动微生物鉴定系统鉴定为铜绿假单胞菌的23株分离株进行再鉴定,PCR扩增23株分离株16S rRNA和rpo B基因片段,并测序进行系统发育分析。结果表明,表型再鉴定结果与自动微生物鉴定系统鉴定结果一致。基于两个基因的系统发育分析均显示分离株p22与不动杆菌属序列聚为一枝,其余22株分离株与铜绿假单胞菌序列聚为一枝。因此p22应鉴定为不动杆菌,16S rRNA和rpo B基因序列分析均能准确鉴定铜绿假单胞菌并能较好建立假单胞菌属内种间关系。     

基于核酸定量的核质分离质控方案

目的:拟建立一种方便快捷、经济有效的细胞核质分离鉴定方法。方法:本研究从DNA水平进行核质分离鉴定,选择GAPDH、ND1分别作为细胞核和细胞质标志基因,并根据GAPDH及ND1序列保守区设计引物,基于荧光定量PCR方法定性检测核质分离的效果。随后将本鉴定方法应用于其他种类细胞(BEAS-2B细胞、GT1-7细胞)及组织(小鼠心脏、肝脏、大脑)的核质分离鉴定。结果:在293T细胞应用该鉴定方法鉴定核质分离效果,结果显示:GAPDH、ND1在核组、质组中的含量存在明显差异,其中核标志基因GAPDH在细胞核中的比例达到了95%以上,质标志基因ND1在细胞质中的比例也达到了90%左右,这与从RNA水平及蛋白水平鉴定核质分离的结果一致。在其他种类的细胞(BEAS-2B细胞、GT1-7细胞)及组织(小鼠心脏、肝脏、大脑)应用该方法结果显示:细胞核组分中质标志基因ND1含量比293T细胞的有所增加,但仍可以实现核质分离鉴定。结论:本研究所建立的核质分离质控方法可以实现从DNA水平进行核质分离的鉴定,该方法更加经济、快捷。     

一株铜绿假单胞菌的分离鉴定与耐药性分析

目的:对矽肺患者痰标本中分离到的菌株NY-7进行分离鉴定。方法:将菌株NY-7经形态观察,生化反应,16s rDNA鉴定后分析其耐药性。结果:经生化鉴定及16s rDNA鉴定所分离细菌NY-7为一株铜绿假单胞菌。结论:对病原菌进行有效鉴定,并分析其耐药性,对于临床防治疾病具有重要作用。     

小鼠细胞分离培养及鉴定操作的优化和分析

目的 :探讨小鼠细胞分离培养及鉴定的优化操作,观察其应用效果。方法:选取0.25%胰蛋白酶对小鼠心室肌细胞进行分离,通过5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)处理分离到的心室肌细胞,差速离心后静止沉淀。使用观察仪器观察,实施鉴定处理。结果:心肌细胞明显同步搏动频率为50~160次,肌丝发达,鉴定结果显示为阳性。结论:在小鼠细胞分离培养的过程中使用胰蛋白酶能够加速分离效果,缩短培养周期。     

应用基质辅助激光电离飞行时间质谱快速鉴定临床酵母菌

目的研究基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight MassSpectrometry,MALDI-TOF-MS)用于快速检测鉴定临床分离的酵母菌的可行性。方法应用Bruker MALDI-TOF-MS和VITEK 2-compact系统分别鉴定150株临床分离的酵母菌,结果不一致的菌株通过基因序列测定来鉴定。结果 MALDI-TOF-MS快速准确鉴定出了150株临床酵母菌,鉴定符合率在属水平上为100%,种水平上为94%。结论基于MALDI-TOF-MS鉴定方法具有很好的可重复性和准确性,并且其检测成本较低,实验准备时间很短,MALDI-TOF-MS可以用于临床分离的酵母菌的快速鉴定。     

杜仲叶绿原酸的提取，分离和鉴定

杜仲叶绿原酸的提取、分离和鉴定＠戚向阳＠张声华￥华中农业大学食品科学系杜仲叶;绿原酸;提取;鉴定杜仲叶绿原酸的提取、分离和鉴定戚向阳张声华（华中农业大学食品科学系,武汉４３００７０）Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ,ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔ...     

鹅源鸭疫里默氏杆菌的分离、鉴定与生物学特性研究

【目的】从疑似鸭疫里默氏杆菌病的病死雏鹅分离病原菌进行鉴定。【方法】根据细菌培养特性、生化特性、动物试验、血清型鉴定及分子生物学特性对分离菌株进行鉴定。【结果】分离菌株为革兰氏阴性菌,不发酵糖类和醇类,尿素酶试验和氧化酶还原试验为阳性,致病,不同分离株的16S rRNA基因经多重序列比对分析,结果显示鹅源分离株与鸭源鸭疫里默氏杆菌处于同一进化支上,与鸡源鸭疫里默氏杆菌进化关系稍远,血清型鉴定为1型。【结论】分离菌株为血清1型的鸭疫里默氏杆菌,对鸭和鹅均有高致病性,自家疫苗能够较好地保护雏鹅。     

鄱阳湖野生藜蒿的化学成分研究

对鄱阳湖新鲜野生藜蒿的化学成分进行了研究。采用有机溶剂提取、萃取和柱层析等方法进行提取分离和纯化,根据化合物的理化性质和波谱学特征鉴定化合物的化学结构,分离并鉴定了5个化合物：（-谷甾醇（（-sitosterol,Ⅰ）、5-羟基-7,4’-二甲氧基二氢黄酮（5-hydroxy-7,4’dimethoxyflavanone,Ⅱ）、5,4’-二羟基-7-甲氧基二氢黄酮（5,4’-dihydroxy-7-methoxyflavanone,Ⅲ）、5,3：4’-三羟基-7-甲氧基黄酮（5,3：4’-trihy-dmxy-7-methoxyflavone,Ⅳ）、胡萝卜苷（daucosterol,Ⅴ）。     

山楂蜂花粉中脂肪酸的GC-MS分析

用乙醇-氯仿作溶剂,提取出山楂蜂花粉粗脂肪,然后进行甲酯化处理,用气相色谱/质谱联用技术进行分离鉴定,共鉴定出10种脂肪酸,并测定相对含量,多不饱和脂肪酸含量较高,其中亚油酸相对含量为47.84%,亚麻酸相对含量为19.30%.     

芝麻蜂花粉脂肪酸的GC—MS分析

以石油醚为溶剂,索氏提取法提取芝麻蜂花粉粗脂肪,甲酯化处理后,通过气相色谱-质谱联用技术进行分离鉴定,共鉴定出8种脂肪酸,并测定相对含量。结果表明,芝麻蜂花粉多不饱和脂肪酸含量较高,其中亚麻酸相对含量为66．71％。     

小叶石楠果实中低极性化学成分GC-MS分析

采用溶剂提取法从小叶石楠果实中提取低极性化学成分,并利用气相色谱—质谱仪对果实中的低极性化学成分进行分离和鉴定,同时用面积归一法测定各成分的相对百分含量。结果表明:已确认了25种成分,占果实中低极性化学成分的96.04%,其主要成分为亚麻酸甲酯(13.11%)、邻苯二甲酸二辛醇酯(10.13%)、角鲨烯(9.19%)、维生素E(8.67%)、十九烷(8.03%)。所鉴定的化合物多为该种植物中首次发现,为小叶石楠的进一步开发利用提供了科学依据。     

三白草不同部位及鱼腥草挥发油成分的GC-MS比较分析

采用水蒸气蒸馏法提取,气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对三白草不同部位及鱼腥草挥发油化学成分进行定性和定量分析。共分离鉴定出88个化合物,从三白草地上部分鉴定出36个,根茎中鉴定出31个,分别占挥发油总量的73.38%和95.53%,其中仅13个共有成分;从鱼腥草中鉴定出50个化合物,占挥发油总量的74.59%。三白草地上部分与根茎挥发油中化学成分含量和组成有明显差异,且均不含有甲基正壬酮。     

滇南蛇根草化学成分的研究

采用柱色谱技术从药用植物滇南蛇根草Ophiorrhiza austroyunanensis Lo.全草的甲醇提取物分离得到9个化合物,利用理化性质及波谱方法分别鉴定为β-谷甾醇(1)、β-豆甾醇(2)、β-胡萝卜苷(3)、白桦脂醇(4)、叶黄素(5)、东莨菪素(6)、熊果酸(7)、茜根酸-1-甲醚(8)和豆甾醇-3-O...     

Chemical Constituents from Fruits of Ligustrum lucidum

Seven compounds were isolated and identified from the fruits of Ligustrum lucidum Ait. Compounds Ⅰ to Ⅵ were isolated for the first time from the plants of this genus. Compounds Ⅶ is a novel compound named nuezhenidic acid whose chemical structure was elucidated by means of spectral analysis and chemical reaction.     

中药马骝卵的化学成分研究

从中药马骝卵 (Nephrolepiscordifolia(L .) )的乙酸乙酯萃取部分中分离出 8个成分 ,利用UV、IR、1HNMR、13 CNMR、MS等光谱方法鉴定出 5个化合物 ,它们分别是 :β 谷甾醇、胡萝卜苷、山柰酚 3 O β 葡萄糖苷、槲皮素 3 O β 鼠李糖苷、软脂酸单甘油酯 ,其中 2个黄酮苷、油酸单甘油酯等 3个化合物为首次从该植物中分得。     

苦玄参的化学成分研究

对广西传统的抗菌消炎药用植物苦玄参进行了化学成分研究,采用柱色谱进行分离纯化,运用波谱法进行了结构解析,共鉴定得到7个化合物。它们分别为:芹菜素(1)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖酸(2)、芹菜素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖酸(3)、迷迭香酸(4)、苦玄参苷Ⅳ(5)、苦玄参苷Ⅹ(6)、阿克替苷(7)。其中化合物2、3、4为首次从该植物中分离得到。     

青杨挥发油化学成分研究

用气相色谱 质谱 (GC MS)联用法 ,首次分析了青杨 (PopuluscathayanaRehd)干燥树皮的挥发油化学成分 ,共鉴定了 5 4个化合物