纤维素生物质新型水解技术的研究进展

纤维素生物质水解技术是生物质资源转化的关键技术之一,在传统的酸水解和酶水解技术基础上,近年来出现了一些新型的水解技术,它们一般都具有绿色高效、对环境友好等特点;回顾并综述了纤维素生物质水解技术的最新进展,并对纤维素生物质水解技术的发展研究方向提出了设想.     

光合菌群发酵玉米秸秆水解液产氢

以玉米秸秆水解液作为产氢底物,研究光合菌群产氢性能。考察了硫酸浓度、固液比、水解时间、水解温度等秸秆水解条件对产氢的影响,确定了最佳水解条件,并对不同脱毒方法进行了对比研究。结果表明,最佳的水解条件为硫酸浓度1%,固液比1:12,水解时间0.5 h,水解温度为110°C。采用Ca(OH)2脱毒方法的产氢效果要优于其他2种脱毒方法;NH4+在一定浓度范围内对该光合菌群产氢有促进作用。     

苏云金芽孢杆菌HD-1伴孢晶体水解规律的研究

采用HCl将蛋白质彻底水解的方法对苏云金芽孢杆菌HD-1伴孢晶体的水解规律和酸水解条件下芳香族氨基酸的被破坏程度进行了研究,不经衍生HPLC法直接测定水解样中酪氨酸的含量。得出酸水解的最佳时间为24h、水解剂的用量为1．0mlHCl／mg伴孢晶体、水解最佳温度为110℃。该研究为Bt制剂毒力效价的测定奠定了基础。     

菜籽蛋白酶解液制备N-酰化肽的研究(Ⅱ)——蛋白水解率对N-酰化肽性能的影响

用不同水解率的水解液合成了N 酰化肽 ,对比了它们的表面活性 ,由碱性蛋白酶水解菜籽蛋白 ,当水解率为 30 .6%时 ,所合成的N 酰化肽性能比水解率为 1 5.7%、2 0 .3%时要好 ,用SephadexG 1 5分析了水解液中肽分子量的分布情况 ,发现较佳水解率的水解液中 80 %的肽分子量小于 1 50 0Da。     

蚕蛹蛋白质的酶—酸两步水解

将木瓜蛋白酶催化水解和酸水解联合起来应用于水解蚕蛹蛋白质制备氨基酸。与单纯酶解(水解时间48h)或酸水解(水解时间24h)相比,水解时间分别缩短了2/3和1/3,后处理简化,能耗降低。研究了蚕蛹蛋白质水解的影响因素,在适宜条件下,得到有香味的混合氨基酸,收率为98.5％(对蛋白质),其中含有17种游离氨基酸(色氨酸未测),含量为47.9％。     

蔗渣制备低聚木糖的有机酸预处理条件研究

采用有机酸法水解制备蔗渣低聚木糖,通过单因素实验、正交试验研究了甲酸-乙酸比例、温度、水解时间、固液比等因素的影响,以水解率、总糖收率和聚糖收率为考察指标,得到有机酸法水解蔗渣制备低聚木糖的最优预处理条件为甲酸∶乙酸=9∶1、水解温度100℃、水解时间60min、固液比1∶7,在此条件下蔗渣水解率为47.78%,总糖收率20.57%,聚糖收率11.88%。HPLC检测结果显示:水解物中木二糖含量为17.69%,木三糖为11.23%,更高聚合度聚糖所占比例为29.42%,木糖为36.78%。半纤维素有机酸水解物可进一步通过木聚糖酶水解、分离制备低聚木糖。研究结果可为蔗渣制备低聚木糖新工艺提供科学依据。     

角蛋白质酸水解法介绍

<正> 角蛋白质经酸水解可以获得多种氨基酸,水解时,酸比、温度和时间三个因素关系到水解产品的收率。近年来许多国家对毛发水解因素研究颇多,在水解工艺上提出了一些改进意见:1.Warenke 提出用钴、镍、铜的离子作催化剂可以加速 DL—丝氨酸甲酯的水解速度2.Davis Clyde Faward Jr 提出用金属络合物作催化剂可以加速多肽化合物的水     

盐酸催化水解槐角异黄酮的研究

利用盐酸甲醇溶液对槐角总异黄酮进行水解制备染料木黄酮。采用高效液相色谱法检测槐角异黄酮水解率。探讨水解时间、盐酸浓度和水解温度对异黄酮水解率的影响,并通过响应面法确定最佳水解条件。实验结果表明最佳水解条件为:水解时间3.8 h、盐酸浓度2.59 mol/L、水解温度78.5℃。在此工艺下,槐角异黄酮水解率达93.38%。     

美洲大蠊多糖的水解工艺及其抗氧化活性研究

美洲大蠊因具有广泛的药理活性而受到研究者的青睐,但其多糖的水解工艺和抗氧化活性鲜见报道,研究采用响应面法对美洲大蠊多糖的水解条件进行优化,通过单因素实验确定水解时间、温度和三氟乙酸用量对美洲大蠊多糖水解的影响,以高效液相色谱图中单糖的总峰面积为响应值,结合响应面实验,确定美洲大蠊多糖的最佳水解条件:水解时间1 h,水解温度120℃,三氟乙酸用量3.5 mL,在该水解条件下测得的单糖总峰面积最大;同时,对DPPH、OH、ABTS自由基清除能力进行测定,IC_(50)分别为0.028、0.78、0.07 mg/mL,且具有一定的还原能力。本研究建立了美洲大蠊多糖中单糖组成的分析方法,并对其水解工艺及抗氧化活性进行了研究,为美洲大蠊资源的开发利用提供了科学依据。     

碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆多肽的工艺条件优化

以大豆分离蛋白为原料,地衣芽胞杆菌产碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,分别从酶浓度、pH值、反应温度和水解时间等因素来研究水解效果,在50℃,pH 10,酶浓度100 U/mL,水解2 h时水解效果最好,水解度达到31.45%。     

人RHD基因的克隆和鉴定

目的克隆人RHD基因,并对其进行鉴定。方法以RhD阳性志愿者骨髓为材料,用TRIzol试剂提取总RNA;设计、合成人RHD基因扩增引物,RT-PCR方法扩增RHD基因片段;T／A克隆后将其亚克隆人pET28a（＋）载体中,经酶切、PCR和测序对重组质粒进行鉴定。结果骨髓总RNA被成功提取;RT-PCR成功扩增出RHD基因片段,其大小与预期约509bp基本一致;T／A克隆后再将其亚克隆,通过酶切和PCR证明RHD基因成功亚克隆入pET28a（＋）载体中;基因测序结果比对显示,与已公布的RHD基因（GenBank登录号为NM016124）序列基本一致,同源性为98％。结论成功克隆了RHD基因,这将为进一步研究奠定基础。     

Flower-inducing and -inhibiting activities of Phloem Exudate from Cotyledons of Pharbitis Seedlings

The flower-inducing and -inhibiting activities of phloem exudate (PE) prepared from cotyledons of Pharbitis seedlings were examined, using apex cultures in vitro from Pharbitis as a bioassay system.The PE was prepared from photoperiodically-induced cotyledons (SD-PE). The SD-PE was subjected to the following fractionations: When the SD-PE was extracted with CHCl₃ and then ethyl acetate, the inducing activity was located in the final aqueous fraction. The activity was localized in the diffusate when the aqueous fraction was dialyzed (molecular weight cut off was 10,000). The diffusate was fractionated by ion exchange chromatography, and flower-inducing activity was found in the fraction adsorbed onto anion exchange resin. When the fraction was applied to a Sep-Pak C18 cartridge, the activity eluted with 25% MeOH. As a result of the above fractionation, activity was increased about 30-fold.The nature of the flower-inhibiting activity of the PE taken from cotyledons exposed to continuous-light conditions was examined (CL-PE). The inhibiting activity was decreased as the cotyledons were exposed to longer dark periods; it appeared to be heat-stable. The CL-PE also inhibited flowering in Lemna. The CL-PE was subjected to the following fractionations: When the CL-PE was extracted with CHCl₃ and ethyl acetate, activity was located in the final aqueous fraction. Activity was localized in the diffusate when the aqueous fraction was dialyzed (molecular weight cut off was 10,000). When the diffusate was fractionated by ion exchange chromatography, the activity was found in the flow-through fraction. When the fraction was applied to a hydroxyapatite cartridge, the activity eluted with 25 mM sodium phosphate buffer. When the fraction was re-dialyzed (molecular weight cut off was 1,000), the diffusate contained the activity. As a result of the above fractionation, activity was increased about 10-fold.     

γ-Fe_2O_3-凹土超顺磁性纳米复合材料固载猪胰脂肪酶

以凹凸棒石黏土为原料,制备γ-Fe2O3-凹土超顺磁性纳米复合材料(γ-Fe2O3-ATP)作为猪胰脂肪酶(PPL)固定化的载体,利用透射电子显微镜(TEM)、N2吸附脱附等温图(BET)、振动试样磁强计(VSM)等对材料进行表征,同时对固定化条件和固定化酶的相关性质进行了研究。结果表明:制备的γ-Fe2O3-ATP是介孔材料,比表面积为102.63 m2/g,平均孔径为10.862 nm,饱和磁化强度为8.915 emu/g,其作为载体能实现固定化酶与反应介质简单、快速分离回收和重复利用。在固定化时间为4 h及pH 6.0时制备的固定化酶效果最佳;经过6 h高温保存后固定化酶可保留初始酶活的52%,而游离酶仅保留初始酶活的19%,同时固定化酶在重复使用5次后酶活仍保留初始酶活的60%。     

小玉竹的胚胎学研究

小玉竹Polygonatum humile Fisch．ex Maxim．的花药四室．绒毡层腺质型,发育后期出现双核至多核。小孢子四分体左右对称型,偶见四面体型,胞质分裂连续型。成熟花粉具2细胞。子房3室,中轴胎座。胚珠倒生,双珠被,厚珠心,珠孔由内珠被形成。胚囊发育为葱型。受精后,子房壁和外珠被细胞中含有草酸钙针晶。胚发育类似于紫菀型,基细胞有时纵裂形成两个子细胞。胚乳核型。根据实验结果,并结合前人的资料,本文提出了黄精属的胚胎学特征,并在此基础上对黄精族的概念以及属间系统关系进行了探讨。     

铃兰的胚胎学研究

铃兰（Ｃｏｎｖａｌｌａｒｉａ ｍａｊａｌｉｓＬ．）的花药四室,药壁发育为单子叶型。腺质绒毡层发育后期出现双核至多核。小孢子四分体主要呈左右对称型,偶见四面体型。胞质分裂为连续型。二细胞型花粉。子房三室,中轴胎座。胚珠倒生,双珠被,厚珠心。珠孔由内珠被形成。胚囊发育为葱型和英地百合型。受精以后,在子房壁、珠柄和外珠被细胞中含有草酸钙针晶。胚发育类似于石竹型,但基细胞发生纵裂形成两个子细胞。核型胚乳;合点端具巨形胚乳核     

LIM结构域蛋白FHL1C抑制Notch信号途径的转录激活研究

目的：克隆人表达FHL1C基因以及建立真核表达载体和慢病毒载体。方法：从人的骨骼肌细胞来源的cDNA中扩增并克隆人FHL1C基因的编码区,连接至pMD-18T载体酶切鉴定后测序。序列测定确认后,双酶切pMD18T-FHL1C回收片段,插入真核表达载体,构建真核表达载体pCMV-Myc-FHL1C酶切鉴定正确后,转染Hela细胞及Cos7细胞,用Western Blot检测其在转染细胞中的表达,用双荧光素报告基因系统检测其对Notch信号作用。构建FHL1C-IRES-GFP表达单元,建立慢病毒表达载体plen-ti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒后感染培养的细胞,用免疫荧光显微镜、Western Blot检测分析其在被感染的细胞中的表达。结果：通过PCR方法成功扩增了人FHL1C基因的编码区。通过转染Hela及Cos7细胞,使用Western Blot检测其蛋白水平表达,双荧光报告基因系统分析均能够下调激活的Notch信号。成功构建了FHL1C慢病毒表达载体pLenti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒,把获取的慢病毒感染细胞后通过荧光显微镜证实被感染的细胞绿色荧光蛋白正确表达,Western Blot检测证实其表达。结论：成功建立起FHL1C真核表达载体及慢病毒表达系统,为研究急性T淋巴细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础。     

逆相蒸发法制备茶多酚脂质体及质量评价

采用逆相蒸发法制备茶多酚脂质体并进行质量评价。通过二次回归旋转组合设计优化茶多酚脂质体制备工艺及配方,对其形态、结构、粒径分布等性质进行考察。研究结果表明,最佳配方为m（大豆卵磷脂）：m（胆固醇）=3：1、茶多酚质量浓度为7mg／mL、V（有机相）：V（水相）=4：1、磷酸盐缓冲液浓度15mmoL／L,此条件下包封率为50．37％;所制备的茶多酚脂质体形态呈圆球形或椭球形,为大单室脂质体,有效粒径为165．3nm,Zeta电位为-69．3mV。逆相蒸发法制备茶多酚脂质体方法简单可行,所制备的脂质体具有一定缓释性。     

一株产乙酰酯酶细菌筛选、鉴定及酶学性质研究

【目的】利用筛选培养基,从肉牛瘤胃液中分离筛选产乙酰酯酶的细菌菌株,并研究菌株的产酶特征。【方法】利用厌氧培养技术,以木质素为唯一碳源,筛选并驯化所得菌株。根据菌株16S rDNA序列分析、革兰氏染色、伊红美蓝培养基培养、甲基红试验和柠檬酸盐利用试验,鉴定菌株。采用对-硝基苯乙酯测定酶活力。【结果】筛选得到产乙酰酯酶活力较高细菌菌株RB1,初步鉴定为Escherichia coli。菌株RB1的生长曲线表明,0 42 h为菌株的延迟期,42 60 h为菌株的对数期,60 66 h为菌株的稳定期,66 86 h为菌株的衰亡期。菌株所产乙酰酯酶最适温度为40°C,最适pH为8.0,在最适温度与pH条件下,培养基中添加玉米秸秆粉,乙酰酯酶最高酶活力达到0.52 U/mL。【结论】筛选获得产乙酰酯酶的细菌菌株RB1,其乙酰酯酶活力高于已报道的菌株,是一株具有研究和应用潜力的产乙酰酯酶的菌株。     

纳豆激酶发酵液的脱色工艺研究

从11种待选脱色介质中筛选出330(OH)型树脂对纳豆激酶发酵液进行脱色研究.结果表明:(1)330(OH)型树脂对纳豆激酶发酵液中的色素为优吸型吸附,其动力学模型符合扩散方程,其动力学拟和方程为-ln(1-F)=0.0223t+0.0511,R2=0.9978,其中F=Qt/Qe,Qt为脱色时间为t时330(OH)型...     

厌氧氨氧化菌混培物生长及代谢动力学研究

研究了厌氧氨氧化菌混培物的动力学特性.测得细胞产率系数1.573mgVS(mmolNH4+)-1;细胞衰减常数0.052mgVS(g@VS@d)-1.厌氧氨氧化菌混培物的最大氨氧化速率1.320～2.761mmol(gVS@d)-1,最大亚硝酸盐转化(反硝化)速率14.497mmol(gVS@d)-1.厌氧氨氧化菌混培物利用氨的Km值1.801～4.215mmol@L-1,利用亚硝酸盐的Km值0.468mmol@L-1.氨自身的抑制常数38.018～98.465mmol@L,实际最大氨氧化速率的氨浓度16.656mmol@L-1.亚硝酸盐对厌氧氨氧化的抑制常数5.401～11.995mmol@L-1.厌氧氨氧化的最适pH7.605.厌氧氨氧化的最适温度30℃.Vmaxa、Kma、Kia和Kin的活化能依次为37.316、30.239、33.695和30.473kJ@mol-1.