代谢型谷氨酸受体激动引起星形神经胶质细胞肿胀

用[~3H]-3-氧-甲基-D-葡萄糖摄取的方法测定细胞水含量,观察谷氨酸受体激动剂、拮抗剂对培养的星形神经胶质细胞水含量的影响,并观察细胞内、外钙的作用.结果发现:0.5,1,10 mmol/L的谷氨酸和1mmol/L的trans-ACPD(代谢型谷氨酸受体激动剂)1h均可以引起细胞的水含量增加,1mmol/L的 AMPA(离子型谷氨酸受体激动剂)不影响细胞的水含量,1mmol/L的L-AP3(代谢型谷氨酸受体拮抗剂)可以拮抗1mmol/L谷氨酸和trans-ACPD的作用;撤除细胞外液的钙,谷氨酸不再引起细胞的水含量增加, 20 μmol/ L 的 CdCl₂不能减轻谷氨酸的作用,而300μmol/L的CdCl₂及30μmol/L的胆罗啉(Dantrolene)均可以减轻谷氨酸的作用,提示代谢型谷氨酸受体激动引起星形细胞肿胀,细胞内、外Ca²⁺在谷氨酸引起的星形细胞肿胀中起一定的作用.     

低浓度钴离子选择性压抑鲫鱼视网膜中视杆信号的传递

低浓度(10～30μmol/L)钴离子(Co ²⁺)选择性压抑鲫鱼视网膜中视杆信号的传递,在分离、灌流的鲫鱼视网膜,10μmol/L Co ²⁺超极化视杆水平细胞,并完全压抑其对光反应,但对视锥水平细胞并无影响.此外,低Co ²⁺几乎完全压抑暗视视网膜电图(ERG)b波,但不影响明视b波,低Co ²⁺并不影响光感受器电位(PⅢ),也不影响视杆水平细胞谷氨酸受体的反应能力.其它2价金属离子(Co ²⁺,Mn²⁺)并不显示相似的选择性压抑作用,但谷氨酸转运蛋白的阻遏剂(β-OH-Asp)显示相似的作用,提示低Co ²⁺的作用可能与谷氨酸重摄取的压抑有关.     

缓激肽受体B1R对SD大鼠阴茎勃起功能影响的实验研究

摘要 目的：研究缓激肽受体B1R对大鼠阴茎勃起功能的影响。方法：通过腹腔注射B1受体激动剂[Des-Arg⁹]-Bradykinin与B1受体抑制剂Lys-(des-Arg⁹, Leu⁸)-Bradykinin,观察各组大鼠阴茎勃起功能,通过HE染色和Masson染色观察大鼠阴茎组织形态变化及纤维化水平的变化,通过Western-blot 检测大鼠阴茎组织TGF-β1、TNF-α与IL-6等炎症因子的表达情况。结果：（1）B1受体激动剂显著抑制大鼠阴茎勃起功能,并升高阴茎胶原纤维/肌原纤维比值;而B1受体抑制剂显著提升大鼠阴茎勃起功能,并降低阴茎胶原纤维/肌原纤维比值;（2）B1受体激动剂显著升高大鼠阴茎TGF-β1、TNF-α与IL-6蛋白表达水平,而B1受体抑制剂降低大鼠阴茎TGF-β1、TNF-α与IL-6蛋白表达水平。结论：B1受体可能通过炎症因子、阴茎组织纤维化影响阴茎勃起功能。     

大肠杆菌galK基因与gPt基因在爪蟾卵母细胞中的表达

把含有E．Coil gal K基因和gpt基因的几种重组质粒显微注射到爪蟾(Xencpus Laevis)卵母细胞的核中,用淀粉凝胶电泳检测到了细菌基因的表达产物。E．Coli gal K基因和gpt基因在爪瞻卵母细胞中的表达依赖于SV40病毒早期启动子的存在,而小鼠β-珠蛋白启动子在爪蟾卵母细胞中缺乏活性。此外,增强子在爪蟾卵母细胞中对细菌基因的活性有较为明显的增强作用。     

急性热暴露大白鼠肝脏热休克蛋白形成的研究

本研究采用人工气候室模拟自然热环境对大白鼠进行急性热暴露实验。用苯酚法提取大白鼠肝脏总RNA;用 Oligo(dT)-纤维素亲和层析柱分离出Poly(A)⁺mRNA。将各条件下的大白鼠肝脏Poly(A)⁺mRNA在麦胚无细胞体外转译系统中表达。结果证明急性热暴露大白鼠肝脏同样能生成分子量分别为71kD、90kD、98kD和 110kD的一组热休克蛋白。     

嘌呤生物合成调控——Ⅳ.purG OC突变位点及其与调节蛋白的结合功能研究

以野生型O⁺purG⁺和组成型O^C purG⁺为材料,通过体内克隆获得了初级克隆pLBG-1(O⁺)和pLBG-2(O^C),并对它们进行了亚克隆,得到可直接测定其5’调控区序列的亚克隆pLB1933(O⁺)和pLB1927(O^C).测序结果表明,O^C突变发生在purG5’端调控区的16bp PUR box上,使第3位的G变成了A.调节蛋白与PURbox的结合分析表明,调节蛋白能上O⁺purG⁺的PUR box结合,而不能和O⁺purG⁺的PUR box结合.这有力地证明了PUR box是调节蛋白的结合区,而PUR box的第3碱基是相对保守的,它的改变将直接导致PUR box功能的丧失.     

多细胞盐腺离子选择性分泌机理及其成因

为揭示多细胞盐腺对阳离子的选择性分泌机理, 在室内水培条件下, 研究了不同盐分胁迫(NaCl, KCl和NaCl+KCl)对多枝柽柳和短穗柽柳Na⁺, K⁺的分泌和累积, 以及不同盐腺抑制剂(orthovanadate, Ba²⁺, ouabain, tetraethylammonium[TEA]和verapami)对Na⁺和K⁺分泌的抑制及其在体内累积的影响. 结果表明, NaCl处理明显增加了盐腺对Na⁺分泌, 而KCl处理则显著促进K⁺分泌; Na⁺和K⁺的分泌量同累积量的比值表明, Na⁺的比值高于K⁺; 单一盐溶液中添加不同离子成分后, Na⁺和K⁺分泌表现不同: KCl处理中添加NaCl后, K⁺分泌速率显著降低, 但在NaCl处理中添加KCl, Na⁺的分泌则不受影响, 这些结果表明, 柽柳对Na⁺的分泌具有较高的选择性. 此外, 添加盐腺抑制剂后, 柽柳对Na⁺分泌分别受orthovanadate, ouabain, tetraethylammonium[TEA]和verapami的显著抑制, 而K⁺的分泌则分别受ouabain, tetraethylammonium[TEA]和verapami的显著抑制. orthovanadate对Na⁺, K⁺分泌抑制效应的差异, 可能是引起多细胞盐腺分泌Na⁺和K⁺能力不同的主要原因.     

离子通道在高等植物光合能量转换中的功能

将类囊体膜重组于脂双层上,用电生理-电压钳位技术测定离子通道,发现一种Cl^-通道,其单位电导为88pS,加入Cl^-通道抑制剂DIDS可以抑制Cl^-通道电流。进一步用几种离子通道抑制剂,即DIDS(Cl^-通道),TEA⁺(K⁺通道),La³⁺,Co²⁺和Verapamil(Ca²⁺通道)分别处理菠菜叶片和类囊体,研究对光合能量转换的影响:(1)叶片光合放氧降低,K_i(DIDS)=0.23μmol/L,K_i(TEA⁺)=0.455mmol/L;叶片荧光参数F_y/F_m和q_p略有变化,q_N和q _E-f增加,(2)类囊体△pH的建立(9-AA荧光猝灭)受到抑制;类囊体q_N明显降低。这些结果表明:离子通道对光合能量转换是必需的,类囊体膜离子通道直接参与了质子梯度的建立,而质膜离子通道较为间接地参与了光合作用能量转换。     

牛生长激素cDNA的分子克隆

我们克隆了与牛生长激素Poly(A)⁺RNA互补的DNA(cDNA)。首先从小牛垂体中提纯总的Pply(A)⁺RNA,用AMV逆转录酶合成单链cDNA,以单链cDNA为模板合成双链cDNA,用多聚G及多聚c谱尾法将双链cDNA克隆到pBR322质粒的Pst I位点上,构建成牛垂体PoIy(A)⁺RNA的cDNA文库。以牛生长激素基因为探针,筛选出7个阳性菌落,经电泳鉴定有两个菌落(1号和2号)含有大于500bp的插入片段。1号克隆经酶切图谱、southeTn blot 杂交及序列分析证实含有牛生长激素的编码序列。     

抗VacA+CagA+幽门螺杆菌IgY的抗感染作用研究*

为研究抗VacA⁺CagA⁺幽门螺杆菌(Hp)IgY的抗感染作用,以VacA⁺CagA+Hp为抗原免疫蛋鸡,聚乙二醇法和水稀释法从鸡卵黄中提取抗-VacA⁺CagA⁺Hp-IgY,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定IgY抗体效价。建立胃腔感染VacA⁺CagAHp的昆明系小鼠模型,观察抗-VacA⁺CagA⁺     

中华绒螯蟹眼柄MTXO细胞GABA受体通道研究

采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）眼柄视神经节端髓X器官（MTXO）三种类型神经内分泌细胞对0.01～5mmol/L γ氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）的反应,并结合选择性拮抗剂和激动剂的使用进行了GABA受体研究.在电流钳模式下,依据不同Nernst Cl^－电位,三种类型细胞均对GABA产生去极化或超级化反应.在电压钳模式下,GABA激活Cl^－通道电流（I_GABA）.I_GABA在灌流GABA后约1 200 ms内激活,800 ms内达到峰值,没有明显的脱敏反应,反转电位接近Nernst Cl^－电位.I_GABA幅值呈浓度依赖性,激活阈值为0.01 mmol/L,约在0.5 mmol/L达到饱和.药理学实验结果表明,中华绒螯蟹眼柄神经内分泌细胞GABA受体是Cl^－通道蛋白,对Cl^－离子通道阻断剂Picrotoxin和Niflumic acid敏感,但是对GABA_A受体拮抗剂Bicuculline和GABA_C受体激动剂cis-4-aminocrotonic acid (CACA)和trans-4-aminocrotonic (TACA)均不敏感.     

研究报告: 实验性自身免疫性葡萄膜炎模型中肝脏免疫系统紊乱的研究

葡萄膜炎是一种反复发作的炎症性疾病,可导致免疫系统功能障碍和多器官损伤．然而,葡萄膜炎是否导致肝功能损害尚不十分清楚．本文通过运用流式分析技术和激光共聚焦成像技术,研究了实验性自身免疫葡萄膜炎模型的肝脏病理和功能变化．结果显示肝损伤可出现在葡萄膜炎的炎症后期并与眼损伤程度相关．并且CD3⁺ CD4⁺ T细胞、CD3^- NK1.1⁺ DX5^- NK细胞、和CD11b⁺ F4/80^- ly6c⁺ 细胞在感染的眼睛和肝脏中增加．将CD3⁺ CD4⁺ T细胞回输给炎症的小鼠后,眼睛和肝脏的病理损伤加重．此外,在炎症的小鼠中可见血管扩张,大量淋巴细胞浸润到炎症的眼和肝脏的血管周围．总之,我们的研究结果提示,肝损伤可以发生在小鼠葡萄膜炎模型中,这种损伤可能与通过外周循环浸润到肝脏的CD3⁺ CD4⁺ T细胞有关．     

胰岛素及胰高血糖素对HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体功能的影响

为寻求一种可替代人肝细胞研究载脂蛋白（apolipoprotein, apo）CⅢ受体的生理模型,并探讨apoCⅢ受体的生理功能及其在内源性高甘油三酯血症发病机制中的作用,首先以¹²⁵I标记的人apoCⅢ为配体,利用放射性配体结合分析法观察了人肝癌细胞系HepG2细胞是否有apoCⅢ受体存在.结果证实HepG2细胞上存在高亲和力的、可饱和的、特异的apoCⅢ受体结合位点,其受体的亲和力(K_d)和apoCⅢ受体结合容量(B_max)分别为(9.53±1.03)×10^-9 mol/L和(3.28±0.31) μg/g.随后又分别研究了胰岛素及胰高血糖素对HepG2细胞apoCⅢ受体功能的影响,结果表明：胰岛素可使HepG2细胞apoCⅢ受体结合容量（B_max）显著增加,但对受体的亲和力（K_d）无影响;胰高血糖素可使HepG2细胞apoCⅢ受体亲和力显著下降（即K_d值升高）,对受体的结合容量无影响.提示人肝apoCⅢ受体的功能可能受胰岛素及胰高血糖素的不同调节.     

大鼠背根神经节神经元上失活 BK 通道特性的研究

大电导的电压和 Ca²⁺ 激活的 K⁺ 通道 (BK 通道 ) 在哺乳动物的组织中广泛表达,起着多种多样的作用 . 目前只有少数组织中 BK 通道的性质被深入地研究,而且鲜见有失活的 BK 通道 (BK_i) 的报道,尤其是在神经元中 . 发现在大鼠小直径的背根神经节 (DRG) 神经元中,普遍存在失活的 BK 通道 . 失活的 BK 电流成分是 Ca²⁺敏感的,可以被大电导的 BK 通道特异阻断剂 ChTX 所阻断,而且木瓜蛋白酶可以从胞外改变通道失活的特性 .     

宫颈癌患者阴道微生态变化及其与细胞免疫的相关性探讨

目的探讨宫颈癌患者阴道微生态变化及其与细胞免疫的相关性。方法回顾性分析2018年1月-2020年5月本院收治的且经病理确诊的73例宫颈癌患者(宫颈癌组)和同期65例体检筛查宫颈正常者(正常宫颈组)的临床病例资料。两组均采用直接涂片法、革兰染色法检测阴道分泌物中乳酸杆菌、滴虫、支原体、衣原体、细菌性阴道病、霉菌、淋菌、假丝酵母菌、人乳头瘤病毒(HPV)及阴道唾液酸甘酶活性、白细胞酯酶、过氧化氢等。另采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)及自然杀伤细胞(CD16⁺CD56⁺)水平。观察各组阴道微生态变化情况及外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD16⁺CD56⁺水平。另对比宫颈癌组中感染致病微生物者、阴道微生态失调者与未感染致病微生物者、阴道微环境正常者的CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD16⁺CD56⁺水平,采用Pearson相关性分析法分析宫颈癌组阴道乳酸杆菌定植密度与细胞免疫的相关性。结果宫颈癌组滴虫、支原体、衣原体、霉菌、细菌性阴道病、HPV感染检出率及阴道微生态失调率均高于正常宫颈组,宫颈癌组乳酸杆菌定植密度低于正常宫颈组,差异均有统计学意义(P<0.05),宫颈癌组淋菌、假丝酵母菌感染检出率与正常宫颈组比较差异均无统计学意义(P>0.05)；宫颈癌组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD16⁺CD56⁺水平均低于正常宫颈组,CD8⁺水平高于正常宫颈组,差异均有统计学意义(P<0.05)；宫颈癌组中滴虫、支原体、衣原体、霉菌、细菌性阴道病、HPV感染者及阴道微生态失调者CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD16⁺CD56⁺均低于未感染者、阴道微环境正常者,CD8⁺高于未感染者、阴道微环境正常者,差异均有统计学意义(P<0.05)；宫颈癌患者乳酸杆菌定植密度与CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD16⁺CD56⁺呈正相关性(P<0.05),与CD8⁺呈负相关性(P<0.05)。结论宫颈癌患者阴道致病微生物感染率较健康人群高,同时细胞免疫功能降低,增加罹患宫颈癌的风险。     

甘草质膜水通道蛋白GuPIP1对甘油的转运

旨在进行甘草质膜水通道蛋白GuPIP1对水和溶质通透性的鉴定.将GuPIP1全长编码区的cDNA构入非洲爪蟾卵母细胞检测系统的表达栽体psp64 Poly(A),并将体外转录获得GuPI1的cRNA显微注射入卵母细胞,使GuPIP1基因在卵母细胞中表达,通过测定卵母细胞对水和溶质的转运功能来鉴定GuPIP1的转运功能.结果表明,GuPIP1在异源表达系统非洲爪蟾卵母细胞中具水和甘油通透性,但不能转运尿素,为探讨GuPIP1在植株生理中的作用奠定基础.     

反复呼吸道感染儿童血清维生素A、维生素E水平与免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群、NK细胞及骨密度的关系分析

摘要 目的：探讨反复呼吸道感染（RRTI）儿童血清维生素A、维生素E水平与免疫球蛋白（Ig）、T淋巴细胞亚群、NK细胞及骨密度的关系。方法：选择2018年2月至2020年12月我院儿科收治的107例RRTI患儿（感染组）和83例同期于我院体检的健康儿童（对照组）为研究对象,检测两组血清维生素A、维生素E水平、Ig水平,外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞占比以及骨密度。分析维生素A、维生素E与Ig、T淋巴细胞亚群、NK细胞及骨密度的相关性。结果：感染组血清维生素A、维生素E、IgG、IgA、IgM及外周血CD3⁺T细胞百分比、CD4⁺T细胞百分比、CD3^-CD56⁺ NK细胞百分比、CD56brightNK细胞百分比、CD56dimNK细胞百分比、桡骨和胫骨骨密度均低于对照组（P＜0.05）,外周血CD8⁺T细胞百分比高于对照组（P＜0.05）。血清维生素A及维生素E水平与外周血CD8⁺T细胞百分比呈负相关（P＜0.05）,与IgG、IgA、IgM水平,外周血CD3⁺ T细胞百分比、CD4⁺T细胞百分比、CD3^-CD56⁺ NK细胞百分比、CD56brightNK细胞百分比、CD56dimNK细胞百分比、桡骨和胫骨骨密度呈正相关（P＜0.05）。结论：RRTI患儿血清维生素A、维生素E水平明显降低,且与免疫功能障碍和骨密度降低有关。     

基因重组人白细胞介素-3在猴中的药代动力学

猕猴静脉注射¹²⁵Ⅰ标记基因重组人白细胞介素-3(30μg/kg)后RHPLC测定血浆浓度曲线,快速和末端半衰期分别为(0.15± 0.13)和(2.21± 0.59)h.皮下注射30,90和180μg/kg消除半衰期2.0～3.8 h,AUC基本上随皮下注射(SC)剂量而增大,CL_s相近 吸收受注射部位浓度限制.生物利用度0.71.药物在体内迅速降解.组织分布泌尿系统浓度最高,胆肠道、淋巴、骨髓和脾等与血浆相近,脑最低尿分析提示肾是降解器官之一     

Biodegradation of monohalogenated alkanes by soil NH(3)-oxidizing bacteria

Although cooxidative biodegradation of monohalogenated hydrocarbons has been well studied in the model NH₃-oxidizing bacterium, Nitrosomonas europaea, virtually no information exists about cooxidation of these compounds by native populations of NH₃-oxidizing bacteria. To address this subject, nitrifying activity was stimulated to 125–400 nmol NO₃ ^– produced g^–1 soil h^–1 by first incubating a Ca(OH)₂-amended, silt loam soil (pH 7.0±0.2) at field capacity (270 g H₂O kg^–1 soil) with 10 μmol NH₄ ⁺ g^–1 soil for 14 days, followed by another 10 days of incubation in a shaken slurry (2:1 water:soil, v/w) with periodic pH adjustment and maintenance of 10 mM NH₄ ⁺. These slurries actively degraded both methyl bromide (MeBr) and ethyl chloride (EtCl) at maximum rates of 20–30 nmol ml^–1 h^–1 that could be sustained for approximately 12 h. Although the MeBr degradation rates were linear for the first 10–12 h of incubation, they could not be sustained regardless of NH₄ ⁺ level and declined to zero over 20 h of incubation. The transformation capacity of the slurry enrichments (~1 μmol MeBr ml^–1 soil slurry) was similar to the value measured previously in cell suspensions of N. europaea with similar NH₃-oxidizing activity. Several MeBr-degrading characteristics of the nitrifying enrichments were found to be similar to those documented in the literature for MeBr-degrading methanotrophs and facultatively methylotrophic bacteria. Electronic Publication     

P物质及相关肽的非肽类拮抗剂研究方兴未艾

速激肽家族的三大成员:P物质(SP)、神经激肽A(NKA)和神经激肽B(NKB)是采用特异性的激动剂确定它们分别作用于NK_1、NK_2、和NK_3受体。SP肽类拮抗剂存在选择性差、亲和力低、代谢不稳定、有致瘫作用