嘌呤生物合成调控研究 V.鼠伤寒沙门氏菌无purJ的核苷酸序列证据

早期的遗传分析表明鼠伤寒沙门氏菌嘌呤核苷酸从头合成途径中AICAI Transformylase、IMP Cyclohydrolase和GAR合成酶分别由三个结构基因purJ、purH和purD编码。这三个结构基因构成一个操纵子,定位于遗传图90分钟”,2J。但最近对大肠杆菌这一操纵子的核苷酸序列测定及其编码产物的研究,发现在大肠杆菌中为上述三个酶编码的结构基因只有purH和purD,并不存在purJ结构基因。新近Chopra报道了鼠伤寒沙门氏菌位于purH内的EcoRI切点下游直至purD终止密码的核苷酸序列,同源性比较分析显示鼠伤寒沙门氏菌这部分序列分别与大肠杆菌的purH和purD有85％和88％的同源性。尽管如此,对鼠伤寒沙门氏菌中究竟有无purJ     

一摸香叶精油对致倦库蚊的生物活性及其成分分析

参照“农药登记卫生用杀虫剂的室内药效评价/驱避剂GB/T 17322.10—1998”,研究了一摸香鲜叶的水蒸汽蒸馏精油对致倦库蚊的驱避作用;参照“电热片蚊香的室内药效测定方法GB 13917.5—1992”,测试了该精油对致倦库蚊成蚊的熏杀效果;采用浸液法测试了其对致倦库蚊幼虫及蛹的毒杀活性;并用GC-MS测试分析了其化学成分.结果表明：一摸香叶精油在1.5 mg·cm^-2剂量下对实验室饲养的未吸血致倦库蚊雌成蚊的驱避100%保护时间为(6.54±0.17) h,对成蚊的熏杀24 h LC₅₀值为6.895 μg·cm^-3,对成蚊的熏蒸KT₅₀值为6.46 min (熏蒸剂量为11.850 μg·cm^-3),对Ⅳ龄期幼虫的24 h毒杀LC₅₀值为119.020 μg·ml^-1.精油中共鉴定出17种化合物,占该精油挥发性成分总量的97.4%.说明一摸香叶精油对致倦库蚊具有显著的驱避作用和极强的毒杀活性.     

苹果茎沟病毒的提纯和检测

用生物学和血清学方法从苹果分离鉴定出苹果茎沟病毒G-2和TC-3分离物,采用皂土澄清、15％蔗糖垫超离心、10％～40％蔗糖梯度离心等步骤,获得提纯的病毒样品,紫外吸收比值A_(260/280)为1.15。13％SDS-PAGE法测定的病毒外壳蛋白分子量为31000。用提纯的苹果茎沟病毒G-2分离物制备的兔抗血清,PTA-ELISA测定的效价为1/64000,特异性强。用PAS-ELISA可成功地检测出苹果茎沟病毒,此外还试验了DAS-ELISA,并证明其检测苹果茎沟病毒的效果与PAS-ELISA一致。     

竹叶花椒果实精油对两种蚊虫的毒杀活性研究

采用浸液法测试了竹叶花椒果实的水蒸汽蒸馏精油对白纹伊蚊和致倦库蚊幼虫的毒杀效果,并用三角瓶密闭熏蒸法研究了精油对这两种成蚊的熏杀活性;此外,采用GC-MS分析了该精油的化学成分。研究结果:(1)精油对白纹伊蚊和致倦库蚊的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ龄期幼虫及蛹的LC50值分别为25.634/61.472、31.763/76.431、52.356/110.172、258.497/121.884和198.263/162.048mg.L-1;(2)精油对白纹伊蚊和致倦库蚊成蚊的LC50值分别为24.957和29.517μg.cm-3;(3)在147.52μg.cm-3熏杀剂量下,精油对白纹伊蚊和致倦库蚊成蚊的KT50值分别为3.493和2.993min,24h致死率均为100%;(4)共鉴定出18种化合物,其中萜烯类10种,占精油总量的67.122%,为竹叶花椒果实精油的主要成分。竹叶花椒果实精油对白纹伊蚊和致倦库蚊均有明显的致死作用,且作用速度快,具有开发为植物源杀蚊剂的潜力。     

嘌呤生物合成调控研究 V.鼠伤寒沙门氏菌无purJ的核苷酸序列证据

早期的遗传分析表明鼠伤寒沙门氏菌嘌呤核苷酸从头合成途径中AICAI Transformylase、IMP Cyclohydrolase和GAR合成酶分别由三个结构基因purJ、purH和purD编码。这三个结构基因构成一个操纵子,定位于遗传图90分钟”,2J。但最近对大肠杆菌这一操纵子的核苷酸序列测定及其编码产物的研究,发现在大肠杆菌中为上述三个酶编码的结构基因只有purH和purD,并不存在purJ结构基因。新近Chopra报道了鼠伤寒沙门氏菌位于purH内的EcoRI切点下游直至purD终止密码的核苷酸序列,同源性比较分析显示鼠伤寒沙门氏菌这部分序列分别与大肠杆菌的purH和purD有85％和88％的同源性。尽管如此,对鼠伤寒沙门氏菌中究竟有无purJ     

嘌呤生物合成调控——Ⅳ.purG OC突变位点及其与调节蛋白的结合功能研究

以野生型O⁺purG⁺和组成型O^C purG⁺为材料,通过体内克隆获得了初级克隆pLBG-1(O⁺)和pLBG-2(O^C),并对它们进行了亚克隆,得到可直接测定其5’调控区序列的亚克隆pLB1933(O⁺)和pLB1927(O^C).测序结果表明,O^C突变发生在purG5’端调控区的16bp PUR box上,使第3位的G变成了A.调节蛋白与PURbox的结合分析表明,调节蛋白能上O⁺purG⁺的PUR box结合,而不能和O⁺purG⁺的PUR box结合.这有力地证明了PUR box是调节蛋白的结合区,而PUR box的第3碱基是相对保守的,它的改变将直接导致PUR box功能的丧失.     

Regulation of purine biosynthetic genes expression in Salmonella typhimurium Ⅳ O~c mutation site of purG and its function analysis

Salmonella typhimurium 5 phosphoribosylformylglycinamide (FGAR) amidotransferase encoded by purG gene catalyzes the conversion of FGAR to formylglycinamide ribonucleotide (FGAM) in the presence of glu-tamine and ATP for the de novo purine nucleotide biosynthesis. purG gene is negatively regulated by a repressor-oper-ator system. The O purG and OC purG were cloned respectively in vivo. Restriction enzymes analysis of preliminary clones pLBG-1 (O ) and pLBG-2 (OC) were carried out. The hybrid plasmids pLB1933 (O ) and pLB1927 (OC) containing 5 control region of purG were constructed and the DNA sequences were determined respectively. DNA se-quences data showed that Oc mutation of purG occurred at the 3rd position of 16 bp PUR box in the 5' control region ( G→A). Gel retardation experiment indicated that the repressor bound well with O PUR box, but not with Oc PUR box. The result strongly supported the idea that PUR box is the binding region of represser protein and the 3rd posi-tion base G of PUR bo     

椿叶花椒果实精油对两种蚊虫的生物活性及成分分析

为筛选环保型的植物源灭蚊活性物质, 研究了椿叶花椒 Zanthoxylum ailanthoides 果实精油对白纹伊蚊Aedes albopictus和致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus成蚊的熏杀活性, 并测试了精油对这两种蚊幼虫的毒杀效果。此外, 采用GC-MS分析了该精油的化学成分。 结果表明：在102.145 μg·cm^-3熏杀剂量下, 精油对白纹伊蚊和致倦库蚊成蚊的KT50值分别为2.788和3.505 min, 24 h致死率分别为100%和97.53%。该精油对白纹伊蚊和致倦库蚊4龄幼虫的LC50值分别为45.237和20.759 mg·L^-1。从椿叶花椒果实精油中共鉴定出14种化合物, 其中2-十一酮为主要成分, 相对含量为89.86%。结果说明椿叶花椒果实精油对两种蚊虫均有明显的杀虫活性, 具有开发成植物源灭蚊剂的潜力。