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1.
本文应用反义RNA探针原位杂交法,研究雄激素对大鼠腹侧前列腺(VP)上皮细胞角蛋白(CK)8 mRNA表达的影响。发现1.在任何VP组织切片中,CK 8探针专一、大量定位于VP腺上皮细胞中,CK 8 mRNA是前列腺上皮细胞特异而灵敏的标志。2.去睾大鼠VP CK 8 mRNA染色增强,提示CK 8mRNA有过度表达,注射雄激素又可抑制其过度表达。3.与已知受雄激素抑制性基因不同,即使大鼠VP完全萎缩之后达2个月之久,其存留腺上皮细胞CK 8 mRNA表达仍持续增高。4.前列腺发育早期,迅速增殖的幼稚腺上皮细胞高度表达CK 8 mRNA,以后随着体内雄激素水平升高,VP上皮CK 8 mRNA表达下降,分布转移。以上结果进一步支持前列腺CK 8基因是新的一类受雄激素抑制性基因的推测,同时表明前列腺CK 8基因的表达与前列腺干细胞的增殖分化有密切联系,CK 8 mRNA高度表达是前列腺干细胞一个重要特征。 相似文献
2.
徐珞 《中国应用生理学杂志》2000,16(1):75-78
目的和方法:采用原位杂交技术,观察遗传性听源性癫痫易感大鼠海马内CCKmRNA表达的改变及少我注射CCK3及其受体阻断剂对大鼠癫痫发作的影响。结果:(1)癫痫发作大鼠海马内CCKmRNA表达明显增强(P〈0.05-0.01),但癫痫反复发作的大嫌海马内CCKmRNA表达的较癫痫发作一次大鼠明显减少(P〈0.05),海马CA主射L365后,CCK8压抑癫痫发作的作用消失(P〈0.01)。结论:CCK 相似文献
3.
蝎毒诱导红藻氨酸癫痫大鼠海马内胆囊收缩素原mRNA的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
姜春玲 《中国应用生理学杂志》2000,16(2):108-110
目的和方法:本工作用红藻氨酸(KA)癫痫模型,对用蝎毒处理住房第马内胆囊收缩素原mRNA(PCCK mRNA)表达进行原位杂交观察,并对国产东亚钳蝎粗毒抗癫痫反复发作的机制做了初步探讨。结果:原位杂交的实验显示,三周KA后,实验对照组与空白对照组相比,腹侧海马是海马门区PCCK mRNA阳性神经元数目明显减少(P〈0.05);实验给药组大鼠8例,其中有6例腹侧海马门区PCCK mRNA阳性神经元数 相似文献
4.
应激引起血压升高大鼠血管升压素V1受体mRNA水平改变 总被引:10,自引:1,他引:9
实验在雄性SpragueDawley 大鼠上进行。实验动物被随机分为对照组和应激组, 应激组大鼠每天给予电击足底结合噪声的应激刺激, 每日2 次, 每次2 h 。应激组大鼠在接受连续15 d 的慢性应激刺激后, 其尾动脉收缩压与对照动物相比有显著升高。对照组为16-25 ±0-63kPa (n = 7) ; 应激组为19-55 ±1-45 kPa (n = 8, P< 0-05) 。用RTPCR 结合Southern 印迹核酸分子杂交技术观察到, 血管升压素(vasopressin, AVP)V1 受体mRNA 广泛存在于大鼠下丘脑、皮质、延髓等部位以及心脏、肝脏、肾脏等组织中。用定量PCR 方法观察到, 大鼠在接受慢性应激刺激之后, 其大脑顶叶皮质、下丘脑及延髓组织中AVPV1 受体mRNA 水平均显著低于正常大鼠( 顶叶皮质: P< 0-05 ; 下丘脑: P< 0-01 ; 延髓: P< 0-001) , 而心脏、肝脏及肾脏组织中的AVPV1 受体mRNA水平与正常大鼠相比均无明显差别( 心脏: P> 0-05 ; 肝脏: P> 0-05 ; 肾脏:P> 0-05) 。上述结果提示, 慢性应激刺激可引起大鼠不同部位脑组织AVPV1 受体合成水平下调, 可能导致 相似文献
5.
大鼠前列腺甾体结合蛋白基因表达的种族专一性研究 总被引:1,自引:1,他引:0
以大鼠PSBP基因cDNA为探针,用Northern印迹法测定mRNA,Southern印迹法测定DNA,明确了只在大鼠腹侧前列腺表达的PSBP基因,在其他种族,如小鼠、兔和人的前裂腺中不仅不表达,而且基因也不存在?澄清了文献中的混乱。 相似文献
6.
地高辛标记反意RNA探针检测脑组织切片生长抑素mRNA 总被引:2,自引:0,他引:2
本实验采用含大鼠生长抑素基因的pSP65cDNA质位通过转化至噬菌体内大量扩增,经提取,纯化后,用限制性内切酶进行酶切使质枝线性化,并将其作为模板,用地高辛(DigoxigeninDig)作为标记物,体外转录合成生长抑素反意RNA(cRNA)探针。实验动物选用wistar新生大鼠。冰冻切片,端、间脑切片经杂交前用Dig-UTP标记的cRNA探针杂交,杂交后用抗Dig-碱性磷酸酶复合物进行酶联免疫反应。X-磷酸盐-NBT显色。结果显示新生大鼠脑内生长抑素mRNA神经元着紫蓝色。杂交反应物集中于核周的胞浆及短小的突起内。胞核不着色。胞体轮廓清晰,周围背底浅淡。结果表明Dig标记cRNA探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能快速和准确检测组织细胞内mRNA的表达。 相似文献
7.
为探讨八肽胆囊收缩素(CCk-8)和阿片肽相互作用的分子机理,利用抗体免疫沉淀技术研究了CCK-8与NDAP(k阿片受体激动剂)对大鼠脑(去皮层和小脑)和脊髓背柱组织Fos蛋白的影响。结果表明,0.1μmol/LCCK-8可显著刺激脑和脊髓组织中Fos蛋白增加(分别是对照组的3.8倍和3.6倍)。相同浓度的NDAP对Fos蛋白的生成亦有一定的诱导作用,分别是对照组的2.7倍和2.6倍。CCK-8和NDAP共同处理组织,Fos蛋白生成水平相似(脑)或高于(脊髓)CCK~-8单独诱导的水平。结果表明,CCK-8和NDAP均可直接诱导大鼠脑和脊髓组织c-fos的表达,它们对c-fos表达的相互作用在脑和脊髓中呈现不同的模式。 相似文献
8.
急性冷应激对牦牛乳腺上皮细胞 HSP70 mRNA 表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本文主要研究了急性冷应激对牦牛乳腺上皮细胞热休克蛋白70 (Heat stress protein,HSP70) 表达量的影响。采用实时荧光定量PCR 技术,以急性冷刺激10℃ 为典型研究环境,分析了HSP70 mRNA 表达的变化规律。结果显示,乳腺上皮细胞在10℃分别冷处理2 h、4 h、6 h 和8 h,其HSP70 mRNA 的表达量变化均不显著(P >0. 05);分别在10℃冷处理2 h、4 h、6 h 和8 h,再复温培养4 h,HSP70 mRNA 的表达量均极显著增加(P <0. 01),于6 h 达到峰值;在10℃先冷处理4 h,然后分别复温2 h、4 h、6 h 和8 h,HSP70 mRNA 的表达量亦均显著增加(P <0. 01),并于4 h 达到峰值。结论:急性冷应激诱导牦牛乳腺上皮细胞HSP70 表达量的增加不是发生在冷处理过程中,而是发生在复温过程中,并且在一定范围内随冷处理时间的增长表达量增高。 相似文献
9.
肿瘤坏死因子α对大鼠成骨样细胞增殖与甲状旁腺素受体表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
大鼠成骨样细胞ROS17/2.8经肿瘤坏死因子α处理后,发现其c-myc,c-fos,c-jun等原癌基因mRNA的表达降低,细胞增殖明显受到抑制;同时,其PTH受体的表达以及PTH经受体刺激后引起的细胞内cAMP的增加也受到抑制。提示TNFα可抑制大鼠在骨要细胞REOS17/2.8的增殖和分化。 相似文献
10.
本实验采用地高辛标记前胰岛素寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术,研究了Wistar大鼠胰腺组织胰岛素基因的表达。实验用Wistar大鼠5只,胰腺经4%多聚甲醛灌注固定,并在同一固定液中后固定24h,常规石蜡包埋切片。结果表明,经前胰岛素寡核苷酸探针杂交的胰腺切片中,胰岛B细胞呈蓝色。杂交反应物位于B细胞的细胞质和部分核仁中,胞核无色。胰岛其它细胞及胰腺外分泌部腺泡细胞无杂交反应物。对照切片中均无阳性信号出现。结果表明地高辛标记寡核苷酸探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能精确检测特异性mRNA的表达。本研究方法操作便利,可靠精确,重复性好。 相似文献
11.
用6-OHDA损毁大鼠一侧黑质—纹状体通路可引起PD模型鼠脑纹状体内多巴胺匿乏.同时,亦可导致脑啡肽mRNA过度表达。我们用地高辛标记的cRNA探针对纹状体内脑啡肽mRNA含量进行了斑点杂交定量研究,发现损伤侧脑啡肽mRNA含量较健侧增高80%,胎中脑移植到失神经支配的纹状体内,脑啡肽mRNA过度表达得以矫正至正常水平,说明胎多巴胺能神经元脑内移植能够调节脑啡肽基因表达,提供了移植物能与宿主发生神经整合、建立突触联系的间接证据。 相似文献
12.
缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织中血小板源性生长因子和c—my… 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究分析了大鼠肺组织中血小板源性生长因子A链、B链和c-myc原癌基因mRNA。正常肺组织可表达1.7kb的PDGF-AmRNA和3.5kb的PDGF-BmRNA,还有少量2.2kbcmRNA.在缺氧过程中,PDGF-B链mRNA和c-mycmRNA迅速增加,至缺氧14d时,分别为正常的3倍和5倍。而PDGF-AmRNA在缺氧7d时增高,而后又略有降低。结果表明:缺氧的肺组织局生成的PDGF激活 相似文献
13.
基质金属蛋白酶(MMPs)家族的作用是降解所有细胞外基质,其活性受其特异性组织抑制因子(TIMPs)的抑制。细胞外基质成分的降解与重组在动物生殖生长过程中起重要作用,其变化可以通过MMPs和TIMPs两者表达水平的变化进行监测。大鼠虽然没有月经形成,但是在其子宫内膜也出现类似灵长类的生殖生物学变化。本文从MMPs和TIMPs两者的表达水平,对大鼠子宫内膜的这些变化进行了研究。于大鼠动情周期的不同时期,将其处死、取子宫制备酶粗提液和组织切片,采用酶谱法(zymoyranhn)和原位杂交方法研究动情周期大鼠子宫中MMP-2和-9的活性变化以及MMP-2、-9和TIMP-1、-2、-3mRNA的表达。并通过光密度扫描方法对酶谱结果进行半定量分析。所用杂交探针见Table1。酶谱结果显示:在动情周期大鼠子宫中只检测到67kDa的MMP-2活性,而没有检测到MMP-9的活性(Fig.1)。MMP-2的活性在动情前期最高,动情期和动情后期次之,间情期最低(Fig.2)。原位杂交结果显示:MMP-2、-9、TIMP-1、-2、-3mRNA主要在子宫内膜基底部的基质细胞中表达。MMP-2和-9mRNA在动情前期、动情期和动 相似文献
14.
用DIG标记的GAP-43cDNA为探针,以大鼠海马切片作阳性对照,使用原位杂交方法检测了大鼠迷路损毁5,12,20和30d后前庭核区GAP-43mRNA水平的变化,结果表明,迷路损毁后前庭核区mRNA水平升高,原位杂交的应用,为前庭代偿中轴突发芽,突触重组的神经可塑性研究打下了方法学基础。 相似文献
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实验用10-11周龄经阉割的雌、雄Sprague-Dawley大鼠进行。以3末端异羟基洋地黄毒甙标记的26个碱基长的寡核苷酸作为检测探针,用核酸斑点杂交技术检测大鼠下丘脑血管升压素mRNA水平。在假手术对照组,雄性大鼠下丘脑AVPmRNA水平经雌性大鼠高45%(P〈0.05),血浆渗透压高于雌性大鼠(P〈0.05)。摘除卵巢的大鼠下丘脑AVPmRNA深恶痛绝经假手术组雌性大鼠高30%(P〈0.05 相似文献
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本研究分析了大鼠肺组织中血小板源性生长因子A链、B链(PDGF-A,PDGF-B)和c-myc原癌基因mRNA在正常和缺氧时的含量变化。正常肺组织可表达1.7kb的PDGF-AmRNA和3.5kb的PDGF-BmRNA,还有少量2.2kbc-mycmRNA。在缺氧过程中,PDGF-B链mRNA和c-mycmRNA迅速增加,至缺氧14d时,分别为正常的3倍和5倍。而PDGF-AmRNA在缺氧7d时增高,而后又略有降低。结果表明:缺氧的肺组织局部生成的PDGF激活了c-myc原癌基因,这对于缺氧性肺动脉高压的形成具有重要作用。 相似文献
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精氨酸加压素(AVP)C端片段AVP4-8,具有增强记忆的功能,它在大鼠脑内引发一系列的生理和生化变化。采用差示PCR(DD-PCR)技术,寻找注射AVP4-8前后在大鼠海马中差异表达的基因。抽提总RNA,以反转录产生的cDNA为模板进行PCR,经过9组引物组合,获得了十几个差异片段,挑选其中差异最大的片段ddl进行克隆,测序,并与Genedank等数据进行同源比较 有找到同源基因,可能是个新基因 相似文献
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大鼠自发性高血压与HSP70基因关系的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本实验采用热休克蛋白70核酸分子杂交方法,检测了自发性高血压大鼠和正常血压大鼠离体培养的主动脉平滑肌细胞受热刺激后HSP70mRNA水平的变化以及整体动物肝组织HSP70mRNA的水平,并对肝组织基因组DNA进行了限制性酶切片段长度多态性分析。结果表明:37℃培养的SHR ASMC及整体SHR肝组织HSP70 mRNA的基础表达水平均低于WKY鼠,SHR ASMC受热刺激(42℃ 15min)后2 相似文献