树脂吸附法分离瓜果腐霉毒素中的除草活性物质

本试验以对禾本科杂草具有除草活性的瓜果腐霉菌株PAM1为试验材料,研究了X-5、AB-8,H-103和S-8等4种大孔吸附树脂对其除草活性物质的吸附性能,结果表明X-5树脂能够较好地吸附该除草活性物质.选用50%乙醇、95%乙醇、乙酸乙酯和丙酮4种溶剂为供试洗脱溶剂,采用2种洗脱方案,对其最佳洗脱溶剂进行了选择,生长抑制作用和种子萌发试验结果表明,以方案1洗脱为最佳.     

大孔吸附树脂吸附链霉菌702抗真菌活性物质工艺

研究大孔吸附树脂吸附链霉菌702抗真菌活性物质的工艺条件。采用5种不同大孔吸附树脂吸附链霉菌702发酵液提取液中抗真菌活性物质,选择吸附效果较佳树脂进行吸附条件优化,以桔青霉为指示菌,纳他霉素为对照抗生素．采用“管碟法”测定抗真菌活性物质含量。结果发现,XAD18树脂吸附效果较好,获得优化吸附条件：上样液pH6,NaCl质量浓度10g/L,上样量22．63mg／g湿树脂,吸附流速2．5mL／min,水洗体积180mL,洗脱流速1．5mL／min,洗脱剂为体积分数10％、50％和90％的甲醇,洗脱方式为梯度洗脱。在确定的工艺条件下XAD18对链霉菌702抗真菌活性物质的吸附率可达90％,洗脱率可达75％,回收率可达80％。     

柴达木沙漠链霉菌S10T阿糖腺苷的大孔树脂分离工艺优化与结构鉴定

为了获得具有药用价值的活性天然产物,采用4种大孔吸附树脂对柴达木沙漠链霉菌（Streptomyces qaidemensis）S10^T发酵液进行静态吸附和解吸实验,优化分离工艺。结果显示,AB-8型树脂具有良好的吸附和解吸性能,该树脂对柴达木沙漠链霉菌S10^T发酵液中的活性天然产物吸附工艺为发酵液pH值9,吸附时间4 h,洗脱液70%甲醇溶液。经正向硅胶、反相硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20分离得到了一个化合物,¹H-NMR和¹³C-NMR结合高分辨质谱（LC-HR-MS）鉴定该化合物为阿糖腺苷（vidarabine）,是一种具有抗病毒活性的核苷类抗生素,并简单探究了其在柴达木沙漠链霉菌中的生物合成过程。     

大孔吸附树脂分离纯化银杏中种皮总黄酮

通过静态吸附、静态解吸及吸附动力学研究,对比分析了AB-8、DM-130、S-8等三种大孔吸附树脂对银杏中种皮提取液中总黄酮的分离纯化效果,并且考察和优化了AB-8和DM-130分离纯化银杏中种皮总黄酮的工艺条件.结果表明,弱极性树脂AB-8和DM-130的吸附率分别为87.72%和86.29%、解吸率为97.52%和92.20%,是性能良好的总黄酮吸附剂; 二种树脂的静态吸附曲线变化趋势一致,6 h左右达到吸附平衡,最佳吸附条件:吸附液pH=3.0,树脂用量:吸附液=1:20,吸附温度40 ℃,洗脱剂70%乙醇;动态解吸研究显示,7倍和9倍体积洗脱剂可分别将AB-8与DM-130树脂柱吸附的总黄酮基本洗脱.在优化的工艺条件下,AB-8大孔树脂纯化可使提取物中总黄酮含量达16.3%.     

拮抗链霉菌S24抗菌物质的提取及其部分理化性质

拮抗链霉菌S24对黄曲霉、赭曲霉、黑曲霉等粮食和饲料中常见的曲霉菌具有广谱抗性,本试验通过牛津杯法测定抗菌物质的效价,研究了大孔吸附树脂对链霉菌S24产生的抗菌物质的吸附、解吸性能,筛选了解吸剂,并研究了抗菌物质的部分理化性质。结果表明,大孔吸附树脂AB-8对抗菌物质的吸附及解吸性能最好,其饱和吸附量为7.0822×104μg/g,最佳解吸剂为85%丙酮,以85%丙酮进行动态解吸,解吸率达93.82%。该抗菌物质对热稳定,对紫外线敏感,对有机溶剂不敏感,对酸敏感,对碱稳定,紫外全波长扫描发现该抗菌物质为多烯大环内酯类抗生素。     

链霉菌6803菌株对植物的化感作用

链霉菌属是绝大多数已知抗生素和一些重要活性物质的产生菌,它对高等植物是否具有化感作用尚缺乏研究.从土壤中分离获得7个放线菌菌株,研究其对植物幼苗生长的抑制作用.结果表明:链霉菌6803菌株在固体和液体发酵培养时均强烈抑制油菜根和稗草根的生长,其液体发酵液的5倍稀释液对油菜和稗草苗生长的抑制分别达到60.7％和61.3％.常规形态与生理生化试验表明,该菌株属于链霉菌属金色类群;16S rRNA基因序列分析表明,该菌株为沙场链霉菌,基因序列相似性达到99.28％.此菌株经过80 ～ 100 s紫外线照射筛选出的正突变菌株UV8024和UV100-2的10倍稀释发酵液对油菜幼苗生长的抑制作用比原始菌株分别提高了37.5％和38.1％,经过1％硫酸二乙酯诱变50 min筛选出的正突变菌株D507的10倍稀释发酵液对油菜幼苗生长的抑制作用比原始菌株提高了29.8％.链霉菌6803菌株对高等植物具有化感作用,并可通过诱变育种提高其化感潜力.     

链霉菌6803菌株对植物的化感作用

链霉菌属是绝大多数已知抗生素和一些重要活性物质的产生菌,它对高等植物是否具有化感作用尚缺乏研究. 从土壤中分离获得7个放线菌菌株,研究其对植物幼苗生长的抑制作用.结果表明： 链霉菌6803菌株在固体和液体发酵培养时均强烈抑制油菜根和稗草根的生长, 其液体发酵液的5倍稀释液对油菜和稗草苗生长的抑制分别达到60.7%和61.3%. 常规形态与生理生化试验表明,该菌株属于链霉菌属金色类群; 16S rRNA基因序列分析表明,该菌株为沙场链霉菌,基因序列相似性达到99.28%. 此菌株经过80～100 s紫外线照射筛选出的正突变菌株UV8024和UV100-2的10倍稀释发酵液对油菜幼苗生长的抑制作用比原始菌株分别提高了37.5%和38.1%, 经过1%硫酸二乙酯诱变50 min筛选出的正突变菌株D507的10倍稀释发酵液对油菜幼苗生长的抑制作用比原始菌株提高了29.8%. 链霉菌6803菌株对高等植物具有化感作用, 并可通过诱变育种提高其化感潜力.     

星海链霉菌抑菌活性物质的分离纯化

星海链霉菌(Streptomyces xinghaiensis)是从大连星海湾海泥样品中分离的海洋链霉菌新种,其发酵液具有广谱抗菌活性。研究该菌株的发酵液对临床分离的耐药菌的抑制活性,发现星海链霉菌发酵液对鲍曼不动杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株具有抑制活性。采用SPE、大孔吸附树脂HP-20、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、HPLC、TLC等对抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的物质进行了活性追踪,发现活性物质为弱碱性水溶性成分,无特征紫外吸收,可被茚三酮显色,推断活性物质可能为氨基糖苷类化合物。对星海链霉菌基因组序列进行初步分析,发现一个与核糖霉素生物合成基因簇相似性较高的基因簇,但TLC分析结果表明,活性化合物与核糖霉素不同。     

大孔吸附树脂纯化乌饭树树叶黑色素的研究

利用11种大孔吸附树脂对乌饭树树叶黑色素进行纯化分析,AB-8、NKA-9和S-8型大孔吸附树脂的静态吸附量和解吸率较高。由吸附与时间的关系曲线选择AB-8型大孔吸附树脂进行动态分析,得出最佳的纯化条件为:pH为5.05左右,溶液浓度为0.68~1.33 mg/mL,吸附流速为3 mL/min。使用7倍体积的95%乙醇解吸率可以超过95%。树脂使用三次后必须进行再生处理。     

杀线虫芽孢杆菌发酵条件优化及大孔树脂筛选

芽孢杆菌 SMrs28分离自草原毒草瑞香狼毒根际土壤,其代谢产物有明显的线虫触杀活性。为了确定该菌株的最优发酵条件及初步纯化活性成分的树脂类型,采用单因素试验对发酵条件进行优化,通过静态吸附试验对大孔树脂类型进行筛选。结果表明: SMrs28菌株的最优发酵条件为:以葡萄糖和酵母粉作为最佳碳源和氮源,发酵时间48 h,接种量10%,温度28 ℃,转速180 r·min^-1,150 mL的三角瓶装液量30 mL,初始pH 7.2。静态吸附试验表明,大孔吸附树脂D101对发酵液中活性成分的吸附和解吸效果显著优于XAD-4、HP20和AB-8,其解吸液的杀线虫活性明显提高。发酵条件的优化和大孔吸附树脂的筛选,明显提高了发酵液的杀线虫活性,为进一步分离纯化该菌株的活性成分奠定了基础,为微生物杀线虫剂的开发和应用提供了理论依据。     

大孔树脂分离纯化虫草素及其抗纤维化作用

利用大孔树脂分离富集北冬虫夏草发酵液中的虫草素。通过筛选可知NKA-Ⅱ型大孔树脂对虫草素的吸附与解吸效果最好。发酵液经树脂吸附6 h后,再以4倍树脂体积的50%乙醇解吸3 h,所得样品虫草素含量达31.5%,经反复结晶后得到纯度>98%的虫草素。结果表明:虫草素可明显抑制TGF-β1引起的人胚肺成纤维细胞α-SMA蛋白表达量的增加,并表现出一定的浓度依赖性,提示虫草素可能具有抑制肺纤维化活性。     

磁性大孔树脂对苹果渣多酚的吸附-解吸效能

以苹果渣多酚类化合物为吸附模型,制备一种可有效吸附分离苹果渣多酚的磁性树脂,研究其吸附、解吸效能,并就吸附和解吸效能、使用次数与普通大孔树脂进行比较。结果显示,5种普通树脂中D280、H103、AB-8对苹果渣多酚的吸附率均高于80%,AB-8、D3520树脂对苹果渣多酚的解吸率均高于90%,AB-8树脂的吸附率和解吸率最好;磁性大孔树脂吸附0.5 h后即可达到吸附平衡,吸附平衡后剩余液多酚质量浓度低于AB-8树脂吸附平衡后剩余液多酚质量浓度,吸附效能明显优于AB-8树脂;磁性大孔树脂解吸效能也略优于AB-8树脂;使用4 次后,磁性大孔树脂的吸附率仍然高于70%,稳定性优于AB-8树脂。可见,磁性大孔树脂是一种良好的苹果渣多酚吸附剂,有较好的工业化应用前景。     

大孔吸附树脂对海边月见草总黄酮的吸附及解吸特性

通过比较3种大孔吸附树脂对海边月见草(O enothera littaralisSchlect.)总黄酮的吸附能力,选择了吸附量较大且易洗脱的树脂AB-8,研究了提取液浓度、pH值对该树脂静态吸附能力的影响,以及洗脱剂种类、乙醇浓度对动态解吸能力的影响。结果表明,AB-8树脂对海边月见草总黄酮有良好的吸附纯化性能,当原液浓度为1.076mg.mL-1时,树脂达饱和吸附量36.11 mg.g-1;提取液pH值对该树脂的吸附能力影响显著,pH值达4.0~4.5时树脂吸附量最大;用60%乙醇为洗脱剂,流速为1 mL.m in-1,总黄酮的动态洗脱率达83.41%,获得的总黄酮纯度为24.13%,得率3.54%;而30%乙醇(6倍柱床体积)和50%乙醇(6倍柱床体积)组合是最佳动态洗脱剂。     

大孔吸附树脂分离纯化香叶木苷

比较了D-101、D-140、AB-8、XAB-8、D312、聚酰胺等6种吸附树脂对蓬子菜中活性成分香叶木苷diosmin的吸附和洗脱条件,在静态吸附研究的基础上,进行了动态实验,并且利用二次吸附对该成分进行了纯化。结果表明AB-8树脂对diosmin的吸附量大、吸附速度快、解吸容易、富集分离效果好。利用聚酰胺进行二次纯化,得到纯度95%以上的diosmin。     

大孔吸附树脂对红车轴草异黄酮吸附分离特性的研究

通过比较14种大孔吸附树脂对红车轴草异黄酮的吸附率和解吸率,筛选出适合红车轴草异黄酮分离的树脂,并对其动态吸附特性进行研究。结果表明,AB-8树脂对红车轴草异黄酮不仅吸附量大,而且解吸率高,适合红车轴草异黄酮的分离富集。AB-8树脂分离红车轴草异黄酮的工艺参数为:上柱液浓度0.79~1.11 mg/mL,pH 4.24,流速2 BV/h。以4倍树脂床体积的80%乙醇以2 BV/h流速进行洗脱,可基本上将红车轴草异黄酮从树脂上解吸下来,异黄酮回收率为93.72%。     

大孔树脂吸附法提纯苦楝素的研究

研究了大孔树脂吸附法从苦楝树皮的提取液中提纯苦楝素的工艺条件及参数,并筛选出较为理想的大孔吸附树脂。研究结果表明,S-8型吸附树脂的静态饱和吸附量明显大于AB-8型和NKA-9型。该树脂吸附提纯苦楝素的优化吸附条件为吸附温度40℃,溶液pH值8．0,上柱液质量浓度9．127mg／mL,溶液流速2BV／h;优化的解吸条件为：洗脱剂为70％乙醇-水溶液,溶液流速1BV／h,洗脱剂用量为8倍量树脂体积。在优化条件下,可以得到含量达75．2％的苦楝素提取物,表明S-8树脂对苦楝素有良好的吸附选择性。     

非水介质大孔树脂分离纯化虾壳中虾青素

通过7种大孔树脂对虾青素的静态吸附容量和解析率等指标的考察,筛选出AB-8大孔吸附树脂,用于分离虾壳中虾青素,同时利用高效液相色谱（HPLC）法测量虾青素的含量。结果表明,AB-8树脂对虾青素的吸附量为（24．17±0．5）mg／g,解吸率为95．2％,最大上样量（每g干树脂）以虾青素计为（23．07±0．2）mg,并确定用8倍量柱床体积的乙酸乙酯为洗脱剂,纯化所得虾青素的纯度为14．73％。     

AB-8大孔树脂吸附分离红花桑寄生总黄酮的影响因子研究

AB-8大孔吸附树脂对红花桑寄生总黄酮静态吸附和动态洗脱的效果,受提取液质量浓度、pH值及环境温度、振速以及洗脱剂乙醇浓度、流速等因素影响。试验表明,提取液质量浓度和pH值对AB-8树脂的吸附效果有显著影响,其吸附分离总黄酮的工艺条件为:浓度为1.2~2.0 mg/ml、pH 3.0~4.0的红花桑寄生提取液,置于摇床上,于室温条件下振荡(振速160 r/min)吸附2~3 h,然后用5倍于树脂体积(5BV)的50%乙醇以1.5 ml/min流速进行柱上动态解吸。AB-8树脂对红花桑寄生总黄酮的饱和吸附量可达29.0 mg/g,动态洗脱率达95.0%,获得产品中黄酮纯度为46.0%,得率为5.5%。     

冷泉细菌Paenibacillus algorifonticola产抑菌活性物质提取分离工艺的研究

本文对冷泉细菌——Paenibacillus algorifonticola的代谢产物的提取分离进行了研究。P.algorifonticola可产生抑制白色念珠菌的水溶性物质。大孔树脂D101和XAD7HP串联使用脱除P.algorifonticola发酵液中的色素,树脂与发酵液比例为1∶10(g/mL)为佳。脱色后发酵液中的活性物质可被强酸性阳离子交换树脂FPC22H吸附,0.5 mol/L的氨水可将活性物质洗脱下来,每10 g FPC22H可以吸附120 mL发酵液中的活性物质。本文研究结果为进一步分离纯化P.algorifonticola产抗白色念珠菌物质奠定了基础。     

欧亚旋覆花总黄酮提取与富集工艺研究

为研究欧亚旋覆花总黄酮的最佳提取与大孔吸附树脂富集工艺,采用不同溶剂、多种提取方法、L9(34)正交实验优化及AB-8大孔吸附树脂富集,结果表明其最佳提取工艺为用10倍量水为溶剂回流提取3次,每次1h,再结合AB-8大孔吸附树脂富集,以70%乙醇洗脱效果最佳,总黄酮回收率达90%,总黄酮含量达50%以上。此工艺简便可行,符合工业化生产要求。