鳗鲡肝肾病病原菌的研究

近年来,在广东潮州各养鳗场,每年３－５月和１０－１２月,广泛流行一种危害严重的鳗鲡肝肾病,给鳗鲡养殖业造成严重损失。本文记述了该病的症状,重点研究鳗肝肾病的病原菌。作者从患肝肾病的病鳗肝脏、肾脏和胃液中分离到１０株致病菌。根据分离株的形态、培养、生化特性,８株致病菌特性一致,鉴定为迟饨爱德华氏菌（ＥｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａｔａｒｄａＥｗｉｎｇｅｔＭｃｗｈｏｒｔｅｒ）另外两株菌特性相同被鉴定为运动性Ａｅｒｏｎｌｏｎａｓｓｐ．。研究结果阐明了鳗鲡肝肾病主要是由Ｅ．ｔａｒｄａ引起的爱德华氏菌病,部分病例是由Ｅ．ｔａｒｄａ和运动性Ａｅｒｏｍｏｎａｓ菌引起的并发症．Ｅ,ｔａｒｄａ是鳗鲡肝肾病的病原菌。     

鳗鲡爱德华氏病的研究

本文记述了在我国新发现的鳗鲡爱德华氏病的症状和病原菌的特征。病鱼的症状表现为两大类型,以肾脏病变为主的肾脏型和以肝脏病变为主的肝脏型。从病鱼的内脏分离到7株菌,用其中的E86～205进行人工感染,100％的鳗鲡死亡,与自然发病的症状相似,从感染的鳗鲡上又重新分离到菌株E86-203。E86-203与E86-205以及其他菌株的特征也都一致。均为革兰氏阴性杆菌。菌体直,两端圆形,单个,大小为0.6—0.8×0.8—2.4微米。周鞭毛,运动,兼性厌氧,发酵葡萄糖产酸产气。氧化酶阴性,过氧化氢酶阳性,产生硫化氢。不能利用柠檬酸盐和丙二酸盐作为唯一的碳源,精氨酸脱氢酶阴性,赖氨酸脱羧酶阳性。属爱德华氏菌属的细菌。但是鸟氨酸脱羧酶阴性,能迅速利用纤维糖,不同于已报道的三个种(Edwardsiella tarda Ewing and McWhorter 1965,E.hoshinae Grirnont 1980,E.ictaluri Hawke 1981)中任何一个种,因此认为E86-205等菌株为一新种,定名为福建爱德华氏菌(Edwardsiella fujianensis sp.nov.)。     

鳗鲡爱德华氏菌病的组织病理学研究

鳗鲡爱德华氏菌病病变性质为化脓性炎症。症理分型主要有两种：化脓性肝炎型、混合型。较早发生病变部位主要在肝脏,其化脓性病杜按病程分为初、中、晚期。肾脏、脾脏、胃粘膜、体表出现散在的脓肿、脓性溃疡、炎性血栓及血斑。此外,肝脏、肾脏实质细胞均出现变性和坏列、血管充血、出血等。本文详细报告了肝脏、脾脏、肾脏的超微结构变化并初步讨论了细胞、组织损伤的过程及细胞病理学、超微病理学意义。     

鮰爱德华氏菌外膜微孔蛋白N基因PCR快速检测方法的建立

根据Gen Bank中鮰爱德华氏菌Edwardsiella ictaluri外膜微孔蛋白N(porin N)基因序列(Gen Bank No:NC_012779.2)设计了1对引物,预计目的片段大小为381 bp。通过对反应体系和条件的优化,并进行特异性试验、敏感性试验及人工感染组织样品检测,建立了一种快速检测鮰爱德华氏菌的PCR方法。结果表明,在所检测的鮰爱德华氏菌、迟缓爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、杀鲑气单胞菌、豚鼠气单胞菌、嗜麦芽寡养单胞菌、鲁氏耶尔森氏菌、海豚链球菌、不动杆菌、产气肠杆菌、大肠杆菌、拟态弧菌、荧光假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌15种细菌中仅鮰爱德华氏菌扩增出特异性条带;敏感性试验结果显示,该方法最小核酸检出量为9.35×10-3ng·μL-1;同时对人工感染的病料肝脏、细菌基因组DNA、细菌菌液及菌落进行扩增,结果显示4种材料均能检测出大小为381 bp的基因片段。本研究所建立的方法特异强、灵敏度高,适用于鮰爱德华氏菌感染病例的高效、快速检测。     

■爱德华氏菌变异株C9605及对鳖的致病性研究

从患白板综合症的病鳖分离到一株细菌（C9605）,该菌为革兰氏阴性,直杆状,周生鞭毛。接触酶阳性,氧化酶阴性,还原硝酸盐,对多粘菌素不敏感,不利用柠檬酸盐和丙二酸盐作唯一碳源,不从甘露醇、蔗糖、海藻糖、L-阿拉伯糖产酸。根据这些特性,菌株可归于爱德华氏菌。但是该菌发酵木糖产酸,产生H2S,耐青霉素,故鉴定为爱德华氏菌变异株（Edwardsiellaictalurivariationstrain）。人工感染实验证实,该菌株是鳖白板综合症的病原菌。     

应用绿色荧光蛋白标记迟缓爱德华菌感染斑马鱼

目的建立斑马鱼模型研究迟缓爱德华菌的致病性及感染途径。方法应用绿色荧光蛋白标记迟缓爱德华菌,追踪观察其感染斑马鱼的动力学过程及病理组织学变化。结果病理组织学检查以肝脏水肿变性,肝细胞萎缩、坏死、脱落,脾脏散在增生性结节、充血、水肿、淋巴细胞大量缺失等病变为主;感染后,该菌先后在斑马鱼肠道、鳃和皮肤中定植。结论斑马鱼可作为研究迟缓爱德华菌致病性的动物模型。肠道、鳃和皮肤可能是迟缓爱德华菌先后感染斑马鱼的主要途径。     

美洲黑石斑迟缓爱德华氏菌分离、鉴定及致病性研究

养殖美洲黑石斑(Centropristis striata)发生以“内脏白点”为主要临床症状的暴发性死亡, 为明确美洲黑石斑患病原因, 对患病鱼进行了病原分离、鉴定及致病性研究, 以期为防治美洲黑石斑迟缓爱德华氏菌病提供参考依据。患病的美洲黑石斑的症状主要表现为鳃和内脏组织如脾脏及肾脏上布满白点。从患病鱼的病灶处分离纯化到一株优势致病菌株(ZS201807), 通过对该菌株形态特征、生理生化特性和16S rDNA基因测序等综合分析, 鉴定该菌为迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)。人工感染实验证实此菌株可引起健康美洲黑石斑发病并表现出与自然发病相似的症状。利用组织切片和电镜超薄切片技术对患病美洲黑石斑鱼的肝脏、脾脏、鳃丝等6种组织进行组织病理学分析。组织病理结果显示, 脾和肾是感染较严重的主要靶器官, 脾脏组织内大量红细胞浸润, 出现严重瘀血; 鳃丝毛细血管扩张; 肾小管管腔狭窄, 肾小球肿大, 上皮细胞肿胀, 细胞空泡化。超微病理显示, 病鱼脾脏和头肾组织有大量杆状细菌积聚。药敏试验发现该菌对环丙沙星(5 μg/片)、四环素(30 μg/片)、恩诺沙星(5 μg/片)等14种药物敏感; 对青霉素(10 U/片)、阿奇霉素(15 μg/片)、丁胺卡那(30 μg/片)等13种药物耐受。证实此次养殖美洲黑石斑发病死亡的病原菌为迟缓爱德华氏菌。     

爱德华氏菌变异株C9605及对鳖的致病性研究

从患白板综合症的病鳖分离到一株细菌（C9605）,该菌为革兰氏阴性,直杆状,周生鞭毛。接触酶阳性,氧化酶阴性,还原硝酸盐,对多粘菌素不敏感,不利用柠檬酸盐和丙二酸盐作唯一碳源,不从甘露醇、蔗糖、海藻糖、L-阿拉伯糖产酸。根据这些特性,菌株可归于爱德华氏菌。但是该菌发酵木糖产酸,产生H₂S,耐青霉素,故鉴定为爱德华氏菌变异株（Edwardsiellaictalurivariationstrain）。人工感染实验证实,该菌株是鳖白板综合症的病原菌。     

Hui爱德华氏菌变异株C9605及对弊的致病性研究

从患白板综合症的病鳖分离到一株细菌（Ｃ９６０５）,该菌为革兰氏阴性,直杆状,周生鞭毛。接触酶阳性,氧化酶阴性,还原硝酸盐,对多粘菌素不敏感,不利用柠檬酸盐和丙二酸盐作唯一碳源,不从甘露醇、蔗糖、海藻糖、Ｌ－阿拉伯糖产酸。根据这些特性,菌株可归于Ｈｕｉ爱德华氏菌。但是该菌发酵木糖产酸,产生Ｈ２Ｓ,耐青霉素,故鉴定为Ｈｕｉ爱德华氏菌变异株。人工感染实验证实,该菌株是鳖白板综合症的病原菌。     

迟缓爱德华氏菌感染斑马鱼的模型构建及病理分析

【目的】本研究旨在建立迟缓爱德华氏菌感染斑马鱼的模型,以提供疾病模型用于病理学、药理学和药物学研究。【方法】通过不同途径对斑马鱼进行人工感染,模拟自然感染状态,并研究迟缓爱德华氏菌对斑马鱼的致病机理,包括死亡率、行为变化、生化指标和病鱼机体抗氧化能力的变化情况。【结果】比较3种感染途径,显示腹腔注射的致病力最强。迟缓爱德华氏菌感染后,斑马鱼表现出眼球突出、肛门出血、溃疡和腹水等症状。病理检查显示,感染后的斑马鱼发生急性炎症,可见肝细胞广泛坏死脱落,肝小叶萎缩,周围见吞噬细胞聚集。从患病斑马鱼体内分离出TX菌株,并通过特异性引物聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)鉴定为迟缓爱德华氏菌,确定该菌的半致死浓度LD50为3.65×102菌落形成单位(colony forming units, CFU)尾。与对照组相比,注射感染组的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力降低22.26%,丙二醛(malondialdehyde, MDA)显著升高16倍,酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)活性和碱性磷酸...     

An outbreak of Yersinia pseudotuberculosis infection in a small indoor breeding colony of red-bellied (Saguinus labiatus) tamarins

A spontaneous outbreak of yersiniosis caused by Yersinia pseudotuberculosis serotype IIB occurred in a small indoor breeding colony of red-bellied tamarins (Saguinus labiatus) during the winter of 1981. Of 35 monkeys at risk 6 died of an acute or subacute infection over a period of 23 days. Clinical signs were anorexia, weakness, listlessness and depression. The disease was characterized by focal necrosis of the liver, spleen, mesenteric lymph nodes, ulcerative enteritis, and the presence of colonies of Gram-negative bacilli in the lesions. Y. pseudotuberculosis was isolated from the liver, spleen, mesenteric lymph nodes and kidney but not from the blood, lung or intestine. Contaminated food was believed to be the source of infection.     

小鼠腹腔注射硫酸铍的病理形态学观察

目的研究腹腔注射硫酸铍（BeSO4.4H2O）对小鼠主要脏器的损害作用。方法将30只6周龄昆明（KM）雄性小鼠随机分为三组,分别予以不同剂量硫酸铍生理盐水溶液腹腔注射染毒,隔日一次,染毒两周。观察主要脏器的病理组织学变化并测定脏器系数。结果与对照组比较,染毒组心、脾、肾、睾丸脏器系数无显著差异,肝、肺脏器系数差异有统计学意义（P〈0.05）;对照组肺、肝病理学组织检查未见异常,低剂量组小鼠肺组织可见淤血、出血、支气管扩张出血,肺泡腔内有少量炎性渗出物、支气管周围炎、间质性肺炎、小叶性肺炎等;高剂量组小鼠肺组织可见支气管扩张出血,支气管腔内有大量炎性渗出物,支气管周围肺泡扩张,间质性肺炎、小叶性肺炎、融合性小叶性肺炎;低剂量组肝细胞水肿,可见点状坏死和小灶性坏死;高剂量组小鼠肝组织损伤严重,肝细胞排列紊乱,多数肝细胞呈细胞水肿,肝细胞胞质成空泡状,可见明显的点状坏死和小灶性坏死,并伴有炎细胞浸润,坏死区周围肝细胞细胞质呈嗜酸性变,轻度核固缩,并且肝细胞呈不同程度的胞质疏松,肝窦以及肝中央静脉扩张有广泛变性、坏死等病理改变。睾丸、心、脾、肾未见明显异常。结论小鼠腹腔注射本试验剂量的硫酸铍后主要引起肺组织和肝脏损伤,其它脏器未见明显异常。     

Pathomorphologic findings in short-tailed voles (Microtus agrestis) experimentally-infected with Frenkelia microti.

Following oral infection of Microtus agrestis with sporocysts of Frenkelia microti, transient focal necrosis and cellular infiltrations in the liver, hyperplasia of lymphoid organs, and inflammatory infiltrations in the heart, pulmonary veins, skeletal muscles and brain occurred during the first asexual multiplication period of the parasite in the liver. Frenkelia cysts were first observed in the brain 23 days after infection.     

Disseminated cytomegalovirus disease in the guinea pig

Two guinea pigs (Cavia porcellus), which were housed conventionally in separate animal facilities and had not been experimentally manipulated, were found to have evidence of disseminated cytomegalovirus disease at necropsy. Microscopic examination revealed multiple focal areas of necrosis in numerous organs. The spleen, liver, kidney and lungs were affected particularly. These lesions contained numerous cells with large intranuclear and cytoplasmic inclusion bodies resembling cytomegalovirus inclusions. Characteristic cytomegalovirus virions were observed by electron microscopy in both cases. Antigens of guinea pig cytomegalovirus were detected in paraffin sections of lesions from both cases with an immunoperoxidase technique. Although subclinical infection is common, this is the only contemporary report of disseminated disease due to cytomegalovirus in guinea pigs.     

蟹栖异阿脑虫寄生大菱鲆及其组织病理学研究

论文首次报道了蟹栖异阿脑虫(Mesanophrys carcini)在养殖大菱鲆体内的寄生情况以及所引起宿主的组织病理学变化。观察结果表明,感染的苗期大菱鲆的大部分器官组织包括皮肤、鳍、鳃、眼、脑、心脏、肝脏、肾脏、脾脏、胰腺和消化道等以及器官组织间隙中都发现了寄生的蟹栖异阿脑虫,属于全身性感染;而对于成鱼,蟹栖异阿脑虫主要寄生于皮肤、鳍和鳃等器官组织;严重感染者,蟹栖异阿脑虫可侵入其脑、肝脏、肾脏和心脏等器官组织,但数量不多。蟹栖异阿脑虫在大菱鲆体内的寄生能够引起病鱼各器官组织发生不同程度的组织病理学改变。该病在幼鱼和成鱼身上所表现出较一致的病理学特征为:鳃小叶呼吸上皮细胞增生;脑膜炎和脑组织液化性坏死;肾脏和脾脏造血组织坏死;肝脏中央静脉和窦状隙扩张;肌纤维发生凝固性坏死和眼的脉络膜充血、水肿;单核巨噬细胞浸润。研究认为,蟹栖异阿脑虫寄生引起的鳃损害使病鱼呼吸困难,窒息是病鱼发生死亡的主要原因,而虫体寄生导致的各器官组织变性,坏死,使得病鱼器官功能衰竭可加速鱼的死亡。另外,文中还探讨了蟹栖异阿脑虫入侵大菱鲆的可能途径,认为破损的皮肤和鳃是入侵的主要途径。研究结果告诉我们,在大菱鲆养殖过程中防止鱼体擦伤,保持池底清洁对于预防疾病的发生非常重要;对该病的治疗应采取外部杀虫和内部口服药物相结合的方式。     

Mouse pancreas involvement in murine hepatitis virus infection]

After intraperitoneal inoculation with mouse hepatitis virus (MHv) into mice, the excretory cells of the pancreas showed a marked vacuolar degeneration concomitantly with hepatitis. MHV-specific antigen was evidenced in the cytoplasm of infected cells. Electron microscopy revealed a number of virions within the matrix, spaces of the endoplasmic reticulum and areas of focal cytoplasmic necrosis. The virus titer of the pancreas was equal or superior to that of the liver at least in early stage of infection.     

镰刀菌对鱼类致病性和组织病理研究

研究采用4种不同的人工感染方式,对模式鱼种金鱼实施镰刀菌(Fusarium spp.)FF08人工感染,以期探讨镰刀菌在不同感染方式下对鱼体的致病强度,同时通过石蜡切片和HE染色进一步研究了其对鱼体组织病理性损伤机制。结果表明:腹腔、肌肉和创伤感染均对金鱼有很强的致死性,15d内死亡率分别达到100%、93%和100%,鱼体均出现与自然发病相同的发病症状。病理分析表明镰刀菌FF08感染可引起鱼体肌肉组织、肝、肾、肠道均出现较严重的损坏。主要表现为肌纤维细胞变性、坏死、溶解,大量炎细胞浸润,并有菌丝侵入肌肉组织;肝细胞水肿、充血、出血、血管发生血栓,并且镰刀菌分生孢子侵入组织,有强烈的细胞炎性反应;肾脏充血、出血、部分组织坏死崩解;肠道堵塞、肠系膜脱落等病理症状。研究将为鱼类镰刀菌病的侵染机制及防治奠定理论基础。       

The infectivity and pathogenicity of hepatitis A virus live-attenuated vaccine strain H2 in type I interferon receptor-deficient mice

Hepatitis A virus (HAV) live-attenuated vaccine H2 strain has been approved for clinical use for decades with ideal safety profiles in nonhuman primate models and humans. Recently, type I interferon (IFN) receptor-deficient mice were shown to be susceptible to HAV infection. Herein, we sought to determine the infection and replication dynamics of the H2 in Ifnar^-/- mice that lack type I IFN receptor. Following intravenous injection, the H2 failed to cause obvious clinical symptoms in Ifnar^-/- mice, and no significant upregulation in serum alanine aminotransferase (ALT) levels was observed. Notably, the histopathological examination showed that there were significant focal infiltrations of lymphocytes and neutrophils in the portal area, but no focal necrosis was observed in liver tissues. Viral RNAs sustained in the liver, and the infectious virus could be recovered from the liver tissue until 42 days post-infection. More importantly, H2 infection induced obvious viremia and persistent viral shedding in feces. In addition, robust HAV-specific humoral immune responses were induced in Ifnar^-/- mice. Overall, our study revealed the safety profile of H2 in Ifnar^-/- mice, which not only helps understand the attenuation mechanism of H2, but also expands the application of the Ifnar^-/--/- mouse model for HAV studies.     

Isolation of Aeromonas hydrophila from a captive caracal lynx (Felis caracal)

Aeromonas hydrophila was isolated from the internal organs of a captive caracal lynx (Felis caracal) which died of acute septicemia. Grossly, patchy areas of focal necrosis were found in the lungs, liver and kidney; there was ulceration in the stomach and intestines. Microscopically, lesions contained cellular debris, neutrophils, lymphocytes and gram-negative bacilli. This is the first report of isolation of Aeromonas hydrophila from a captive wild animal in Nigeria.     

白细胞介素-16在脓毒症肝和肺组织中表达的免疫组织化学研究

观察白细胞介素－16（interleukin-16,IL-16)在脓毒症时肝和肺组织中的细胞定位及分布,并探讨其在脓毒症发病中的作用和意义。应用新型敏感的免疫组织化学方法（超敏感－SP法）检测本校近年收集的18例感染、败血症和脓毒症尸检肝和肺组织白细胞介素－16的原位表达,在肝组织中IL－16主要定位于肝窦枯否细胞、单核细胞以及部分中性粒细胞、阳性率达72.3%。肝细胞形态改变主要包括肝窦扩张充血,枯否细胞增生肿胀,肝细胞变性及不同程度的灶性坏死,在肺组织中IL－16定位于肺部质及感染灶内的巨噬细胞,中性粒细胞以及少量淋巴细胞,其阳性率达66.7％。肺组织形态改变主要包括肺泡壁毛细血管扩张充血,间质及肺泡壁内大量炎性细胞浸润,部分肺泡扩张,肺泡壁断裂;可灶性坏死,坏死区肺结构消失,纤维组织增生。同时,观察到IL－16随组织病理变化的加重表达增强的趋势。本研究结果提示IL－16可能在脓毒症所致脏器损害中发挥重要作用。