五种鲤科鱼类的RDPD分析兼论稀有Ju鲫的系统位置

本文作者采用２０个随机引物,对五种鲤科鱼类,即稀有Ｊｕ鲫、中华细鲫、麦穗鱼、唐鱼和草鱼的基因组进行了ＤＮＡ随机扩增分析。其目的是为了探讨稀有Ｊｕ鲫的系统分类位置。研究结果表明在所研究的物种中,稀有Ｊｕ鲫与中华细鲫和唐鱼有更近的亲缘关系。     

稀的Ju鲫的染色体核型初报

稀有鲫 (ＧｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓｒａｒｕｓＹｅｅｔＦｕ)是我国特产的一种小型鲤科 (Ｃｙｐｒｉｎｉｄａｅ)鱼类 ,属于亚科(Ｄａｎｉｏｎｉｎａｅ)鲫属[1 ] 。稀有鲫具有适应力强、性成熟周期短、繁殖季节长、产卵频次多等特点 ,是一种有发展前途的实验动物 ,已经被越来越多地应用到生态、遗传、生理和环境毒理等研究领域。但是 ,有关稀有鲫的细胞学背景研究还不够充分 ,其染色体核型仅有个别非正式的研究报告。本文对稀有鲫的染色体核型以及核仁组织区的银染结果作了初步研究 ,现将结果报道如下。1　材料与方法稀有鲫由本所…     

三氯异氰尿酸和环丙沙星对水生生物的急性毒性

研究了三氯异氰尿酸(TCCA)和盐酸环丙沙星(CPFX)对小球藻、大型溞和稀有鮈鲫的急性毒性。毒性试验结果表明,TCCA和CPFX对小球藻的96hEC50分别为0.31mg·L-1和20.61mg·L-1、对大型溞48hLC50分别为0.19mg·L-1和135.15mg·L-1,TCCA对稀有鮈鲫96hLC50为1.76为mg·L-1,CPFX对稀有鮈鲫不产生急性毒性。对于TCCA,大型溞最敏感,小球藻次之,稀有鮈鲫最不敏感;对于CPFX,小球藻最敏感,大型溞次之,稀有鮈鲫最不敏感。     

稀有鮈鲫临界温度的研究

稀有鮈鲫临界温度的研究王剑伟中国科学院水生生物研究所武汉４３００７２稀有钢鲫（ｆｆｏｂｍｐｎｉｒａｎＹｅｅｔＦｕ）是一种小型鲤科鱼类,在作为一种新的实验鱼。灭蚊鱼等方面具有广阔的应用前景［’,’）。从１９９０年开始,我们就积累了有关稀有铜鲫越冬、度夏...     

抗草鱼出血病病毒转基因稀有鮈鲫的初步研究

研究采用草鱼H1基因启动子,以草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)外衣壳蛋白VP7基因为靶基因,以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,构建了3个小发卡RNA(shRNA)表达载体pH1siGCRV(x)-CMVeGFP。CIK细胞感染实验表明,pH1siGCRV2-CMVeGFP具有较高的病毒抑制作用。通过显微注射将pH1siGCRV2-CMVeGFP导入稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)受精卵,获得转基因稀有鮈鲫P0代群体。转基因稀有鮈鲫攻毒实验显示,转基因稀有鮈鲫死亡率为30%,抗草鱼出血病能力显著提高。进一步的实时荧光定量PCR检测证实,转基因稀有鮈鲫脾脏、后肠和肝脏中GCRV的含量显著低于对照鱼,并随着时间的延续逐渐减少,转基因稀有鮈鲫体内GCRV的复制受到有效抑制。研究为抗草鱼出血病转基因鱼育种奠定重要基础。       

稀有鮈鲫对草鱼出血病病毒敏感性的初步研究

本文报道稀有鲫对草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ）的敏感性。ＧＣＨＶ是草鱼出血病的病原,用ＧＣＨＶ人工感好１－６月龄的稀有鲫,在水温２２－３２℃时能导致稀有鲫出现出血病症状。在水温２８℃时,病鱼在ｌｄ内死亡,潜伏期为５ｄ,发病高峰期在感染后第６－８ｄ。ＧＣＨＶ能在稀有鲫体内传代,并诱导８０％以上的稀行鲫患病死亡。将人工感染ＧＣＨＶ的稀有鲫病鱼组织超薄切片,电镜观察,发现在肠道、脾脏、肾脏等组织中存在大小与形态和ＧＣＨＶ相似的病毒颗粒。从稀有鲫出血病病鱼组织中纯化病毒,免疫电镜观察,发现病毒颗粒能被ＧＣＨＶ的特异性抗体聚集成团。由上可知,稀有鲫出血病是由ＧＣＨＶ感染所致,稀有鲫对ＧＣＨＶ是敏感的,可以作为草鱼抗出血病育种的模型。     

稀有ju鲫-一种新的鱼类毒性试验材料

本文研究了稀有ju鲫(Gobiocypris rarus) 作为毒性试验材料的可行性。采用换水式试验，在硬度为200 mg/L (以CaCO[3]计)、pH7.8±0.2、温度24-25℃条件下研究了铬、铜、锌和五氯酚(PCP)对稀有ju鲫的急性毒性。重铬酸钾对2日龄稀有ju鲫的24 h和96 h和LC[50]控制范围分别263.6-334.7和115.3-178.5 mg/L (n=8)。铬、铜、锌和五氯酚对2日龄稀有ju鲫的急性毒性值(96 h LC[50])范围，从铜的52.2 μg/L到铬的52000 μg/L，毒性大小的顺序是铜>五氯酚>锌>铬。研究结果表明，稀有ju鲫有可能发展成为一种较为理想的毒性试验材料。     

稀有鮈鲫──一种新的鱼类毒性试验材料

本文研究了稀有鲫（Ｇｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓｒａｒｕｓ）作为毒性试验材料的可行性。采用换水式试验,在硬度为２００ｍｇ／Ｌ（以ＣａＣＯ３计）、ｐＨ７．８±０．２、温度２４－２５℃条件下研究了铬、铜、锌和五氯酚（ＰＣＰ）对稀有鲫的急性毒性。重铬酸钾对２日龄稀有鲫的２４ｈ和９６ｈ和ＬＣ５０控制范围分别２６３．６－３３４．７和１１５３－１７８．５ｍｇ／Ｌ（ｎ＝８）。铬、铜、锌和五氯酚对２日龄稀有鲫的急性毒性值（９６ｈＬＣ５０）范围,从铜的５２．２μｇ／Ｌ到铬的５２０００μｇ／Ｌ,毒性大小的顺序是铜＞五氯酚＞锌＞铬。研究结果表明,稀有鲫有可能发展成为一种较为理想的毒性试验材料。     

稀有鮈鲫生命早期的己烯雌酚暴露对生长发育与繁殖的影响

研究了己烯雌酚(DES)对稀有鲫(Gobiocypris rarus)生命早期暴露的影响。经10μg/L和100μg/L己烯雌酚暴露26d后,稀有鲫死亡率升高,生长发育迟缓,鱼体内卵黄蛋白原(VTG)的诱导明显。经过一段时间清水养殖后,暴露组中雌鱼比例增加,雌雄鱼生长较对照组有显著变化。雌鱼性腺发育及产卵量与对照组相比虽无显著差异,但暴露组成鱼所繁育后代与对照组相比受精率、孵化率显著下降,死亡率、畸形率明显上升。这些结果说明己烯雌酚生命早期暴露影响稀有鲫的生长发育及生殖,稀有鲫生命早期暴露实验可以用于评价水生态系统中内分泌干扰物的生态影响。     

稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)的骨骼特征及系统发育地位

稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)已作为新型实验动物而逐渐成为生物学研究各领域的热门对象,但是,其系统分类位置仍存在争议。本研究制作了稀有鮈鲫的透明骨骼标本,对其骨骼特征进行描述;选取47个形态特征,与鲤科各亚科鱼类的典型特征进行比较,建立了分支分析特征矩阵,并使用PAUP4.0软件中的最大简约法(MP)构建系统发育树。结果显示,稀有鮈鲫和鮈亚科鱼类聚在一起,属于鮈亚科。     

日本产和中国产中华细鲫的RAPD分析

使用20个随机引物对日本和中国辽宁产中华细鲫、日本产Hemigrammocypris sp.和中国产衡有Ju鲫各个4个个体的随机扩增,得到了大量DNA多芯片段。通过Rapdplot程序将DNA的多态片段转换成遗传距离(d=1-S,S=2NxNy/Nx Ny）。该遗传距离的矩阵经Phylip软件包中Neighbor程序计算,生成了四个物种的相互关系分支图。从图中可以看出,分布于日本和中华细鲫有较近的遗传距离,然后是Hemigrammocypris,最后是稀的Ju鲫。该结果说明分布于日本和中国的中华细鲫是同一个物种。日本的Hemigrammocypris是一个独立的物种。     

稀有鮈鲫对重铬酸钾和3,4-二氯苯胺急性毒性研究

目的和方法稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)作为一种本土特有的小型鱼类,是我国正在标准化的化学品毒性测试生物之一。为评价稀有鮈鲫鱼类急性毒性实验中效应的稳定性和可重复性,研究优化筛选了重铬酸钾和3,4-二氯苯胺两种化学品,分别在单一实验室内及不同实验室间进行急性毒性验证实验。结果对于来源相同、体长固定的稀有鮈鲫,无论在实验室内还是实验室间,两组化学品的96 h LC50值均在x珋±2s的质量控制范围之内,所有结果体现了很好的稳定性和可重复性。结论根据研究获得的数据可建立一个有效的稳定性和可重复性衡量数据库,用来评估之后其他单个实验的可靠性;稀有鮈鲫作为一种具有潜力的生态毒性测试的生物种类,具有成为标准实验动物的潜能。     

不同饵料对稀有鳇鲫仔稚鱼生长、消化道及消化酶的影响

为了筛选稀有逗鲫(Gobiocypris rarus)仔稚鱼期合适的饵料, 将初孵仔鱼随机分为3个组: 活饵组、饲料组、转食组, 每组3个平行, 均从3 dah(day after hatching)开始投喂相应饵料, 在10、15、20、25、30、35 dah时统计生长指标和存活率, 并进行35 dah仔稚鱼消化道组织学及消化酶活性研究。结果显示: (1)35 dah时, 活饵组存活率最高; (2)从15 dah开始, 活饵组表现出最好的生长性能, 并维持这种趋势; (3)活饵组的消化道各部肌层厚度、黏液细胞数目均最高, 提示该组仔稚鱼消化道发育状态较好, 并具有较优的消化吸收能力; (4)转食组胰蛋白酶活性显著高于活饵组和饲料组。研究结果提示: 相对于饲料和转食, 一直投喂活饵更有利于稀有逗鲫仔稚鱼的生长和发育。建议在标准化养殖过程中, 对仔稚鱼期的稀有逗鲫采取活饵投喂的方式。     

稀有鮈鲫脑芳香化酶cDNA片段的克隆与表达分析

芳香化酶（P450arom）是雌激素合成过程中的关键酶,在性别分化中起重要作用。鱼类存在卵巢性和脑型两种芳香化酶,分别由Cyp19a和Cyp19b编码。稀有鮈鲫作为我国特有的实验动物,尚无其芳香化酶的有关资料,其性别分化机制亦不清楚。本研究采用RT-PCR的方法以简并引物扩增了稀有鮈鲫脑型芳香化酶基因Cyp19b的部分序列,其长度为1070 bp, 编码357个氨基酸残基,具有典型的芳香化酶结构域。RT-PCR分析发现该基因主要在稀有鮈鲫的脑中表达,在性腺、肠、肾中也有表达;其在雌、雄脑中的表达差异不显著。在胚胎发育阶段,Cyp19b的表达从囊胚期开始,至神经胚期达到较高水平,随后下降,孵化期又有所增强,孵化10天后维持在高水平。这些结果说明Cyp19b以脑中表达为主,可能在稀有鮈鲫神经系统发育和脑的性别分化中有重要作用。     

稀有鮈鲫及其饲料的生化组成研究

研究了稀有的鮈鲫鱼肌、性腺的生化组成,肌肉中水分含量为79.12-79.65％,蛋白质为68.39-70.20％,脂肪为20.11-20.65％,灰分为15.88-16.04％,能值为19.91-20.84Kj/gdm。鱼肌中含17种氨基酸,必需氨基酸占19.45-20.13％,极性氨基酸占17.23-17.45％,非极性氨基酸占17.51-18.16％,鱼肌中Ca、Na、P、Mg、Zn、Fe含量均较高,此外还测定了稀有的鮈鲫的活饵-水蚯蚓及人工饲料的生化组成。     

稀有鮈鲫HAN近交系的免疫与生化标记分析

目的 筛选稀有鮈鲫HAN近交系遗传质量检测标记.方法 采用鳞片活体移植和同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳法对稀有鮈鲫HAN近交系的遗传纯度进行检测.结果 在免疫标记分析中,鳞片同体移植存活率为96.7％以上,野生群体移植存活率为7.4％,而HAN系F22鳞片异体移植的成功率为80％,显著高于野生群体.在生化标记分析中,在HAN系F22中无多态性位点,不同个体的同工酶谱呈现高度一致,在野生群体中有2个多态位点即est2和est3,多态位点的比例为15.56％.结论 经过多代近亲交配,稀有鮈鲫HAN近交系生化标记基因已经纯合,鳞片异体移植存活率达到80％,表明HAN系具有较高的遗传均一性.选用鳞片的异体移植及酯酶和肌蛋白分别作为免疫和生化标记对稀有鮈鲫HAN近交系进行遗传质量检测是可行的.     

应用微卫星标记对稀有(鱼句)鲫封闭群建群过程的遗传监测

以采自四川省汉源县的野生稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)50对为建群原代(P0),采用最佳避免近交法建立了封闭群Ihb:IHB。应用11对微卫星引物对原代、F1—F4代传代亲鱼进行了遗传多样性监测。11个微卫星位点在稀有鮈鲫野生型封闭群共发现等位基因57个,各位点平均等位基因数5.2个、平均有效等位基因数3.3个、平均多态信息含量0.5282。封闭群各代平均期望杂合度为0.5553—0.5742,平均多态信息含量范围为0.5060—0.5318,平均观察等位基因数、平均有效等位基因数、平均观察杂合度、平均期望杂合度、平均多态信息含量在各代之间均无显著性差异(P>0.05)。各代间的遗传相似性在0.99以上,遗传分化系数FST为0.0008(P>0.05),基因频率也无显著性差异(P>0.05)。监测结果表明,Ihb:IHB保持了野生种群的遗传多样性,建群传代过程中未出现显著的遗传分化,符合实验动物封闭群的要求,可以作为一个实验动物的新品系。     

稀有鮈鲫产卵频次和卵子发育的研究

对室养条件下20尾雌性稀有鮈鲫的产卵频次、成熟卵巢卵径分布及卵子补充过程进行了研究。产卵间隔中卵径分布呈现不同的峰值,卵母细胞成熟是分批的,Ⅴ期卵巢中MA、RE卵母细胞的数量代表了即将进行的一次产卵的产卵量;卵子补充速度快,成熟卵巢每隔数天可发育成熟一批卵,一级贮备库在12─33d即更新一次,不同发育时期卵母细胞的补充是连续的。对273批鮈产卵进行了统计,每尾雌鱼平均4.5d产卵一次,平均批产卵量265.6粒。稀有鮈鲫的产卵类型为连续产卵类型。       

Large-scale hybridization of Japanese populations of Hinamoroko,Aphyocypris chinensis,with A. kikuchii introduced from Taiwan

Ichthyological Research - Aphyocypris chinensis is a small cyprinid that is widely distributed in lowland areas of continental China, the Korean Peninsula, and the northwestern part of Kyushu,...     

The complete mitochondrial genome of Chinese rare minnow, Gobiocypris rarus (Teleostei: Cypriniformes)

The Chinese rare minnow, Gobiocypris rarus, which is endemic to China, is an attractive aquatic laboratory animal in China. In the present study, the complete mitogenome sequence of G. rarus has been determined using long polymerase chain reaction (PCR) method. It was 16,601 bp in length and contained 13 protein-coding genes, 2 rRNA genes, 22 tRNA genes, and a control region, the gene composition and order of which are similar to most other vertebrates. Except for eight tRNA and ND6 genes, all other mitochondrial genes are encoded on the heavy strand. The overall base composition of the heavy strand is 29.5% A, 27.6% T, 25.7% C, and 17.2% G, with a slight AT bias of 57.1%. There are 10 regions of gene overlap totaling 27 bp and 13 intergenic spacer regions totaling 63 bp. The mitogenome sequence of G. rarus could contribute to a better solution of its phylogenetic position within cyprinid fishes based on the whole mitogenomic data.