鳙团移核鱼LDH,MDH同工酶的研究

对二龄鳙鱼细胞核和团头鲂细胞质配合的核质杂种鱼－－鳙团移核鱼及其亲本,供核体鳙鱼和受核体团头鲂肌组织ＬＤＨ、ＭＤＨ同工酶进行了研究试验。鳙团移核鱼和供核体鳙鱼肌组织ＬＤＨ同工酶均具有ＬｄｈＡ２Ｂ２一条谱带;受核体团头鲂的则具有ＬｄｈＡ２、ＬｄｈＡ２Ｂ１、ＬｄｈＡ２Ｂ２、ＬｄｈＡ１Ｂ３、ＬｄｈＢ４等五条谱带。移核鱼和供核体鳙鱼肌组织的ＭＤＨ同工酶都各具有二条谱带：Ｓ－ｍｄｈＡ２、Ｓ－ｍｄｈＡＢ;受核     

泰山赤鳞鱼同工酶的研究

采用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术研究了泰山赤鳞鱼早期发育阶段（受精后０—１２０ｈ）及成体眼、脑、心、肾、肝、肌６种组织中的ＬＤＨ同工酶分化表达谱式。结果表明：（１）赤鳞鱼在胚胎发育过程中Ｌｄｈ－Ａ基因和－Ｂ基因同时表达,形成５种不同形式的四聚体（Ｂ４、ＡＢ３、Ａ２Ｂ２、Ａ３Ｂ、Ａ４）。与大多数硬骨鱼相比,赤鳞鱼ＬＤＨ同工酶具有独特的早期个体发育谱式：在整个胚胎发育时期,Ａ亚基与Ｂ亚基的活性几乎相等。（２）赤鳞鱼的ＬＤＨ同工酶谱具有明显的组织特异性。Ｌｄｈ－Ｃ基因仅在肝脏组织表达,以向阴极迁移的分子形式（ＬＤＨ－Ｃ４）特异地表达。     

中国林蛙乳酸脱氢酶多基因系统及基因间连锁关系的研究

（１）用聚丙烯酰胺凝胶电泳对山西产中国林蛙４个地理群的３３３只林蛙进行了分析,结果表明：中国林蛙的ＬＤＨ由ＬＤＨ－Ａ,ＬＤＨ－Ｂ和ＬＤＨ－Ｃ３个基因决定。ＬＤＨ－Ａ是单态座位,ＬＤＨ－Ｂ和ＬＤＨ－Ｃ均为多态座位,每个多态座位均有两个等位基因。ＬＤＨ－Ｂ与ＬＤＨ－Ｃ呈紧密连锁关系。认为ＬＤＨ－Ｃ是ＬＤＨ－Ｂ的重复产物。（２）热稳定性、尿素处理稳定性及组织特异性研究表明：ＬＤＨ对温度和尿素处理稳定性顺序为Ａ４＞Ｂ’４＞Ｂ４＞Ｃ４。Ａ４在骨骼肌和肝脏等组织中活力最大,Ｂ４在心肌和卵巢中活力最强,ＬＤＨ－Ｃ主要在眼球和卵巢中表达。（３）Ｌｄｈ－ｂ和Ｌｄｈ－ｂ＇在不同地理群间呈差异分布,随着纬度的增高,Ｌｄｈ－ｂ在种群中的频率增大。     

泰山郝鳞鱼同工酶的研究

采用琼脂糖凝胶电泳或聚丙酰胺垂直板凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术研究了泰赤鳞鱼早期发育阶段（受精后０－１２０ｈ）及成体眼、脑、心、肾、肝、肌６种组织中的ＬＤＨ同工酶分化表达谱式。结果表明：（１）赤鳞鱼在胚胎发育过程中Ｌｄｈ－Ａ基因和－Ｂ基因同时表达,形成５种不同形式的四聚体（Ｂ４、ＡＢ３、Ｂ３Ｂ、Ａ４）。与大多数硬骨鱼相比,赤鳞鱼ＬＤＨ同工酶具有独特的早期个体发育谱式：在整个胚胎发育时期,Ａ亚基与Ｂ亚基     

黑爪异鲵LDH同工酶谱系的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对黑爪异鲵１２种组织的ＬＤＨ同工酶谱系进行了研究,酶谱呈５带型,但在雄性肝中出现了ＬＤＨ－Ｃ带,在精巢中未发现,相对迁移率为Ｂ＞Ａ＞Ｃ。 经比较分析,其ｌｄｈ－Ｃ基因表达的组织特异性和性别特异性不仅证实黑爪异鲵是小鲵科中一个较原始的类群,且表明ｌｄｈ－Ｃ基因这种表达调控方式在进化中为鱼类与鸟类。哺乳类之间的一种过渡类型。     

野生大家鼠和实验大白鼠血红蛋白和乳酸脱氢酶同工酶的比较研究

本文对野生大家鼠（Ｒａｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）和Ｗｉｓｔａｒ品系实验大白鼠的血红蛋白（Ｈｂ）及组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶进行了电泳分析,结果表明,两种鼠均表现了Ｈｂ的多态性,其中ＨｂＩ型都含有８个成分,各成分的泳动率相同。两种鼠的心脏ＬＤＨ同工酶都含有ＬＤＨ１,ＬＤＨ２,ＬＤＨ３和ＬＤＨ５,而且各谱带泳动率相近似,其余组织ＬＤＨ谱带泳动率有明显的差异,表现了组织和种（或品系）的特异性。从电泳图谱上发现Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＬＤＨ５（Ａ或Ｍ亚基纯合体）出现亚带,而ＬＤＨ１（Ｂ或Ｈ亚基纯合体）则未发现,可确定变异是由于Ａ或Ｍ亚基位点发生突变,出现等位基因而导致。对褐家鼠的ＬＤＨ４出现亚带也进行了讨论     

六种鼠乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶位点变异的研究

用电泳比较分析了鼠科动物６个种的组织ＬＤＨ同工酶的Ａ、Ｂ、Ｃ亚基和ＳＯＤ同工酶位点的种属差异。结果表明,ＬＤＨ的Ａ和Ｂ亚基在进化上的可变性程度不同。在被分析的２个属共６种鼠中,首次发现Ｂ亚基的结构具有属的特征,同属的鼠种Ｂ亚基泳动度相同,在垂直凝胶电泳板上处于同一泳动线上。不同属的鼠其Ｂ亚基泳动度不同,家鼠属的鼠Ｂ亚基比姬鼠属的泳动快;Ａ亚基的结构既有属的特性,更具有种的特征,同属不同种的鼠Ａ亚基泳动速度不同,表现为ＬＤＨ同工酶带的间距不同。ＬＤＨ的Ｃ亚基结构因鼠种不同而异,由Ｃ亚基组成的ＬＤＨ－Ｘ带黄毛鼠位于自身的ＬＤＨ－３和ＬＤＨ－４之间,社鼠和褐家鼠此带位于自身的ＬＤＨ－４和ＬＤＨ－５之间,白腹巨鼠此带位于自身的ＬＤＨ－５以外的阴极端,与黑线姬鼠此带的位置特征相同。ＳＯＤ同工酶带只表现种的差异,其３条带泳动速度的改变具有协同而变的共同特点。被分析的鼠种经配对法比较生化特征的相同程度,初步表明黄毛鼠亲缘上与褐家鼠比较近,白腹巨鼠亲缘上又比其余３种鼠更近于姬鼠属。     

暗纹东方同工酶生化表现型的研究

利用聚丙烯酚胺凝胶垂直平板电泳方法,对暗纹东方的心、肝、肾,肌、性腺５种不同组织的７种同工酶（ＥＳＴ、ＬＤＨ、ＰＯＤ、ＭＤＨ、ＳＯＤ、ＳＤＨ、α－ＡＭＹ）进行了研究,讨论了各同工酶的基因表达谱式,观察到ＥＳＴ同工酶存在着多态现象;ＬＤＨ同工酶有二个基因位点,但只表现３条带,Ａ与Ｂ亚基的结合受阻;ＭＤＨ同工酶存在性别差异,说明决定ＭＤＨ同工酶表达的因素在不同性别中存在差异;ＳＯＤ同工酶有３个基因位点。各同工酶酶谱稳定,有组织特异性,倡ＥＳＴ、ＭＤＨ、ＳＯＤ、ＰＯＤ同工酶在各组织器官中又表现出较大的一致性,有利于物种的鉴定。α－ＡＭＹ与ＳＤＨ只在个别组织中有活性,可能与特定组织与器官的形态发生与机能分化有关。     

黄鳝性逆转过程中同工酶的分析研究：I.雌雄个体不同组织的同工酶分析

作者采用三种垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对雌雄黄鳝６种组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酯酶（ＥＳＴ）进行了研究。结果表明ＬＤＨ同工酶谱为细带型,可分为３区８条带,其迁移率率为Ａ＞Ｂ＞Ｃ,其中Ｃ４仅出现在心、脑和肌肉中。ＬＤＨ在肝中表达甚微。ＥＳＴ同工酶显示３区７条带。黄鳝的同工酶有明显的组织较明显。在两性中的表达也存在一定的差异,这种差异ＥＳＴ比ＬＤＨ明显;肝、肾和性腺比其它组织较明显。这两种同工酶在雌性     

短芽孢杆菌α—乙酰乳酸脱羧酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达

用ＰＣＲ方法扩增短芽孢杆菌α－乙酰乳酸脱羧酶基因,引入原核表达载体ｐＢＶ２２０中,得到重组质ｐＡＬＤ１．ｐＡＬＤ１的ＡＬＤＣ基因在大肠杆菌中高效表达,每毫升发酵液产酶８０单位以上,双原始菌株提高２００余倍。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白质分析表明,大肠杆菌ＤＨ５α表达的ＡＬＤＣ占细胞总蛋白量的４０％以上。研究了重组质粒稳定性,大肠杆菌ＤＨ５α和ＨＢ１０１分别大无选择压力下３０℃连续培养５０代以上,４１℃诱导     

黄鳝性逆转过程中同工酶的分析研究 Ⅰ．雌雄个体不同组织的同工酶分析

作者采用三种垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对雌雄黄鳝６种组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酯酶（ＥＳＴ）进行了研究。结果表明ＬＤＨ同工酶谱为细带型,可分为３区８条带,其迁移率为Ａ＞Ｂ＞Ｃ,其中Ｃ＿４仅出现在心、脑和肌肉中。ＬＤＨ在肝中表达甚微。ＥＳＴ同工酶显示３区７条带。黄鳝的同工酶有明显的组织特异性,在两性中的表达也存在一定的差异,这种差异ＥＳＴ比ＬＤＨ明显;肝、肾和性腺比其它组织较明显。这两种同工酶在雌性中的表达均比在雄性中强。以上反映了差别的基因活性。本文还讨论了黄鳝同工酶的遗传基础,亚基的组成以及ＬＤＨ迁移率和黄鳝演化地位的关系。     

社鼠组织器官同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法,分析了社鼠的肝、肾、心肌、骨骼肌、肺、脾和脑等多种组织器官的ＬＤＨ、ＡＤＨ、ＥＳＴ、和ＳＯＤ４种同工酶,对各组织器官的酶带数目和分布,以及酶活性进行了比较研究。结果表明,社鼠的ＬＤＨ同工酶、ＡＤＨ同工酶和ＥＳＴ同工酶具有比较明显的组织特异性,而ＳＯＤ同工酶的组织特异性较低。肺和脾除ＥＳＴ同工酶活性较高外,脑除ＬＤＨ同工酶活性较高外,其它３种同工酶的活性均较低;而肝和肾中４种同工酶的活性普遍很高。心肌和骨骼肌因氧张力不同而使ＬＤＨ同工酶酶谱存在明显差异,但其它３种同工酶酶谱却非常相似。同工酶的组织特异性与各组织器官所执行的生理功能是相一致的     

中华姬鼠与大林姬鼠的同工酶差异

中华姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｄｒａｃｏ）和大林姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｐｅｎｉｎｓｕｌａｅ）是形态学上十分相似的两种鼠类。为了对两种姬鼠的分类提供生物化学方面的依据,采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法比较和分析了两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶、ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶的差异。结果表明,两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶酶谱基本相似,而ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶酶谱则存在明显的种间差异。根据ＥＳＴ同工酶Ａ２带的有无和ＳＯＤ同工酶主带等电点的差别,能将两种姬鼠很容易区分开来。     

环腺苷一磷酸对人Ⅰ型17β羟类固醇脱氢酶在绒癌细胞系中表达的调节作用

由Ｈ ＳＤ１７Ｂ１基因编码的人Ⅰ型１７β－羟类固醇脱氢酶（１７β－ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｔｙｐｅ１简称Ⅰ型１７ＨＳＤ）催化雌酮与雌二醇之间的转化。本文研究环腺苷一磷酸简化（ｃＡＭＰ）对该酶在培养的绒癌胞系（ＪＡＲ和ＪＥＧ－３）中表达的调节作用。用８－ｂｒｏｍｏ－ｃＡＭＰ处理两种绒癌细胞后,观察到在伴随１．３ｋｂⅠ型１７ＨＳＤｍＲＮＡ表达的同时,Ｉ型１７ＨＳＤ蛋白浓度     

二倍体型与三倍体型卫氏并殖吸虫同工酶谱的发育变异及其分类学意义

采用生趣板状聚丙烯酰胺胶是民泳法分析比较了二倍体型与三倍体型卫氏并殖吸虫童虫、成虫的醛缩酶、已糖激酶和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶的同工酶谱,结果显示２ｎ型与３ｎ型卫氏并殖吸虫在不同发育期之间及两型吸虫相应各发育期之间ＡＬＤ、ＨＫ及Ｇ６ＰＤ同工酶谱均显著变异,变异表现为两种方式,一种是在同一个基因座位区的同工酶的酶带数目     

Kl LAC4用作白色念珠菌的报告基因

由于ｌａｃＺ基因在白色念珠菌中不能工作。将克氏酵母的β－半乳糖苷酶基因Ｋｌ ＬＡＣ４构建了能在白色念珠菌中工作的报告基因。Ｋｌ ＬＡＣ４基因融合到白色念珠菌乙醇脱氢酶基因（ＡＤＨ１）的启动子后面,在ＡＤＨ１终止子的共同控制下构建Ｋｌ ＬＡＣ４的表达质粒ｐＹＰＢ１－ＬＡＣ４。ＰＹＯＢ１－ＬＡＣ４转化白色念珠菌并测定了在固体培养基中的β－半乳糖苷酶活性以及在液体增减基的β－半乳糖苷酶活力。结果表明Ｋｌ     

糖基化3－磷酸甘油醛脱氢酶的含糖量及其构象变化

通过对ＧＡＰＤＨ及ｇＧＡＰＤＨ含糖量、ＣＤ、荧光及ＤＴＮＢ的修饰表明：用间氨基苯硼酸琼脂糖（ｍ－ＡＰＢＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ６Ｂ）亲和层析法分离的兔肌ｇＧＡＰＤＨ每分子含有１．８９个糖基。ｇＧＡＰＤＨ及ＧＡＰＤＨ的远紫外ＣＤ谱差别较小,但近紫外差别较明显。两者内源荧光在不同浓度的ＧｕＨＣｌ溶液中的变化亦有一定差异。ＤＴＮＢ对酶活性部位巯基的修饰表明,ｇＧＡＰＤＨ的ＤＴＮＢ修饰的快相一级动力学常数大于ＧＡＰＤＨ动力学常数一个数量级。以上结果提示：糖基化导致酶分子及活性部位的空间结构改变,糖基化位点可能发生在酶活性部位附近。     

糖基化3－磷酸甘油醛脱氢酶的含糖量及其构象变化

通过对ＧＡＰＤＨ及ｇＧＡＰＤＨ含糖量、ＣＤ、荧光及ＤＴＮＢ的修饰表明：用间氨基苯硼酸琼脂糖（ｍ－ＡＰＢＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ６Ｂ）亲和层析法分离的兔肌ｇＧＡＰＤＨ每分子含有１．８９个糖基。ｇＧＡＰＤＨ及ＧＡＰＤＨ的远紫外ＣＤ谱差别较小,但近紫外差别较明显。两者内源荧光在不同浓度的ＧｕＨＣｌ溶液中的变化亦有一定差异。ＤＴＮＢ对酶活性部位巯基的修饰表明,ｇＧＡＰＤＨ的ＤＴＮＢ修饰的快相一级动力学常数大于ＧＡＰＤＨ动力学常数一个数量级。以上结果提示：糖基化导致酶分子及活性部位的空间结构改变,糖基化位点可能发生在酶活性部位附近。     

构建基因工程菌发酵产生维生素C的前体2-酮基-L-古龙酸

从棒状杆菌ＳＣＢ３０５８克隆得到两个２,５－ＤＫＧ＾＊＊还原酶基因后,构建了两个能够表达２,５－ＤＫＧ还原酶的基因工程大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ＰＥＴ９ａⅡ和ＤＨ５α（ｐＢＬ４）和一个基因工程欧文氏菌ＥＲ９７。２,５－ＤＫＧ还原酶基因分别受控于ＰＬ或Ｔ７启动子,通过加入ＩＰＴＧ或提高温度进行诱导,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和酶活测定确定它们在诱导后得到了高表达,用细胞抽提液在加入辅酶ＮＡＤＰＨ的体外实验中转     

牛生长激素释放因子的融合表达及其产物的化学加工

通过寡核苷酸引导的定位突变,在人工全合成的第２７位为Ｉｌｅ的牛生长激素释放因子［Ｉｌｅ２７］ｂＧＲＦ（１－４４）ＯＨ基因的５＇端ＡＴＧ后插入Ｔｒｐ密码子序列,并分别了构建了Ｐｌ ｐｒｏｍｏｔｅｒ控制下、以β－半乳糖苷酶和ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ结合ＩｇＧ ｄｏｍａｉｎＢ、Ｃ为载体蛋白的融合型基因表达质粒ｐＢＬＥ３１０和ｐＢＬＰＡＥ２Ｄ,在大肠杆菌中得到高效表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,表达产物β－Ｇａｌ