芳香化酶抑制剂letrozole对赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)性逆转的作用

在繁殖季节,采用腹部埋植方式,用非类固醇型芳香化酶抑制剂（aromatase inhibitor,AI）letrozole以5mg／kg体重的剂量处理2龄雌性赤点石斑鱼（每4周埋植1次,共埋植2次）,检查埋植后性腺组织结构、血清性类固醇激素以及脑和性腺芳香化酶活性的变化。结果显示：一次埋植AI即可有效诱导雌性赤点石斑鱼发生不同程度的性逆转;性腺成熟指数明显下降;性腺中卵细胞退化,精原细胞增殖,出现大量精母细胞和精子细胞;性逆转雄鱼的精巢在组织结构上与正常雄鱼精巢没有明显差异,部分鱼成为功能性雄鱼。第一次埋植AI后4周轻微挤压腹部有14．3％的鱼可排精,精子活力与正常雄鱼相同。第二次埋植后明显提高性逆转效果,排精率在第6、8周分别达到35．3％和48．4％。此外,埋植AI后性腺芳香化酶活性显著降低,化脑郝芳香化酶活性的变化不明显;血清11-酮基睾酮（11-ketotestosterone,11-KT）浓度显著增加,雌二醇（estradiol-17β,E2）水平显著降低,而睾酮（testosterone,T）含量无明显变化。这些结果表明,AI主要通过抑制内源性E2的产生并提高11-KT水平,从而诱导赤点石斑鱼由雌性转变为雄性。     

壳聚糖-HCG缓释制剂对鱼类生殖内分泌机能的影响

以壳聚糖为原料制备壳聚糖-HCG缓释制剂,进行激素埋植实验,间隔一定时间检测雌和雄鱼性腺发育、血清主要性激素含量和繁殖内分泌相关基因表达特征。结果表明:在埋植壳聚糖-HCG缓释激素后,雌鱼性成熟系数（GSI）、血清睾酮（T）水平、血清雌二醇（E2）水平在630d内较对照组效果明显;雄鱼GSI仅在第6天显著高于对照组,血清T水平在第2、第14天高于对照组。血清E2水平在实验期间与对照组无显著差异。RT-PCR结果显示:性腺型P450芳香化酶（CYP19A）在性腺中表达丰富,心脏中最少。雌鱼性腺P450芳香化酶（CYP19A）基因mRNA相对表达量在第2、第6天显著高于对照组,雄鱼在第6天显著高于对照,雌鱼性腺雌激素受体（ER）基因mRNA相对表达量在1430d显著高于对照组,雄鱼在第6至第21天显著高于对照组。研究表明,壳聚糖-HCG缓释制剂一次埋植后可在21d内稳定持久地释放激素,对调节鱼类的生殖机能具有良好的促进效果。       

壳聚糖-HCG缓释制剂对鱼类生殖内分泌机能的影响简

以壳聚糖为原料制备壳聚糖-HCG缓释制剂,进行激素埋植实验,间隔一定时间检测雌和雄鱼性腺发育、血清主要性激素含量和繁殖内分泌相关基因表达特征。结果表明:在埋植壳聚糖-HCG缓释激素后,雌鱼性成熟系数(GSI)、血清睾酮(T)水平、血清雌二醇(E2)水平在6—30d内较对照组效果明显;雄鱼GSI仅在第6天显著高于对照组,血清T水平在第2、第14天高于对照组。血清E2水平在实验期间与对照组无显著差异。RT-PCR结果显示:性腺型P450芳香化酶(CYP19A)在性腺中表达丰富,心脏中最少。雌鱼性腺P450芳香化酶(CYP19A)基因mRNA相对表达量在第2、第6天显著高于对照组,雄鱼在第6天显著高于对照,雌鱼性腺雌激素受体(ERα)基因mRNA相对表达量在14—30d显著高于对照组,雄鱼在第6至第21天显著高于对照组。研究表明,壳聚糖-HCG缓释制剂一次埋植后可在21d内稳定持久地释放激素,对调节鱼类的生殖机能具有良好的促进效果。     

雄烯二酮和甲基睾酮诱导雄性日本鳗鲡性腺发育的作用

多次埋植雄激素雄烯二酮（ADSD）或甲基睾酮（MT）均可促进雄性日本鳗鲡（Anguilla japonica)性腺发育成熟,明显提高脑和垂体mGnRH,垂体GtH含量,埋植3次后,MT处理组的GSI及垂体GtH含量显著高于ADSD处理组,MT处理组血清GtH含量在第1次埋植后显著升高,而ADSD处理组在第4次埋植后才显贰高于对照组。这些结果表明：埋植ADSD和MT可反馈作用于雄性日本鳗鲡脑和垂体,促进GnRH和TtH的合成和分泌,进一步诱导精巢发育。而且MT的作用效果较ADSD快。     

LHRH-A缓释剂对雌性赤点石斑鱼卵巢发育、性类固醇激素分泌及脑垂体GTH细胞超微结构的影响

取75尾网箱养殖的2～3龄雌性赤点石斑鱼,分为3组（高、低剂量组和对照组）,各25尾。高剂量组埋植促黄体生成索释放激素类似物（LHRH—A）缓释剂,剂量为300μg／kg体重,低剂量组为100μg／kg体重,对照组埋植不含LHRH—A的药丸。分别在实验开始和埋植药丸后0、10、20、30、40天抽血,用放射免疫测定血清类固醇激素（E2、T）;解剖鱼体测定相关指标,计算性腺成熟系数;取性腺和肝脏组织常规组织学切片并透射电镜观察。埋植后第10-30天,两种剂量处理组的排卵率均高于对照组,高剂量组显著高于低剂量组。在第10天性腺成熟系数高剂量组为1．055％,卵母细胞已有部分迅速发育到Ⅳ期末（核偏位）;低剂量组相对缓慢。第20天性腺成熟系数高剂量组达1．858％,低剂量组为0．987％;处理组卵母细胞基本发育成熟。埋植后第10天,两处理组血清E2和T水平显著升高;第20天显著下降;此后E2保持在较低的水平,T显著低于对照组水平。超微结构的观察证实脑垂体GTH细胞在LHRH—A缓释剂诱导性腺发育成熟和排卵过程中处于活跃的合成与分泌状态。LHRH—A缓释剂能有效诱导赤点石斑鱼卵巢发育成熟和排卵,而性类固醇激素（E2、T）只与卵黄生成有关,与排卵无关。     

利用鱼类性逆转技术创制黄颡鱼XX雄鱼的方法

目前黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco Richardson)生产上使用的母本非常混杂, 成为影响黄颡鱼产业发展的一个突出问题。建立一个优良性状稳定的全雌家系对于全雄黄颡鱼和杂交黄颡鱼的生产尤为重要, 而将XX雌性黄颡鱼逆转为XX雄性黄颡鱼是创制全雌家系中的关键一步。黄颡鱼性染色体连锁分子标记的开发为鉴定XX雄鱼提供了技术支撑。研究使用不同浓度的17α-甲基睾酮(MT)和芳香化酶抑制剂来曲唑(LZ)处理黄颡鱼鱼苗54d (7—60日龄)。61日龄测量并统计各组鱼的存活率、体长及体重。解剖观察性腺结构, 结合性腺组织切片和性别分子标记分析各组实验鱼中XX鱼性腺发育情况。结果显示: 2种药物对黄颡鱼的存活率影响较小, 与对照组没有显著差异; MT处理的XX性腺为空腔状精小囊结构, 不能逆转为功能性精巢; 适当剂量的LZ可以将XX雌性黄颡鱼性逆转成正常的XX雄鱼, 诱导效果随着剂量的增加而增强。用完全逆转的XX生理雄鱼分别与XX雌鱼和YY雌鱼交配, 能够正常繁殖并具备较好的繁殖能力。研究建立了一种使用芳香化酶抑制剂来曲唑创制黄颡鱼XX雄鱼的方法, 为全雄黄颡鱼的品种改良及新品种的培育奠定了基础。     

石斑鱼性反转相关基因 ECaM的克隆及表达特征分析

用甲睾酮片饲喂 2 ～ 4 龄赤点石斑鱼 (Epinephelus akaara) , 6 周后 90% 以上的雌鱼性逆转为功能性雄鱼 . 运用抑制性差减杂交技术 (SSH) ,结合 SMART cDNA 合成和 RACE-PCR 方法,从性反转雄鱼性腺中克隆到钙调蛋白基因 (ECaM). 该基因 cDNA 全长为 582 bp ,开放阅读框长 450 bp ,编码的蛋白质由 149 个氨基酸组成, 5 ′端非编码区 74 bp , 3 ′端非编码区 58 bp. 虚拟 RNA 印迹表明, ECaM 在性反转雄鱼性腺中表达,而在正常雌鱼性腺中表达微弱 . 各种组织的半定量 RT-PCR 显示, ECaM 在脑、心、肝、脾、肾都有转录,在精巢和下丘脑中表达水平较高,而在肌肉中表达甚弱 . 性反转不同时期性腺的半定量 RT-PCR 及蛋白质印迹表明,性逆转过程中性腺里 ECaM 的表达量逐渐增加 . 上述结果提示钙调蛋白可能在赤点石斑鱼性逆转过程中发挥着作用, ECaM 可能是促使石斑鱼由雌向雄转变的重要功能基因之一 .     

埋植17α-甲基睾酮诱导点带石斑鱼性转化技术

论述了埋植17α-甲基睾酮诱导点带石斑鱼(Epinephelus malabaricus)性转化的方法,包括药物的处理、用量、手术操作等．3龄的雌性点带石斑鱼经过2次埋植外源激素手术转化为功能性雄鱼,139d后58％可挤出精液,301d后100％可挤出精液．功能性雄鱼用于人工繁殖,亲鱼自然产卵。1999～2000年2年内共孵出仔鱼7103万尾．所得仔鱼用于鱼苗培育,得到发育正常的幼鱼．认为埋植外源激素诱导点带石斑鱼完成性转化的方法简便可行,能满足规模化人工繁殖的需要．     

埋植17α—甲基睾酮诱导点带石班鱼性转化技术

论述了埋植17α-思虑在睾酮诱导点带石斑鱼（Epinephelus malabaricus)性转化的方法,包括药物的处理,用量,手术操作等3龄的雌性点带石班鱼经过2次埋植外源激素手术转化为功能性雄鱼,139d后58％可挤出精液,301d后100％可挤出精液,功能性雄鱼用于人工繁殖,亲鱼自然产卵,1999－2000年2年内共孵出存鱼7103万尾,所得仔鱼用鱼苗培育,得到发育正常的幼鱼,认为埋植外源激素诱导点带石斑鱼完成性转化的方法简便可行,能满足规模化人工繁殖的需要。     

高温和皮质醇对黄颡鱼性别分化的影响

研究以性染色体类型已确定且已有性别特异分子标记的黄颡鱼为研究对象, 开展高温与皮质醇诱导黄颡鱼(Tachysurus fulvidraco Richardson)XX个体雄性化组织学进程研究, 以期为环境应激诱导鱼类雄性化提供研究基础。通过对每尾鱼采用性别特异性标记鉴定遗传性别(XX或XY)及组织学鉴定生理型性别, 仅经过24d的处理(12—35日龄), 高温或皮质醇便能诱导XX遗传型个体雄性化。在此过程中, 部分XX遗传型个体卵母细胞受到抑制, 之后发育成带有卵巢腔的精巢结构。62日龄时, XX伪雄鱼性腺较正常XY雄鱼大, XX伪雄鱼体重与正常XY雄鱼相近, 而显著大于未发生性逆转的XX雌鱼。122日龄时, XX伪雄鱼从62日龄带有卵巢腔的精巢结构发育成具有典型的精小叶结构样精巢, 且都具有生理性雄鱼特有的生殖突, 推测这些雄鱼可能具有与正常雄鱼类似的生殖能力。部分XX个体对高温处理不敏感, 没有发生性逆转, 温度处理反而加快了卵巢发育的进程, 这些个体对高温的耐受性和另外一些发生性逆转的个体对温度的敏感性值得进一步研究。     

两栖动物性染色体的多样性及其 进化机制的研究进展

两栖动物性别决定类型和性染色体具有多样性的特点。在已发现异形性染色体两栖动物中,大部分物种Y或W染色体大于其对应的X或Z染色体,少数物种具有高度分化的Y或W染色体。同时两栖动物类群内基因组大小差异大,性染色体间分子水平上也存在差异。高频转换、偶然重组和染色体重排可能是两栖动物性染色体进化过程中的关键机制。本综述通过对两栖动物性染色体进化的深入探讨,揭示其遗传性别决定的机理,有助于对两栖动物性别人工调控的进一步探索。     

Multilocus autosomal sex determination

The two basic one locus sex determination models, diploid individual sex determination and parental sex determination, are generalized to the multilocus framework. As in the single locus case, it is established that there are two classes of polymorphic equilibria, equilibria with even sex ratio and equilibria with equal allele frequencies in the two sexes. The condition for external stability of this second class equilibria to invasion by a new mutant allele is that a new appropriately averaged sex ratio near the equilibrium be moved closer to the even sex ratio. However, stable polymorphisms with noneven sex ratio are not those that have a sex ratio as close as possible to 1/2, in contrast to the single locus case.Research supported in part by NIH grants GM 28016 and GM 10452 and a grant from the U.S.-Israel Binational Science Foundation     

鱼类性别与性别鉴定

性别分化和性别决定相互联系又有所区别,具双向潜力的未分化性腺经过程序性发生的一系列事件,发育成精巢或卵巢,并出现第二性征的过程称为性别分化,而性别决定则是确定性分化方向的方式。       

黑斑蛙的减数分裂研究

本文研究了黑斑蛙的减数分裂,发现其性染色体所形成的性二价体主要呈末端与末端联接,浓缩期占79.6％,中期Ⅰ占75％,这进一步证明黑斑蛙确实存在XY型性别决定机制,这种XY型性染色体虽形态相同,但已发生了质的分化,可能是同型异质。黑斑蛙的性染色体并不形成性泡,少数二价体有中间交叉。     

Temporal pattern of sex pheromone release by female Trichoplusia ni

The release rate of the pheromone component Z-7-dodecenyl acetate was determined for individual female Trichoplusia ni by using small glass tubes filled with Porapak Q to extract pheromone from air in the immediate vicinity of the everted gland. The change in release rate as a function of time was determined by taking sequential 5 min. samples from individual 4-day-old females through each pheromone release period over an entire night. The release rate was found to decline exponentially from a mean of 22 ng per min. initially to 12 ng per min. at the end of 20 min., the average length of a pheromone release period. Pheromone collections were also made from females of different ages, using a single tube of Porapak per female to collect pheromone for an entire night. The nightly mean release rate increased significantly with age, although the time spent releasing pheromone per night decreased significantly with age (to 6 days old).     

Sex hormones, central nervous system and pain

The aim of the present review, which highlights some relationships between sex hormones, the CNS and pain, is to provide reference points for discussion on one of the most intriguing aspects of pain pathophysiology: the presence of sex differences in the response threshold to phasic painful stimuli and in the incidence of chronic pain syndromes. The first part of the review deals with sex steroids and their mechanisms of action. In the second part, the connections between sex steroids, the CNS and pain are illustrated to introduce possible areas of discussion in the study of sex differences in experimental and clinical pain.     

黄河鲤性别决定时间和相关基因表达研究

鱼类性别决定和分化机制极为复杂,通过性腺组织切片鉴定得出黄河鲤从未分化性腺发育为Ⅱ期精巢、卵巢的时间为受精后第40天到第80天。选取一些可能参与黄河鲤性别决定分化相关的基因（amh、ar、cyp19a、cyp19b、dax1、dmrt1、er、foxl2、nobox、sox9a、sox9b、zp2）进行实时荧光定量PCR分析各个基因在受精后40d、45d、50d、55d、65d和80d的表达情况。结果显示性别决定相关基因在50d都有高表达,推测45-50 d为性别决定的关键时间。ar、amh、dax1、dmrt1、sox9a、sox9b六个基因在80d雄性表达量升高,且雄性明显高于雌性,推测这些基因参与精巢分化发育过程。cyp19a、cyp19b、foxl2、nobox、zp2五个基因在80d雌性表达升高,且高于雄性,推测其可能参与卵巢分化发育。     

温度对江黄颡鱼性分化的影响

通过组织学方法观察江黄颡鱼原始生殖细胞(PGCs)迁移、生殖嵴生成和性腺分化,并且探讨在不同温度培育下性腺分化的差异。实验结果显示:1日龄仔鱼PGCs位于鱼体中肠背方的脏壁中胚层中;5日龄时,PGCs迁移到背方的腹膜上皮;8日龄时,生殖嵴形成;14日龄时,原始性腺形成;23日龄时,性腺开始分化。从孵化后的第10天开始,分别用(20±0.5)、(24±1.0自然水温、对照组)、(30±0.5)和(34±0.5)℃4种水温培育仔鱼达25天。实验结束后统计结果显示:对照组和(20±0.5)℃组的雌、雄性比接近1∶1(分别为1∶1.09和1.22∶1);(30±0.5)℃组的为1∶4.89,雄性率达(83.3±0.7)%;(34±0.5)℃组的为2.85∶1,雄性率仅为(26.4±0.4)%。提示(30±0.5)℃可使幼鱼性腺发育趋向雄性,(34±0.5)℃则使幼鱼性腺发育趋向雌性。实验结果表明,江黄颡鱼的性分化是属于温度依赖型性别决定。     

芦笋性别决定与性别分化研究进展

从芦笋性别表现及其决定的遗传基础、性别分化途径,性别决定基因的定位以及性别分化特异表达基因的分离与分析等方面来综述芦笋性别决定与性别分化最新研究进展。目前,已构建了围绕芦笋性别决定基因M比较精细的遗传图谱,将M定位在L5染色体着丝点附近的0.63 cM区域内,并构建了含有8个跨叠克隆群的物理图谱,但由于大量重复序列的存在,跨叠克隆之间的空隙不能闭合;同时先后分离得到11个芦笋花器官发育特异表达基因,并通过序列分析和原位杂交等技术对这些基因的功能进行了分析。最后,对今后进一步研究提出了建议。